子宫内膜样腺癌中Id-1、Smad4和p21WAF1/CIP1蛋白及mRNA的表达

目的 探讨分化抑制因子-1(Id-1)、DPC4/Smad4和p21WAF1/CIP1蛋白及其mRNA在正常子宫内膜、子宫内膜增殖症和子宫内膜样腺癌(EA)组织中的表达及其临床病理学意义.方法 采用免疫组织化学和原位分子杂交方法,检测30例正常子宫内膜组织、30例单纯性增生过长、30例复杂性增生伴不典型增生、72例EA组织中Id-1、Smad4和p21WAF1/CIP1蛋白及其mRNA的表达.结果 Id-1、Smad4和p21WAF1/CIP1蛋白及三者mRNA在EA中的表达率分别为86.1%(62/72)、44.4%(32/72)、63.9%(46/72)、73.6%(53/72)、41.7%(30/72)和61.1%(44/72),Id-1和p21WAF1/CIP1阳性率明显高于正常和各型增生内膜;而Smad4则相反;Id-1蛋白及mRNA过表达与组织学分级、临床分期、浸润程度和淋巴结转移有关(P值均<0.05);Smad4和p21WAF1/CIP1蛋白及mRNA阳性表达与组织学分级、临床分期和浸润程度有关(P值均<0.05);Id-1、Smad4和p21WAF1/CIP1蛋白与相对应的mRNA呈正相关;Id-1与Smad4表达呈负相关.结论 Id-1、Smad4和p21WAF1/CIP1蛋白及mRNA表达异常与EA的发生发展有关,有可能成为判断子宫内膜组织癌变和转移的重要指标.     

人蜕膜移植建立NOD-SCID鼠子宫内膜异位症模型

目的 探讨采用蜕膜建立人子宫内膜异位症移植动物模型的可行性。方法 将早孕期蜕膜组织种植于NOD-SCID鼠腹部皮下,随机分成4组,分别在2、4、6、8周,取出其皮下移植物送病理检查,并用免疫组织化学的方法观察其形态学、增殖活性方面有无改变。结果 16只小鼠均存活,有15只小鼠皮下病灶经HE染色可见明显的子宫内膜腺体和间质,成功率为93．75％。腺上皮细胞角蛋白、ki67染色均阳性,基质细胞波形蛋白染色阳性,8周移植物中一些基质细胞减少区域的腺上皮细胞波形蛋白染色阳性。结论 采用人蜕膜建立NOD-SCID小鼠子宫内膜异位症模型成功率高,模型形状显著且稳定。     

子宫内膜样腺癌中MDM2、EZH2和RUNX3的表达及其相关性

目的探讨MDM2、EZH2和RUNX3在正常子宫内膜、子宫内膜增殖症和子宫内膜样腺癌(endometrioid adenocarcinoma,EA)组织中的表达及其相关性。方法采用组织芯片技术和免疫组化SP法检测30例正常子宫内膜组织、30例单纯性增生内膜、30例复杂伴不典型性增生内膜、72例EA组织中MDM2、EZH2和RUNX3蛋白表达。结果 MDM2、EZH2和RUNX3蛋白在EA组织中的阳性表达率分别是80.6%(58/72)、83.3%(60/72)、26.4%(19/72),MDM2和EZH2阳性率明显高于正常和各型增生内膜(P均0.05);而RUNX3的阳性表达率明显低于正常和单纯性增生子宫内膜(P0.01)。MDM2过表达与组织学分级、临床分期、肌层浸润深度和淋巴结转移均无关;EZH2和RUNX3阳性表达与组织学分级、临床分期和肌层浸润深度均有关(P均0.05),与淋巴结转移均无关。EZH2与RUNX3蛋白表达呈负相关(rs=-0.262,P0.05)。结论 MDM2、EZH2和RUNX3蛋白表达异常可能与EA的发生、发展密切相关,有望作为反映EA生物学行为及预后的重要标记物。     

建立人子宫内膜异位症动物模型的方法学研究

目的:探讨采用人在位子宫内膜及异位子宫内膜建立子宫内膜异位症动物模型的可行性。方法:取32只NOD/SCID鼠,随机分为两组。将人分泌晚期在位子宫内膜及人异位子宫内膜分别种植于NOD/SCID鼠腹部皮下,为在位内膜组和异位内膜组。于第8周取出其皮下移植物行常规病理及免疫组织化学检查。结果:32只小鼠均存活。在位内膜组有15只小鼠皮下移植物经HE染色可见明显的子宫内膜腺体和间质,成功率为93.75%。腺上皮细胞角蛋白、ki-67染色均阳性,基质细胞波形蛋白染色阳性。而异位内膜移植物仅见到纤维结缔组织。结论:用人在位内膜建立NOD/SCID小鼠子宫内膜异位症模型成功率高,模型性状显著且稳定。     

脾气虚证蛋白质代谢动态变化的临床与实验研究

临床研究表明，５０例脾气虚证患者的木糖吸收率、血清总蛋白、白蛋白、血清游离氨基酸总量（ＦＡＡ总量）、必需氨基酸（必需ＡＡ）及支链氨基酸（支链ＡＡ）含量显著低于健康对照组（Ｐ＜０．０５）；随着木糖吸收率的降低，脾气虚患者的上述指标也逐渐降低，并与木糖吸收率呈直线正相关（Ｐ＜０．０５）。动物实验表明，随着脾气虚大鼠造模时间的延长，其肝细胞线粒体的肿胀、基质变淡、空泡变、嵴断裂及排列紊乱等病变逐渐加重，同时空肠肌细胞线粒体也有类似变化。提示脾气虚证蛋白质的变化是一个渐进过程，随着其营养物质吸收障碍的逐渐加重，血清氨基酸含量逐渐降低，肝细胞线粒体的病变逐渐显著，肝脏合成蛋白质的原料不足及能力逐渐下降，是导致其蛋白质代谢动态变化的机理     

兔骨髓单个核细胞自体移植对缺血心肌修复重建及心功能的改善

目的:观察兔骨髓单个核细胞自体移植至缺血心肌后的修复重建能力,以及心功能的改善状况。方法:实验于2005-07/2006-04在安徽省干细胞研究和治疗中心完成。①选取清洁级健康雄性新西兰白兔20只,随机数字表法分为心肌梗死模型组、骨髓单个核细胞组,10只/组。②两组兔均于左心耳下缘结扎前降支冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,心电图出现S-T段弓背样抬高为结扎成功。③2周后于股骨处行骨髓穿刺取5mL骨髓,分离纯化骨髓单个核细胞。骨髓单个核细胞组将Dil标记的含2.5×107细胞数目的细胞悬液400μL注射至心肌梗死周边区域,心肌梗死模型组仅注射等量L-DMEM培养基。③两组分别于造模前、细胞移植前及细胞移植后2,4周行多普勒心脏超声心动图检查,计算左室射血分数、左室短轴短缩率,进行心功能评价。④细胞移植8周后处死全部动物,制备组织冰冻切片,病理学检查移植细胞在梗死区的生长状况,镜下见有Dil标记阳性的细胞认为是存活的移植细胞。普通光学显微镜200倍视野下计数毛细血管数量。结果:骨髓单个核细胞组10只均进入结果分析;心肌梗死模型组因造模死亡4只,6只兔完成整个实验过程。①不同时相点心功能指标超声心动图检查结果:两组造模前、细胞移植前、细胞移植后2周左室射血分数、左室短轴短缩率均基本相似(P>0.05);移植后4周,骨髓单个核细胞组左室射血分数、左室短轴短缩率均明显高于心肌梗死模型组犤(69.1±5.3)%,(62.4±7.8)%;(34.3±8.4)%,(27.2±5.3)%;P均<0.05犦。②骨髓单个核细胞在梗死心肌中的存活情况:荧光显微镜下,骨髓单个核细胞组梗死灶边缘有Dil标记的细胞存活,免疫组化结果显示Dil阳性细胞表达心肌细胞特异性标志α-sarcomericactin。两组均未见炎性细胞浸润,但骨髓单个核细胞组新生毛细血管密度明显高于心肌梗死模型组犤(38.5±2.0)mm-2,(21.4±3.9)mm-2,P<0.05犦。结论:兔骨髓单个核细胞自体移植8周后存活于梗死心肌中,并表达心肌细胞特异性标志,移植后可明显改善左室收缩功能,增加毛细血管密度,但短期内未减轻心室重构的进程。     

Lecia ASP 300智能化组织脱水机的应用体会

随着病理技术的发展,自动脱水机以其卓越的性能及良好的处理效果已逐渐取代了人工脱水。我科自2004年使用Lecia ASP 300智能化全自动密封式组织脱水机以来在整个过程中对组织固定、脱水、透明、浸蜡的处理程序及效果进行了反复地观察与改进,从而提高了组织标本的处理效果,为制作好的HE切片打下良好的基础;并且在一定程度上减少了试剂挥发对人体和环境造成的伤害与污染。     

格林-巴利综合征患者腓神经病变的光镜和电镜观察

目的：探讨格式－巴利综合征腓神经活检的光,电镜表现与临床诊断及预后的关系。方法;对２６例ＧＢＳ患者腓神经活检进行了光镜及电镜观察。结果;有髓神经纤维的呈不同程度的减少,退行性变及脱髓鞘,在病变早期髓鞘改变呈松解,变形,断裂及多层状,部分增厚突向轴浆向。     

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠疗效及滑膜fas、fasL及bcl-2表达的影响

目的：观察新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠疗效及对病变滑膜fas,fasL,bcl-2表达的影响。方法：采用弗氏完全佐剂造模，设立正常组，模型组，甲氨喋呤（MTX）组，雷公藤（TPT）组和新风胶囊（XFC）组；记录各组大鼠的关节炎指数及体重变化；检测fas,fasL,bcl-2在局部关节滑膜组织中的表达。结果：与治疗前比较，XFC组，TPT组及MTX组治疗前后大鼠的关节炎指数显著降低（P＜0．01，P＜0．05）。XFC组给药前后体重增加值与正常组比较，差异无显著性（P＞0．05）；TPT组及MTX组给药前后体重增加值显著低于正常组和XFC组（P＜0．01）。与模型组比较，XFC组fasL表达显著增加（P＜0．05）；XFC组上述数据与MTX组，TPT组比较差异无显著性（P＞0．05）。结论：XFC与MTX，TPT一样能降低佐剂性关节炎模型大鼠的关节炎指数，XFC在增加模型大鼠的体重方面优于MTX和TPT；XFC可能通过促进fasL的表达，抑bcl-2的表达，促进增生滑膜细胞的凋亡，达到抑制滑膜增生的目的。     

新生乳鼠大脑神经胶质细胞对人巨细胞病毒易患性研究

目的探讨人巨细胞病毒（HCMV）体外感染新生Balb／c乳鼠原代培养大脑神经胶质细胞的特征及其敏感性。方法建立了新生乳鼠大脑皮质细胞原代培养方法并进行病毒感染。在感染后的不同时间,分别在光镜下连续观察摄影记录,并取样42份,进行抗HCMV单抗的免疫组化染色和地高辛标记的HCMV寡核苷酸探针检测病毒核酸及其胞内定位分布的原位杂交试验。同时,同样取正常对照组培养片36份进行试验。结果HCMV能感染新生乳鼠大脑皮质细胞,受感染的神经胶质细胞,在感染后第4天即可观察到细胞病变,表现为细胞肿胀变圆。测定感染细胞上清中病毒半数组织培养感染量,表明病毒在细胞内复制。免疫组化和原位杂交结果均证实,HCMV感染后48小时,即可分别在受感染细胞内检出病毒早期抗原和病毒核酸;且上述阳性结果的出现均比在同期受感染的神经细胞早,易观察。结论新生乳鼠大脑皮质神经胶质细胞较神经细胞对HCMV更为易感染,表明前者在HCMV致中枢神经系统感染的建立及病理的发生发展中具有重要作用。