辐照中脱矿骨基质粒径对胶原结构影响的实验研究

目的探讨不同粒径大小对γ辐照中脱钙骨基质(demineralized bone matrix,DBM)中胶原结构的影响以及辐照保护剂的有效性。方法取同一供体的冻干皮质骨,依据Urist改良法制备不同粒径的(0.5~1.0 mm、1.2~2.8 mm、3.3~4.7 mm及5.7~7.0 mm)DBM样品,按照不同剂量分为:0 kGy、15 kGy、25 kGy及25 kGy(辐照保护剂),真空密封后储存于-80℃冰箱待用。通过扫描电镜观察胶原表面形态,大体观察胶原表面结构损伤的程度;将样品按照0.2 g/ml生理盐水比例在50℃条件下72 h,利用浸提液颜色深度观察胶原被辐照损伤的程度;使用2,4-二硝基苯肼(吸光光度计法)测定样品中羰基含量;十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺钠凝胶电泳法(Sodium dodecyl sulfatepolyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)测定样品中胶原分子量的变化;利用差示热量扫描法(differential scanning calorimetry,DSC)检测样品热变性温度以观察胶原热稳定性。结果样品浸提液颜色与γ辐照剂量相关度较高,未辐照样品浸提液颜色清亮,而在同粒径下随辐照剂量加大浸提液黄色逐渐加深,5.7~7.0 mm粒径组颜色相对较浅;25 kGy组相比于25 kGy+保护剂组浸提液颜色加深。扫描电镜观察到γ辐照导致胶原结构紊乱,纤维断裂,随着辐照剂量增大损伤区域增多,当粒径增大时,损伤区域有减少的趋势;相比于25 kGy组,25 kGy+保护剂组胶原结构性破坏减少。差示热量扫描法得出样品热交换曲线,随着粒径增大,热变性温度有增高的趋势,粒径间对比有统计学差异(F=189.4,P<0.001);同粒径间差异不明显。SDS-PAGE发现同粒径下γ辐照剂量愈大,胶原分子量愈小;同辐照条件下随粒径较小,高分子量胶原含量减少明显;225 kGy+保护剂组相比于25 kGy组,高分子量增多。羰基含量结果显示在同一粒径下,γ辐照使羰基含量增多,0.5~1.0 mm组(F=13.631,P=0.002),1.2~2.8 mm组(F=6.390,P=0.016),3.3~4.7 mm组(F=5.630,P=0.023),5.7~7.0 mm组(F=4.150,P=0.048)的差异均有统计学意义,不同粒径间随着粒径增大羰基含量逐渐减小但差异统计学意义(F=0.560,P=0.650)。结论γ辐照与胶原的氧化损伤具有明显的剂量反应关系,随着γ辐照剂量的增加,胶原损伤程度逐渐增加;DBM的粒径大小影响着胶原对γ辐照的敏感度,随着粒径的减小,DBM颗粒更易被γ辐照损伤;辐照保护剂在辐照过程中对胶原有一定程度的保护作用。     

颈椎类风湿关节炎的临床特点及诊疗进展

 类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是一种病因不明的慢性全身性自身免疫性疾病,多见于中年女性。主要表现为对称性、慢性、进行性多关节炎。关节滑膜的慢性炎症、增生,形成血管翳,侵犯关节软骨、软骨下骨、韧带和肌腱等,造成关节软骨、骨和关节囊破坏,最终导致关节畸形和功能丧失［1］。一般来说,RA可以出现在任何关节,掌指关节、近端指间关节、跖趾关节和腕关节往往是最初也是最常受累部位［2］。当病变发展到一定程度时,也可累及其他关节,例如脊柱。尽管胸腰椎也会受累,但颈椎是RA在脊柱中最好发的部位［3］。文献报道9%~88%的RA患者会累及颈椎,甚至有学者认为颈椎是仅次于手和足的RA好发部位,在所有RA患者中出现颈椎RA的比例超过50%,而RA病程进展至颈椎受累通常会经过平均十年的时间［4-5］。     

基于数字化技术建立距骨颈骨折螺钉固定安全通道的研究

 目的 探讨距骨颈骨折螺钉自距骨内侧壁安全固定时螺钉安全通道的建立。方法 限定志愿者年龄20~60岁,男性身高165~185 cm,女性身高155~175 cm,体质指数(BMI)< 25,既往踝、足部无骨折病史,非重体力劳动及长期站立工作者,X线片证实无关节退行性改变等。共获得男性33名,年龄21~59岁,平均43.7岁,身高168~184 cm,平均176.0 cm;女性22名,年龄22~60岁,平均43.2岁,身高158~172 cm,平均165.4 cm。对所有志愿者的踝部及足部进行CT扫描,将重建层厚为0.75 mm的图像数据以DICOM格式存入光盘,使用SuperImage^TM Orthopedics Edition1.1软件对图像进行显示和三维重建。测量距骨颈和跗骨管的高度,建立螺钉进入跗骨管的模型;模拟螺钉自距骨内侧壁远端中1/3和下1/3两点置入,并沿两条不同的方向走行,测量螺钉的最大长度及角度;最后使用SPSS 13.0软件对以上数据进行比较分析。 结果 获得距骨颈和跗骨管的高度值,同性别左右侧的差异无统计学意义;男性距骨颈和跗骨管高度均大于女性;获得螺钉自距骨颈穿出进入跗骨管的模型;获得以距骨内侧壁远端中1/3和下1/3为入点、自不同方向置入时螺钉的长度值和角度值;以距骨内侧壁远端中1/3为入点时螺钉固定的夹角较以距骨内侧壁远端下1/3为入点时明显更大;;计算出螺钉不同固定方向的长度、角度的安全范围。 结论 螺钉固定时应避免对距骨血运造成进一步破坏;距骨内侧壁中1/3是螺钉固定的良好入点;计算机数字化技术与距骨颈骨折内固定方式相结合可以提高手术安全性和可行性。     

预防骨科大手术后深静脉血栓形成的专家建议

骨科大手术术后易发生深静脉血栓形成（deep venous thrombosis，DVT），少数可造成肺栓塞导致死亡。有文献报道，我国骨科大手术后DVT的发生率与西方国家相当，但目前国内对DVT防治工作的重视程度远低于国外，而且没有相应的防治方案可供参考。     

微波原位灭活联合人工关节假体置换治疗四肢恶性骨肿瘤的疗效分析

 目的 探讨微波原位灭活联合人工假体置换术治疗四肢恶性骨肿瘤（侵袭范围超过骨全长2/3）的可行性。方法 2001年6月至2012年4月对19例侵袭范围超过骨全长2/3的原发恶性骨肿瘤及转移瘤患者采用微波灭活联合假体置换术进行治疗。男12例, 女7例;年龄11~65岁, 平均47岁。原发恶性骨肿瘤11例,转移瘤8例。股骨远端8例、胫骨近端6例、肱骨近端3例、股骨近端2例。术前X线、CT显示骨干皮质破坏小于骨全长的1/3,而MRI显示肿瘤侵袭范围超过骨全长2/3。依据MRI确定截骨范围,定制肿瘤型人工假体。采用常规肿瘤假体置换入路,按广泛切除原则充分显露瘤段骨及软组织肿块。使用铜网保护瘤段骨周围软组织,用2 450 MHz微波将瘤段骨内部加热到50 ℃,持续20 min,按术前测量长度进行截骨,人工关节假体重建,逐层缝合组织及皮肤。结果 手术时间平均100 min,术中失血量平均600 ml。随访10个月~5年,平均2.7年。原发恶性骨肿瘤患者中1例术后出现复发,带瘤生存;2例术后其他部位转移,死亡;余8例随访期间未出现复发或转移。6例转移瘤患者分别于术后5~20个月出现其他部位转移,死亡;2例随访期间未出现原位复发或转移。3例肱骨近端肿瘤患者术后肩关节外展、上举功能受限,其余患者无关节功能受限。结论 微波灭活联合人工假体置换术治疗髓腔内广泛受累的四肢恶性骨肿瘤,能最大限度地保留术后患者的肢体功能。     

椎体成形术对胸腰椎爆裂型骨折的治疗意义

目的：探讨腰腰椎爆裂型骨折撑开复位与椎体成形术后椎体结构和生物力学性能的变化。方法：收集6具新鲜成人尸体的胸腰椎标本，制成T11－L1、L2－L4、T12－L2节段标本共10具，用自由落体撞击试验造成中间椎体爆裂型骨折，撑开复位、用注射型自固定磷酸钙人工骨行椎体成形术。分别于骨折前、骨折撑开复位后、椎体成形术后用薄层CT扫描测量中间椎体内空隙，用双能X线骨密度仪测定骨密度，用万能材料试验机测定骨折前、椎体成形术后中间椎体与其上方椎间盘在前屈、后伸、侧屈和扭转就压力 下刚度的变化，并比较成形术后的伤椎及其下方的完整椎体的抗极限压缩测试结果。结果：8具标本造中间椎体爆裂型骨折模型成功。（1）骨折前椎体内无明显空隙；骨折并撑开复位后椎体内空隙体积平均为5．25cm^3，占椎体总体积的13．9％；椎体成形术后空隙减少，与骨折前相比差异无显著性意义。（2）骨折前椎体骨密度在正常范围，骨折并撑开复位后骨密度较骨折前降低；椎体成形术后，骨密度较骨折复位后及骨折前均明显升高。（3）椎体成形术后，伤椎的刚度与骨折前相比差异无显著性意义，抗极限压缩强度的均值低于其下方完整椎体，但差异无显著性意义；伤椎上方椎间盘在前屈和后伸应力下的刚度小于骨折前，但在侧屈应力下差异无显著性意义；标本在扭转应力下的刚度小于骨折前。结论：（1）撑开复位未能恢复胸腰椎爆裂型骨折椎体结构上的完整性，这可能是后路切开复位内固定术后发生内固定失败与矫正度丢失的重要原因。（2）应用注射型自固化磷酸钙人工骨行椎体成形术有助于伤椎的重建，术后脊柱的生物力学特性接近骨折前水平。     

可体内、外示踪的BMP2真核表达载体的构建和表达

目的 拟构建双顺反子增强型绿色荧光蛋白标记的人骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP2)真核表达载体,为其在真核细胞体内外示踪定位打下基础.方法 以重组质粒pcDNA3.1/CT-hBMP2为模板,结合已设计好的特异性引物,采用PCR方法获得BMP2片段,将其分别与克隆载体pTA2-T-easy和真核表达载体pSELECT-GFPzeo-MCS连接,转化入感受态DH5α细胞中,通过筛选得到含有绿色荧光蛋白的重组表达载体pSELECT-GFPzeo-hBMP2,并进行测序鉴定.将质粒转染CHO细胞后Western Blot检测BMP2蛋白表达,用RT-PCR检测BMP2mRNA表达.结果 琼脂糖电泳显示PCR产物为一条长约1216 bp的带,重组表达载体pSELECT-GFP zeo-hBMP2经双酶切可得到约1216 bp的片段,测序证实与Genebank中hBMP2序列完全相符,重组表达载体脂质体法转染CHO细胞48～72 h后荧光显微镜下证实转染成功,经RT-PCR证实CHO细胞中存在BMP2基因表达,采用免疫荧光化学方法证实载体中CHO细胞表达BMP2蛋白.经Western Blotting鉴定重组蛋白为分泌蛋白,相对分子质量在17×103左右.结论 成功构建可体内外示踪增强含双顺反子绿色荧光蛋白人BMP2真核表达载体.     

用于餐饮具和果蔬消毒的消毒剂的毒理学安全性研究

目的对用于餐饮具和果蔬消毒的消毒剂进行安全性评价,为制定用于餐饮具和果蔬消毒的消毒剂卫生标准提供科学依据。方法选取36个用于餐饮具和果蔬消毒的消毒剂,按《消毒技术规范》(2002年版)有关急性经口毒性、微核试验、皮肤刺激试验方法进行动物实验,并对产品的主要成分进行记录汇总。结果36个产品急性经口毒性试验结果均为实际无毒级,微核试验结果均为阴性,一次完整皮肤刺激试验结果为无刺激性的占72.2%,属于轻、中刺激性分别占25.0%、2.8%。结论用于餐饮具和果蔬消毒的受检消毒剂属实际无毒级,无致突变性,对皮肤无刺激性。     

用于阴道黏膜消毒产品的毒理学安全性评价

目的了解用于阴道黏膜消毒产品的毒性,以评价其使用安全性。方法采用动物试验方法,对41种用于黏膜消毒产品的毒性进行了评价。结果主要成分为碘伏类、醋酸洗必泰、季铵盐类、中草药和其他类的41个消毒产品,在急性经口毒性试验观察期内,均未发现试验动物有明显中毒反应,试验动物解剖未发现组织和脏器有异常病变。所试验的41种用于黏膜消毒的产品小鼠急性经口LD50均>5000 mg/kg体重,属实际无毒级。阴道黏膜刺激试验,碘伏类产品通过率为86.7%;醋酸氯己定类产品通过率为72.7%;季铵盐类产品通过率为83.3%;含中草药的产品通过率为80.0%;其他类产品通过率为75.0%。结论大部分用于阴道黏膜的产品属实际无毒级,较为安全。     

前外侧和外侧联合入路的股骨颈肿瘤刮除植骨及内固定术

目的 探讨前外侧和外侧联合入路肿瘤刮除植骨重建治疗股骨颈骨肿瘤的疗效.方法 2005年7月至2009年8月采用前外侧和外侧联合入路手术治疗股骨颈肿瘤12例,男7例,女5例;年龄1768岁,平均34岁.软骨母细胞瘤4例,原发性骨巨细胞瘤2例,纤维结构不良3例,骨囊肿3例.7例有病理性骨折,5例骨皮质变薄.按国际保肢协会股骨颈肿瘤分区H1区1例、H2区4例、H1,2区7例.前外侧Smith-Peterson入路行肿瘤刮除植骨,外侧Watson-Jones入路行内固定.内固定采用解剖钢板10例,经皮空心螺钉2例.结果 全部患者随访12～68个月,平均35个月.患者疼痛均消失,随访期间无复发,无病理性骨折、股骨头坏死、关节退变.1例出现股骨外侧皮肤麻木,术后6个月自行缓解;1例出现外展无力.11例恢复正常活动范围,前屈120°～135°,后伸9°～15°,外展30°～45°.国际骨与软组织肿瘤协会功能评分27～30分,平均29.2分.结论 前外侧"SP"入路可以充分暴露肿瘤部位,手术视野清晰,刮除彻底,复发率低;外侧"WJ"入路易于植入内固定,防止术后病理性骨折的发生.股骨颈骨折采用前外侧"SP"与外侧"WJ"联合入路肿瘤刮除植骨重建的近期疗效较好.

Abstract：

Objective To explore surgical procedure of combined anterior-lateral and lateral approach for the treatment of bone tumors of femoral neck. Methods Forty patients with bone tumors of femoral neck treated in Tianjin Hospital were included from July 2005 to August 2009. Of the patients, 12 who were treated with curettage and bone graft through combined anterior-lateral and lateral incision were analyzed in this study. There were 7 males and 5 females with an average age of 34 years ranging from 17 to 68 years. 4 patients were diagnosed as chondroblastoma, 2 giant cell tumor, 3 fibrous dysplasia, and 3 single bone cysts. 7 patients suffered from pathologic fractures, and 5 had presented thin cortical bone because of tumor involvement. There were 1 tumor located in H1 zone, 4 in H2 zone and 7 in H1,2 zone according to ISOLS femoral neck classification. All patients were treated by curettage and bone graft via anterior-lateral approach, 10 cases underwent internal fixation with anatomical plate, and 2 cases with canulated screws with lateral approach. Results The follow-up time ranged from 10 to 68 months with an average of 35 months.Pain disappeared in all patients, and there were not recurrence of tumor, pathologic fractures and avascular necrosis. One case had complained of lateral femoral skin numbness which may be caused by injures of femoral lateral nerves. One case had difficulties in the valgus of hip joint. The mean MSTS score was 29.2 points ranging from 27 to 30 points. Conclusion Anterior approaches of "SP" incision is helpful to thorough curettage which decrease the risk of recurrence due to good visualization and intemal fixation is easy to perform via lateral approaches. The result suggested that combined anterior-lateral "SP" and lateral incision is liable option in treatment of bone tumors of femoral neck.