卡介苗基因组DNA对哮喘小鼠模型过敏性气道炎症的影响

目的探讨腹腔注射卡介苗基因组DNA(BCGDNA)对哮喘小鼠模型的影响。方法BALB/c小鼠经鸡卵蛋白(OVA)免疫建立哮喘模型,分别于致敏前、激发时腹腔注射100μgBCGDNA,观察哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和嗜酸性粒细胞数(EOS),ELISA检测脾单核细胞(SMNC)培养上清和BALF中白细胞介素4(IL4)、IL5、IL12及γ干扰素(IFNγ)的含量变化,常规病理切片观察肺内炎症情况,ABPAS染色观察杯状细胞增生和黏液分泌情况。结果哮喘小鼠OVA致敏前及激发时腹腔注射BCGDNA后可明显增加BALF和脾单核细胞培养上清中IL12和IFNγ的产生,使IL4和IL5的产生减少,BALF中嗜酸性粒细胞减少,黏液过度分泌明显减轻。结论哮喘小鼠腹腔注射BCGDNA可诱导IL12和IFNγ产生,抑制Th2型细胞反应,减轻哮喘气道炎症。     

紫外线对皮肤免疫系统的影响

日光中的紫外线是影响人类健康的一个重要因素。皮肤是直接受到紫外线辐射的器官,也是最先受损的免疫器官。紫外线辐射不仅引起皮肤红斑、色素沉着及光老化等急慢性皮肤损伤,还通过引起皮肤释放先天免疫介质和影响免疫细胞间的相互作用调节皮肤免疫系统。紫外线对皮肤免疫系统的调节机制十分复杂,且紫外线诱导皮肤免疫抑制一直是光学免疫领域的研究热点,本文就紫外线对皮肤免疫系统的影响作一综述。     

生物技术药物实验课程建设的探索与实践?

为了使学生能够在学习理论知识的同时,获得动手实践的机会,进行了生物技术药物实验课程的建设,提出了"四个一"的实验课程建设目标,即编写一本易用的实验讲义、制作一套生动的媒体课件、培养一支专业的教学团队、搭建一个完善的实验平台。该实验课程的建设和实施提高了学生的学习兴趣,增强了教学效果,积累了课程建设经验,也为其他实验课程的建设和改革提供了有益借鉴。     

苦参碱对体外小鼠脾细胞增殖及腹腔巨噬细胞释放白细胞介素—1…

目的：研究苦参碱对小鼠脾细胞增殖及腹腔巨噬细胞释放白细胞介素－１（ＩＬ－１）及－６（ＩＬ－６）的影响，方法：（＾３Ｈ）ＴｄＲ参入法测定脾细胞增殖，胸腺细胞增殖法和Ｂ９细胞增殖ＭＴＴ法测定ＩＬ－１和ＩＬ－６活性。结果，苦对碱（１２５－５００ｍｇ．Ｌ＾－１）以剂量依赖方式显著抑制ＣｏｎＡ及脂多糖（ＬＰＳ）诱导的小鼠脾细胞增殖心及ＬＰＳ诱导的的小鼠腹腔巨噬细胞释放ＩＬ－２和ＩＬ－６。结论：苦参碱抑制体个     

钩端螺旋体膜表面蛋白LipL41基因的克隆、序列分析及表达

目的:进一步分析钩端螺旋体LipL41的免疫原性.方法:通过PCR的方法,以我国特有的钩端螺旋体流感伤寒群临海型lin6株(56609)的DNA 为模板,扩增目的基因LipL41,克隆至pcDNA3载体上,以自动测序仪测序后进行序列分析,然后克隆至原核表达载体pGEX-5T进行原核表达,Western印迹分析其免疫原性.结果:获得长1 068 bp的片段,DNA序列分析表明该菌株的LipL41基因与文献报道具有很高的同源性(95.0％～99.4％),在大肠杆菌中获得了表达,并与抗钩端螺旋体血清反应.结论:该抗原为致病性钩端螺旋体所具有的保守性抗原成分,可能在钩端螺旋体病的诊断和预防中发挥作用.     

苦参碱对细菌脂多糖诱导大鼠枯否细胞释放肿瘤坏死因子及白细胞介素-6的影响

目的是研究苦参碱对细菌脂多糖(lipopolysachrides,LPS)诱导经卡西霉素(calcimycin,Cal)预激活的大鼠枯否细胞分泌肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的影响以及对小鼠体内产生TNF和IL-6的影响。结果,苦参碱125,250及500mg·L^-1剂量依赖性抑制大鼠枯否细胞分泌TNF和IL-6;苦参碱50及100mg·kg^-1降低小鼠体内TNF和IL-6的水平。提示苦参碱的抗炎作用可能与其抑制TNF及IL-6的产生有关。     

苦参碱对细菌脂多糖诱导大鼠枯否细胞释放肿瘤坏死因子及白细胞介素-6的影响

目的是研究苦参碱对细菌脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｈｒｉｄｅｓ，ＬＰＳ）诱导经卡西霉素（ｃａｌｃｉｍｙｃｉｎ，Ｃａｌ）预激活的大鼠枯否细胞分泌肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）、白细胞介素６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６，ＩＬ６）的影响以及对小鼠体内产生ＴＮＦ和ＩＬ６的影响。结果，苦参碱１２５，２５０及５００ｍｇ·Ｌ－１剂量依赖性抑制大鼠枯否细胞分泌ＴＮＦ和ＩＬ６；苦参碱５０及１００ｍｇ·ｋｇ－１降低小鼠体内ＴＮＦ和ＩＬ６的水平。提示苦参碱的抗炎作用可能与其抑制ＴＮＦ及ＩＬ６的产生有关。     

苦参碱对脂多糖/痤疮丙酸杆菌诱导的小鼠肝炎及产生肿瘤坏死因子的影响

用小鼠致死性肝炎模型和TNF体外诱生的方法,研究苦参碱(Mat)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的经痤疮丙酸杆菌(propionibacterittm acnes,PA)预刺激的小鼠产生肿瘤坏死因子(TNF)以及致死性肝炎的影响。结果表明:Mat(10,50mg·kg^-1,ip,bid×3d)可降低血清TNF和ALT水平及小鼠对LPS致死毒性的敏感性,并可在体外抑制LPS诱导的经PA预刺激的小鼠腹腔巨噬细胞释放TNF。提示Mat的保肝作用与其抑制TNF释放有关。     

乙肝DNA疫苗pVAX-PS对树(鼠句)的免疫保护作用

目的:以树(鼠句)为实验对象研究乙肝DNA疫苗接种后所产生的免疫应答及对乙肝病毒攻击的保护作用.方法:以PCR法从adr亚型乙肝患者血清的病毒基因组中扩增含乙肝病毒的PreS2+S基因,插入pVAX1载体构建乙肝DNA疫苗pVAX-PS,并以此为候选疫苗,从股四头肌接种免疫树(鼠句).免疫接种方式为肌注2次,间隔2周.用ELISA法分析DNA免疫诱导的抗体水平及阳转率.DNA免疫后部分树(鼠句)用乙肝患者(HBsA+,HBeAg+,HBcAb+)血清进行病毒攻击实验,通过检测乙肝感染的各种血清学指标及肝组织病理的变化来评价DNA疫苗的免疫保护作用.结果:DNA疫苗免疫2周后开始检出HBsAb,6周后达到峰值,8周后所有免疫接种树(鼠句)抗体阳转;与阴性对照组相比,DNA疫苗免疫使乙肝病毒攻击所致的各项血清学指标阳转率明显降低,肝脏病理性损伤明显减轻.结论:乙肝DNA疫苗pVAX-PS免疫树(鼠句)后诱发明显的体液免疫应答,并对乙肝病毒感染提供有效的保护作用.     

结核杆菌保护性抗原-遍在蛋白质系统的建立

目的：将结核杆菌4种保护性抗原基因与小鼠遍在蛋白质（泛素）基因融合，建立抗原－遍在蛋白质系统。方法：通过RT－PCR技术从小鼠睾丸组织中克隆遍在蛋白质cDNA，同时培养结核杆菌并从基因组中克隆出4种保护性抗原编码区，然后通过柔性接头将遍在蛋白质与4种抗原的基因分别融合在一起，并插入到pVAX质粒中。结果：扩增出来的4种抗原基因大小分别为0.3,0.7,1.0,1.65kb，遍在蛋白质PCR产物约为0.2kb，均与GenBank中登录的相符；pVAX重组质粒酶切结果显示融合基因正确地插入到pVAX载体中，全自动测序显示抗原基因和遍在蛋白质基因均为所需基因，柔性接头序列也完全正确。结论：成功地构建了中国株结核杆菌的4种保护性抗原基因－遍在蛋白质融合系统，为结核病的防治打下了基础。