子宫内膜样腺癌中MDM2、EZH2和RUNX3的表达及其相关性

目的探讨MDM2、EZH2和RUNX3在正常子宫内膜、子宫内膜增殖症和子宫内膜样腺癌(endometrioid adenocarcinoma,EA)组织中的表达及其相关性。方法采用组织芯片技术和免疫组化SP法检测30例正常子宫内膜组织、30例单纯性增生内膜、30例复杂伴不典型性增生内膜、72例EA组织中MDM2、EZH2和RUNX3蛋白表达。结果 MDM2、EZH2和RUNX3蛋白在EA组织中的阳性表达率分别是80.6%(58/72)、83.3%(60/72)、26.4%(19/72),MDM2和EZH2阳性率明显高于正常和各型增生内膜(P均0.05);而RUNX3的阳性表达率明显低于正常和单纯性增生子宫内膜(P0.01)。MDM2过表达与组织学分级、临床分期、肌层浸润深度和淋巴结转移均无关;EZH2和RUNX3阳性表达与组织学分级、临床分期和肌层浸润深度均有关(P均0.05),与淋巴结转移均无关。EZH2与RUNX3蛋白表达呈负相关(rs=-0.262,P0.05)。结论 MDM2、EZH2和RUNX3蛋白表达异常可能与EA的发生、发展密切相关,有望作为反映EA生物学行为及预后的重要标记物。     

建立人子宫内膜异位症动物模型的方法学研究

目的:探讨采用人在位子宫内膜及异位子宫内膜建立子宫内膜异位症动物模型的可行性。方法:取32只NOD/SCID鼠,随机分为两组。将人分泌晚期在位子宫内膜及人异位子宫内膜分别种植于NOD/SCID鼠腹部皮下,为在位内膜组和异位内膜组。于第8周取出其皮下移植物行常规病理及免疫组织化学检查。结果:32只小鼠均存活。在位内膜组有15只小鼠皮下移植物经HE染色可见明显的子宫内膜腺体和间质,成功率为93.75%。腺上皮细胞角蛋白、ki-67染色均阳性,基质细胞波形蛋白染色阳性。而异位内膜移植物仅见到纤维结缔组织。结论:用人在位内膜建立NOD/SCID小鼠子宫内膜异位症模型成功率高,模型性状显著且稳定。     

脾气虚证蛋白质代谢动态变化的临床与实验研究

临床研究表明，５０例脾气虚证患者的木糖吸收率、血清总蛋白、白蛋白、血清游离氨基酸总量（ＦＡＡ总量）、必需氨基酸（必需ＡＡ）及支链氨基酸（支链ＡＡ）含量显著低于健康对照组（Ｐ＜０．０５）；随着木糖吸收率的降低，脾气虚患者的上述指标也逐渐降低，并与木糖吸收率呈直线正相关（Ｐ＜０．０５）。动物实验表明，随着脾气虚大鼠造模时间的延长，其肝细胞线粒体的肿胀、基质变淡、空泡变、嵴断裂及排列紊乱等病变逐渐加重，同时空肠肌细胞线粒体也有类似变化。提示脾气虚证蛋白质的变化是一个渐进过程，随着其营养物质吸收障碍的逐渐加重，血清氨基酸含量逐渐降低，肝细胞线粒体的病变逐渐显著，肝脏合成蛋白质的原料不足及能力逐渐下降，是导致其蛋白质代谢动态变化的机理     

兔骨髓单个核细胞自体移植对缺血心肌修复重建及心功能的改善

目的:观察兔骨髓单个核细胞自体移植至缺血心肌后的修复重建能力,以及心功能的改善状况。方法:实验于2005-07/2006-04在安徽省干细胞研究和治疗中心完成。①选取清洁级健康雄性新西兰白兔20只,随机数字表法分为心肌梗死模型组、骨髓单个核细胞组,10只/组。②两组兔均于左心耳下缘结扎前降支冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,心电图出现S-T段弓背样抬高为结扎成功。③2周后于股骨处行骨髓穿刺取5mL骨髓,分离纯化骨髓单个核细胞。骨髓单个核细胞组将Dil标记的含2.5×107细胞数目的细胞悬液400μL注射至心肌梗死周边区域,心肌梗死模型组仅注射等量L-DMEM培养基。③两组分别于造模前、细胞移植前及细胞移植后2,4周行多普勒心脏超声心动图检查,计算左室射血分数、左室短轴短缩率,进行心功能评价。④细胞移植8周后处死全部动物,制备组织冰冻切片,病理学检查移植细胞在梗死区的生长状况,镜下见有Dil标记阳性的细胞认为是存活的移植细胞。普通光学显微镜200倍视野下计数毛细血管数量。结果:骨髓单个核细胞组10只均进入结果分析;心肌梗死模型组因造模死亡4只,6只兔完成整个实验过程。①不同时相点心功能指标超声心动图检查结果:两组造模前、细胞移植前、细胞移植后2周左室射血分数、左室短轴短缩率均基本相似(P>0.05);移植后4周,骨髓单个核细胞组左室射血分数、左室短轴短缩率均明显高于心肌梗死模型组犤(69.1±5.3)%,(62.4±7.8)%;(34.3±8.4)%,(27.2±5.3)%;P均<0.05犦。②骨髓单个核细胞在梗死心肌中的存活情况:荧光显微镜下,骨髓单个核细胞组梗死灶边缘有Dil标记的细胞存活,免疫组化结果显示Dil阳性细胞表达心肌细胞特异性标志α-sarcomericactin。两组均未见炎性细胞浸润,但骨髓单个核细胞组新生毛细血管密度明显高于心肌梗死模型组犤(38.5±2.0)mm-2,(21.4±3.9)mm-2,P<0.05犦。结论:兔骨髓单个核细胞自体移植8周后存活于梗死心肌中,并表达心肌细胞特异性标志,移植后可明显改善左室收缩功能,增加毛细血管密度,但短期内未减轻心室重构的进程。     

Lecia ASP 300智能化组织脱水机的应用体会

随着病理技术的发展,自动脱水机以其卓越的性能及良好的处理效果已逐渐取代了人工脱水。我科自2004年使用Lecia ASP 300智能化全自动密封式组织脱水机以来在整个过程中对组织固定、脱水、透明、浸蜡的处理程序及效果进行了反复地观察与改进,从而提高了组织标本的处理效果,为制作好的HE切片打下良好的基础;并且在一定程度上减少了试剂挥发对人体和环境造成的伤害与污染。     

雷米普利通过抑制胰岛素样生长因子-1减轻糖尿病肾病大鼠肾系膜基质聚集的研究

目的探讨雷米普利对糖尿病肾病(DN)大鼠胰岛素样生长因子-1(IGF-1)表达及肾系膜基质聚集的影响。方法 SD大鼠分为健康对照组(NC组,n=12)、DN组(n=11)、DN雷米普利干预组(DN+RAM组,n=12),腹腔注射链脲佐菌素构建DN模型,DN+RAM组予雷米普利3 mg·kg-1·d-1灌胃8周,检测肾重/体质量、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、24 h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐;HE染色和电镜观察肾脏病理改变;免疫组织化学检测肾组织IGF-1表达;Western blot检测IGF-1、纤维连接蛋白(FN)、IV型胶原(Col-IV)和基质金属蛋白酶(MMP)-2表达。结果与NC组比较,DN组大鼠肾重/体质量、FBG、Hb A1c、24h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐明显升高,肾小球肥大和系膜基质聚集明显,IGF-1、FN和Col-IV蛋白表达明显增加,MMP-2表达明显降低(P0.05)。与DN组比较,DN+RAM组上述指标除FBG和Hb A1c外均明显改善(P0.05)。IGF-1蛋白表达与24 h尿蛋白定量(r=0.937)、FN(r=0.896)和Col-IV(r=0.871)表达呈显著正相关,与MMP-2(r=-0.826)呈显著负相关(P0.05)。结论雷米普利可通过抑制IGF-1的表达,减轻肾系膜基质聚集,发挥肾脏保护作用。     

模拟人类巨细胞病毒(HCMV)先天性中枢神经系统感染小鼠模型的建立

目的寻找适合的研究 HCMV 先天性 CNS 感染是过程的动物模型。方法将人巨细胞病毒(HCMV)接种至6～8周龄 Balb/c 雌雄小鼠腹腔后,交配。待雌鼠临产时剖腹取出胎鼠脑双侧大脑皮层,进行病毒分离,病理学检测及用地高辛标记的 HCMV 寡核苷酸探针对大脑皮层细胞压印片进行原位分子杂交检测。结果病理学结果证实,鼠脑为侵袭性脑膜脑炎性病理改变,并在神经细咆内发现病毒特征性的大的核内嗜碱性包涵体;原位杂交结果显示,病毒核酸存在于受染神经细胞及神经胶质细胞核内及胞浆内;在鼠脑组织上清液中分离出 HCMV。且感染雌鼠所生子鼠死胎率及出生后一周内病死率明显高于正常对照组(P<0.005)。证明该病毒能侵袭Balb/c 小鼠,并通过胎盘感染其子代的中枢神经系统(CNS)。结论这种模拟人类 HCMV 先天性 CNS 感染的小鼠模型的建立所显示的许多相似的感染和病理过程,为进一步研究 HCMV 先天性 CNS 感染的病理过程和疫苗的应用提供了可能。     

格林-巴利综合征患者腓神经病变的光镜和电镜观察

目的：探讨格式－巴利综合征腓神经活检的光,电镜表现与临床诊断及预后的关系。方法;对２６例ＧＢＳ患者腓神经活检进行了光镜及电镜观察。结果;有髓神经纤维的呈不同程度的减少,退行性变及脱髓鞘,在病变早期髓鞘改变呈松解,变形,断裂及多层状,部分增厚突向轴浆向。     

具有神经内分泌分化的肺粘液样软骨肉瘤

目的：探讨肺原发性具有神经内分泌分化的粘液样软骨肉瘤的病理特征。方法：通过HE、组化、免疫组化及电镜观察1例肺粘液样软骨肉瘤。结果：肿瘤由粘液样基质和疏网状结构的梭形及圆形细胞、软骨母细胞样细胞和小圆形细胞组成,3种细胞梯度移行,形成典型粘液样软骨肉瘤及类似原始性神经外胚层肿瘤结构。组化染色显示AB（pH2.5),TB(pH4.0)阳性,Grimelius嗜银颗粒阳性。免疫表型：S－100蛋白、vimentin,NSE,Syn阳性,小圆细胞和软骨母细胞样细胞还显示HBA71、CgA、Leu7、EMA阳性。超微结构;瘤细胞胞质分布致密核心颗粒。结论：证实该例为肺原发性具有神经内分泌分化粘液样软骨肉瘤。     

人视网膜脱离后细胞及细胞器超微结构变化的观察

目的 观察和比较人类视网膜脱离后视网膜不同部位细胞的死亡方式及形态学变化。方法 在5名孔源性视网膜脱离患者的手术过程中分别取孔盖、原发孔后缘、术中造孔后缘的视网膜组织,制片后分别记为A、B、C组标本,采用电子显微镜观察各组视网膜细胞的死亡方式和形态学变化,及线粒体、内质网的形态学变化。结果 观察A组标本,视网膜脱离后,细胞表现为凋亡和坏死性凋亡,以凋亡细胞居多,未发现典型的坏死细胞,可见线粒体空泡化,内部结构丢失,内质网略膨大;B组标本中细胞出现坏死、凋亡、坏死性凋亡的表现,以坏死现象最典型,可以发现视锥细胞中的线粒体出现肿胀、嵴断裂和内部结构丢失,在神经纤维层旁发现正常的内质网结构;C组标本中发现组织中存在大量正常细胞,偶见凋亡和坏死细胞,未发现坏死性凋亡细胞,单纯的自噬现象更加多见;3组标本的观察结果进行对比,结果显示A、B、C 3组标本细胞死亡的程度依次减轻,正常细胞数量依次增加。结论 视网膜脱离后,视网膜细胞出现凋亡、坏死、坏死性凋亡以及自噬的形态学改变;距离原发病灶越近的视网膜,其细胞的死亡程度越重,细胞数量越少。