肝郁证失眠大鼠模型的建立与评价

目的探索肝郁证失眠病证结合大鼠模型的建立和评价方法。方法 24只SD大鼠随机分成正常对照组、模型组和酸枣仁汤组,每组8只,采用慢性夹尾刺激和腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)复合因子造模法建立肝郁失眠大鼠模型,酸枣仁汤组大鼠于造模第7d开始给予酸枣仁汤7.5g/(kg.d)灌胃,对各组大鼠进行宏观体征观察、行为学评价、血液流变学分析、病理学检查和下丘脑、海马组织、5-羟色酶(5-HT)和去甲肾上腺素(NE)检测。结果模型组大鼠睡眠节律明显改变,体重增长缓慢,学习记忆能力下降,血流变高、中、低切全血黏度均显著升高,下丘脑、海马组织的5-HT及NE含量存在紊乱(P<0.05或P<0.01),而酸枣仁汤组对上述指标均有改善(P<0.05或P<0.01)。结论采用慢性夹尾刺激和腹腔注射PCPA复合因子造模法建立的肝郁失眠证大鼠模型具有可行性。     

幼兔灌肠与肠道细菌移位关系的实验研究

目的了解经肛门途径清洁灌肠及经口服途径全肠道灌洗对幼龄兔肠黏膜屏障功能及细菌移位的影响,以期选择更为安全的方法;并对灌肠后细菌及内毒素移位的机制进行探讨.方法选用幼龄兔30只,随机分成3组,每组10只,分别为经肛灌肠组(A),经口全肠道灌洗组(B)及空白对照组(C).依次取肠系膜淋巴结(MLN)、肝、脾、肺匀浆,并抽取门静脉血液、胆汁,分别行细菌培养及药敏实验,并行血浆内毒素测定.结果口服清肠组及灌肠组与对照组三者之间差异均有显著性(P<0.05).结论灌肠组和口服清肠液组,都可明显地引起肠道细菌移位,而灌肠组较口服清肠液组更为明显.     

单核细胞趋化蛋白-1 DNA疫苗治疗姥鲛烷诱导BALB/c狼疮鼠模型的实验研究

目的 应用单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）基因片段的DNA疫苗免疫姥鲛烷诱导的BALB/c狼疮鼠模型,研究MCP-1 DNA疫苗对狼疮鼠模型的免疫抑制作用以及对肾脏的保护效果。方法 BALB/c小鼠随机分为4组：狼疮鼠模型组、疫苗组、空质粒组、正常对照组。制备编码MCP-1基因片段的DNA疫苗,接种于疫苗组。测定各组小鼠体质量、24 h尿蛋白定量,ELISA法测定血清MCP-1抗原和抗体水平,免疫荧光法检测血清ANA;HE染色光镜下观察小鼠肾脏病理变化,免疫组化检测MCP-1、CD68在肾脏内的表达。结果 24周时狼疮鼠模型组、疫苗组、空质粒组和正常对照组间体质量和24 h尿蛋白定量差异有统计学意义,F值分别为20.31,6.74,P值均 < 0.05,LSD检验示疫苗组与狼疮鼠模型组和空质粒组之间差异有统计学意义（P值均 < 0.01）。狼疮鼠模型组、疫苗组、空质粒组和正常对照组血清MCP-1抗原水平分别为（572.6 ± 58.55）、（169.52 ± 28.71）、（601.98 ± 83.43）和（61.11 ± 66.12） ng/L,差异有统计学意义（F = 143.09,P < 0.05）,LSD检验示疫苗组与狼疮鼠模型组、空质粒组之间差异有统计学意义（P < 0.01）;四组的血清MCP-1抗体水平分别为（357.88 ± 82.41）、（770.14 ± 220.91）、（294.25 ± 177.22）和（129.73 ± 168.24） ng/L,方差分析示F = 15.81,P < 0.01,LSD检验示疫苗组与狼疮鼠模型组、空质粒组和正常对照组之间差异有统计学意义。ANA抗体阳性率四组间差异无统计学意义。疫苗组和正常对照组与狼疮鼠模型组和空质粒组比较,肾脏损伤明显减轻,肾脏内MCP-1和CD68阳性细胞明显减少。结论 MCP-1质粒DNA疫苗能够有效抑制狼疮鼠模型血清中MCP-1抗原表达,并诱导MCP-1抗体水平升高。     

糖尿病大鼠海马CA1区超微结构观察

目的 观察链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）糖尿病大鼠海马CA1区超微结构变化。方法 SD雄性大鼠18只随机分为实验组、治疗组及对照组,用STZ复制糖尿病动物模型,饲养12周后测血糖,并进行灌注固定,应用透射电镜观察海马CA1区超微结构。结果 电镜下可见糖尿病大鼠海马CA1区神经元细胞核出现核沟,染色质浓缩并聚集;粗面内质网扩张、排列紊乱和脱颗粒;线粒体肿胀,部分空泡变性;髓鞘板层排列疏松,间隙加大．内部轴突砷经丝松解、弯曲;突触结构分界不清,突触小泡稀疏衙疗组超微结构与对照组比较无明显病变,结论 糖尿病时海马组织出现一系列超微病理改变,为进一步探讨海马结构与糖尿病引发学习和记忆功能障碍的关系提供了形态学依据。     

链脲佐菌素糖尿病大鼠下颌下腺超微结构观察

目的　观察链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠下颌下腺超微结构变化。方法　SD雄性大鼠18只,随机分为对照组、实验组及治疗组,用STZ复制糖尿病动物模型,饲养12周后测体重和血糖,取材制片应用透射电镜观察其超微结构变化。结果　与对照组体重[ ( 367 .33±26. 73 )g]和血糖[ (6 .49±0 .79 ) mmol/L]比较:实验组体重[ ( 156. 50±10 .13)g]减轻、血糖[ (27 .79±9 .28)mmol/L]升高,有显著性差异(P<0 .01);治疗组体重[ (354 .67±31 .94)g]、血糖[ (8. 75±2 .56)mmol/L]无显著性差异(P>0 .05)。与对照组比较,实验组下颌下腺电镜下主要变化为为:细胞核固缩,染色质致密;线粒体肿胀或空泡变性、嵴断裂;粗面内质网囊状扩张,断裂成短棒状,脱颗粒等。治疗组无明显改变。结论　糖尿病可导致下颌下腺组织出现一系列超微病理改变,为进一步探讨糖尿病发生机制提供了形态学依据。     

脉络膜恶性黑色素瘤的临床病理观察

目的：观察脉络膜恶性黑色素瘤的临床病理特征及影响预后的因素。方法：对19例脉络膜恶性黑色素瘤进行了病理观察,部分病例检测了S100、HMB45及超微结构观察。结果：男11例,女8例,平均年龄55．4岁;均为单眼患病：右眼12例,左眼7例;影像学检查示眼内占位。眼底荧光素血管造影显示“双循环”现象。组织学表现以梭形细胞为主。免疫表型6例,S100、HMB45均为阳性。3例电镜下显示了肿瘤细胞内数量不等的黑色素小体。结论：脉络膜恶性黑色素瘤应综合临床及辅助检查争取早期诊断、手术治疗。其预后与肿瘤的大小、细胞类型、侵犯范围等有关。对无色素型者要做免疫组化及电镜观察帮助确诊。     

大肠癌酶细胞化学及电镜观察

对７５例大肠癌组织中的碱性磷酸酶（ＡＫＰａｓｅ）、酸性磷酸酶（ＡＣＰａｓｅ）、琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨａｓｅ）、葡萄糖－６－磷酸酶（Ｇ－６－Ｐａｓｅ）、焦磷酸硫胺素酶（ＴＰＰａｓｅ）活性进行了细胞化学检测及电镜观察，结果表明；ＡＫＰａｓｅ活性多呈阴性反应，ＡＣＰａｓｅ、ＳＤＨａｓｅ、Ｇ－６－Ｐａｓｅ、ＴＰＰａｓｅ四种酶活性在大肠癌明显低于大肠正常粘膜及腺瘤（Ｐ＜０．０１），在高分化癌组明显高于低分化癌组（Ｐ＜０．０５），在淋巴结无转移组明显高于有转移组（Ｐ＜０．０５），提示：对大肠癌组织同时测定ＡＣＰａｓｅ、ＳＤＨａｓｅ、Ｇ－６－Ｐａｓｅ、ＴＰＰａｓｅ活性，并在超微结构上对酶反应颗粒定位观察，能在一定程度上反映大肠癌细胞的功能状态，可以作为判断大肠癌生物学行为及预后的重要指标之一。     

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞及脾脏淋巴细胞超微结构作用的实验研究

目的：观察新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠治疗作用及对滑膜细胞、脾脏淋巴细胞超微结构的作用。方法：将60只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、新风胶囊组和雷公藤组，每组15只，制备完全佐剂并分别向除正常对照组以外其余动物右后足跖皮内注射0．1ml致炎。电镜观察滑膜细胞、脾脏淋巴细胞超微结构变化（包括线粒体肿胀、空泡变、嵴突病变等），计算各组线粒体病变率。结果：与治疗前比较，新风胶囊组及雷公藤组治疗后右后足跖肿胀度显著降低（P＜0．05）；与模型对照组比较，新风胶囊组和雷公藤组治疗后模型大鼠关节滑膜细胞线粒体的病变率显著降低（P＜0．05）；新风胶囊组脾脏淋巴细胞线粒体病变率显著降低（P＜0．05），而雷公藤组脾脏淋巴细胞线粒病变率差异无显著性（P＞0．05）。与雷公藤组比较，新风胶囊组治疗后滑膜细胞及脾脏淋巴细胞线粒体病变率显著降低（P＜0．05）。结论：新风胶囊与雷公藤均能降低佐剂性关节炎大鼠病变关节的肿胀度，新风胶囊改善佐剂性关节炎大鼠滑膜和脾脏的超微结构病变的作用优于雷公藤，这可能是新风胶囊治疗作用的形态学基础。     

超微病理技术中锇酸理化状态的质量控制

目的探讨锇酸固定剂防挥发新技术,并比较不同保存方法对病理组织标本制备电镜样品时使用的锇酸固定剂防挥发的影响。方法将传统的棕色磨口瓶保存法、冷冻保存法与双层乳胶封装保存法进行比较,观察储存锇酸固定剂的冰箱中空气的PM1. 0、PM2. 5以及PM10的数值变化,从而判断锇酸挥发情况。结果双层乳胶封装保存法防锇酸挥发效果显著优于其它储存方法。在内层乳胶手套无破损的情况下,外层乳胶手套始终保持未被锇酸污染而变黑。储存锇酸的冰箱内壁及冰箱内与锇酸一同存放的其余试剂等的包装,肉眼观察均清洁无污染。测量结果显示:常温下室内PM1. 0数值约为10μg/m~3、PM2. 5数值约为15μg/m~3、PM10数值约为18μg/m~3,在未存放锇酸以及采用双层乳胶封装保存法存放锇酸的4℃冰箱中,三项指标数值与室内环境中记录的数值基本相等。采用棕色磨口瓶保存法储存锇酸时,冰箱内空气中PM1. 0、PM2. 5以及PM10的记录数值成倍增加。结论双层乳胶封装保存法可以有效防止锇酸挥发,在有效避免对电镜制样工作人员身体毒害的同时,有效防止实验设备和环境受到污染,值得推广应用。     

肝圆韧带透明细胞肌黑色素细胞瘤

目的：探讨肝圆韧带透明细胞肌黑色素瘤的临床病理特征。方法：通过HE、组化、免疫组化及电镜观察1例透明细胞肌黑色素细胞瘤。结果：女性22岁,发生于肝圆韧带,肿瘤由中等长梭形及上皮样梭形细胞组成,胞质透明或淡染伊红、胞核圆或卵圆形居中或偏好,明显小红核仁,核分裂象罕见,肿瘤内富有明显玻璃样变厚壁血管,呈分支状、条索状或团块状广泛分布,将瘤细胞分隔成束状或巢状结构,组化染色显示胞质富含糖原颗粒,黑色素染色阴性。免疫表型：HMB45强阳性,SMA及actin阳性,S－100蛋白部分阳性。超微结构：瘤细胞质内可见Ⅱ-Ⅲ期黑色素小体。结论：该例为具有独特的、以梭形透明细胞为主的肌样黑色素细胞肿瘤,属于血管周细胞肿瘤家族中的一新成员。