全基因组与外显子组测序的应用评估

随着新一代测序技术的不断成熟完善,人类基因组和外显子组测序得到了迅猛发展。测序技术的高通量性致使测序价格越来越低廉,使全基因组和外显子组测序真正用于临床诊断成为现实。作为医学预测和个体化医疗的重要工具之一,全基因组和外显子组测序应用范围广泛,该文针对其在遗传性疾病基因变异中的诊断进行讨论,同时为临床医生如何申请测序,测序报告解释,以及如何与患者沟通检测结果提供了新视角。     

AIS患者静脉溶栓过程中的血栓弹力图与凝血试验的比较

目的观察急性缺血性脑梗死(AIS)患者瑞通立静脉溶栓过程中血栓弹力图(TEG)和凝血指标的变化。方法选取2013年10月至2015年8月在聊城市第三人民医院住院的AIS患者43例,从发病到溶栓治疗时间在4.5 h内,并在溶栓前及溶栓后0.5、1、2、4 h,采集其静脉血进行凝血和TEG分析。结果在瑞通立静脉溶栓过程中,TEG测定参数的凝血因子激活时间(R)、血块形成速率参数(K)、弹力图最大切角(α-Angle)、弹力图最大振幅(MA)和凝血指标均发生变化。溶栓后0.5 h活化部分凝血活酶时间(APTT)与溶栓前比较,差异有统计学意义(P0.01),凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、D-二聚体(D-D)、纤维蛋白(原)降解产物(FDP)溶栓后2 h均达最高。溶栓后0.5 h R较溶栓前增高,溶栓后1 h达高值;K在溶栓后0.5 h达高值;α-Angle和MA在溶栓后0.5 h达低值;R、K溶栓后1 h与溶栓前比较,差异有统计学意义(P0.01);α-Angle和MA溶栓后0.5 h分别与溶栓前比较,差异均有统计学意义(P0.01)。结论在瑞通立静脉溶栓过程中TEG动态检测是判断凝血状态的有用工具。     

抗线粒体抗体在原发性胆汁性肝硬化筛查中的应用

目的探讨临床医生对抗线粒体抗体(AMA)检测的应用情况。方法回顾性分析上海长征医院2011年1月至2015年8月259例AMA阳性患者信息,并在临床医生提出AMA检测要求组与未提出检测要求组之间进行比较。结果 259例AMA阳性患者中,临床医生提出AMA检测要求的181例(占70%),没有提出AMA检测要求的78例(占30%);确诊为原发性胆汁性肝硬化(PBC)的204例(占80%),未确诊PBC的55例(占20%)。临床医生提出AMA检测要求组感染科和消化科送检比例和PBC确诊比例均显著高于未提出AMA检测要求组(P0.01)。在临床医生提出AMA检测要求组中,送检例数由多到少的科室依次为消化科、感染科、肝移植科、风湿免疫科和其他科室;而在临床医生未提出AMA检测要求组中,送检例数由多到少的科室依次为风湿免疫科、肾内科、神经内科、感染科、消化科和其他科室。在临床医生提出AMA检测要求组中,未确诊PBC 18例,未确诊原因包括已诊断为乙型肝炎肝硬化7例,患者不同意肝活检6例,患者失联5例。在临床医生未提出AMA检测要求组中,未确诊PBC 37例,未确诊原因包括实验诊断科未告知临床医生AMA阳性16例,患者不同意肝活检12例,患者失联6例,实验诊断科告知临床医生但后者未安排患者做进一步检查3例。结论消化科和感染科的临床医生对PBC的认识较为深入,较少出现忽视AMA检测的情况;但风湿免疫科、肾内科和神经内科的临床医生对PBC常常忽视AMA的检测,而这些科室AMA阳性并不罕见。     

胃癌患者血清外泌体中DANCR表达及其临床意义

目的检测胃癌患者血清外泌体(exosome)中抗分化非编码RNA(DANCR)的表达水平并分析其临床应用价值。方法采用实时荧光定量RT-PCR检测胃癌细胞培养上清和胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平,分析其与临床病理资料的相关性,绘制ROC曲线评价其诊断效能。结果 DANCR在人胃癌细胞系HGC-27中表达水平(4.43±0.37)明显高于胃黏膜上皮细胞(1.01±0.01),差异有统计学意义(P0.05)。HGC-27细胞培养上清exosome中DANCR表达水平(3.06±0.14)明显高于GES-1细胞(1.01±0.20),差异有统计学意义(P0.05)。DANCR在胃癌患者血清exosome中的平均含量[5.060(1.380,22.785)]较胃良性疾病患者[0.535(0.340,1.380)]和体检健康者[1.200(0.605,1.655)]明显升高(Z分别为-3.409,-4.229,P均0.01),且与肿瘤大小、TNM分期以及淋巴结转移相关。胃良性疾病患者与体检健康者相比,血清exosome中DANCR含量差异无统计学意义(Z=-1.308,P0.05)。胃癌患者血清exosome中DANCR的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.777,95%可信区间(CI)为0.678~0.876,cut-off值2.50,敏感性为68.6%,特异性为84.4%。结论胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平升高,有望成为胃癌诊断的新指标。     

肾病综合征患儿肾活检组织miRNA检测及意义

目的分析肾病综合征患儿肾活检组织miRNA的表达水平,并探讨其作为区分肾病病理亚型潜在标志物的可能性。方法收集肾病综合征患儿肾组织活检标本41例,包括系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)22例、微小病变(MCD)8例和毛细血管内增生性肾小球肾炎(ECPGN)11例,以8例无肾功能不全的成人肾组织为对照组。RT-q PCR检测各组肾组织中miR-191、miR-151-3p、miR-150、miR-19b和miR-30a-5p的表达水平,并分析其与肾功能相关临床指标的相关性。结果与正常肾组织相比,肾病综合征患儿肾组织中miR-191明显上调(P0.01),miR-151-3p明显下调(P0.01)。此外,MCD组miR-150表达水平明显低于对照组、Ms PGN组和ECPGN组(P均0.05)。miRNA在肾组织中的表达与临床血清学指标Ig G、TP和Cr均呈正相关,与TC呈负相关(P均0.05)。结论 miRNA在肾病综合征患儿肾组织中的表达与病理分型有关,miR-150具有潜在区分肾病患儿MCD型与其他亚型的鉴别诊断价值。     

通过参加美国病理学家学会能力验证活动提高实验室寄生虫检验水平

目的通过参加美国病理学家学会(College of American Pathologists,CAP)能力验证(proficiency testing,PT)活动,评价临床实验室寄生虫检验水平并改进检验质量。方法将CAP寄生虫PT标本按常规标本分析,在10个工作日内通过互联网向CAP报送结果,根据回报结果分析临床实验室寄生虫检验水平。结果 2011至2015年75份PT标本中5份鉴定错误,错误率为6.3%;15份因未能获得80%一致的结果,CAP未给予评价结果。结论临床实验室寄生虫检验水平有待提高。     

DHAOx方案治疗难治性或复发性非霍奇金淋巴瘤的临床观察

目的:观察DHAOx方案治疗难治性或复发性非霍奇金淋巴瘤的临床疗效及毒副反应。方法:21例患者接受DHAOx方案(奥沙利铂(L-OHP)130mg.m-2静脉滴入3h,d1;阿糖胞苷(Ara-C)2g.m-2静脉滴入,d2,每12h1次;地塞米松(DXM)20～40mg.d-1静脉滴入,d1～4;21～28d为1个周期)治疗。2周期后评价疗效和毒副反应。结果:完全缓解4例(19.0%),部分缓解8例(38.1%),疾病稳定6例(28.6%),疾病进展3例(14.3%),总有效率为57.1%。主要毒副反应为:Ⅲ～Ⅳ级中性粒细胞下降占33.3%(7/21);Ⅲ～Ⅳ级血小板下降占14.3%(3/21);Ⅰ～Ⅱ级腹泻33.3%(7/21),Ⅲ～Ⅳ级腹泻4.8%(1/21);Ⅰ～Ⅱ度外周神经毒性占81.0%(17/21),无Ⅲ～Ⅳ级外周神经毒性发生;Ⅰ～Ⅱ级恶心、呕吐38.1%(8/21),无Ⅲ～Ⅳ级恶心、呕吐反应;Ⅰ～Ⅱ级肝功能损害19.0%(4/21),无肾功能损害及Ⅲ～Ⅳ级肝功能损害。结论:DHAOx方案治疗难治性或复发性非霍奇金淋巴瘤有效性较高,毒副反应可耐受。     

一氧化氮和血管紧张素Ⅱ在糖尿病大鼠早期肾脏高功能状态中的作用

目的 探讨一氧化氮（NO）和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）在早期糖尿病大鼠肾小球高滤过状态中的作用。方法 利用链脲佐菌素诱导大鼠实验性糖尿病模型，将大鼠分为正常对照组、未治疗组、卡托普利组及左旋硝基精氨酸甲基酯（L－NAME）组，观察4周后糖尿病大鼠肾脏血流动力学和血浆、肾组织匀浆中NO、AngⅡ浓度的改变。结果 糖尿病未治疗较正常对照组的肾重／体重、24h尿蛋白、内生肌酐清除率、肾小球滤过率、肾血浆流量、血清及肾组织匀浆中NO3^-和AngⅡ活性显著升高（P＜0．05或P＜0．01）。卡托普利组，除血浆及肾组织匀浆中NO3^-未检测外，上述各项水平均有不同程度下降(P＜0．05或P＜0．01）。L－NAME组，除血浆及肾组织匀浆中AngⅡ未检测及24h尿蛋白无明显下降外，余项均有显著下降（P＜0．05或P＜0．01）。结论 糖尿病早期血浆NO、AngⅡ升高可造成肾小球高功能状态，用卡托普利及L－NAME可减轻糖尿病早期肾脏的高功能状态，延缓糖尿病肾病的发生与发展。     

韦氏环非霍奇金淋巴瘤化疗后序贯放射治疗的回顾性临床研究

目的 分析韦氏环非霍奇金淋巴瘤经4～6个周期化疗序贯放疗治疗的临床疗效及其预后影响因素.方法 对2006年11月至2012年11月贵阳医学院附属贵州省肿瘤医院收治的43例经病理证实的初治韦氏环非霍奇金淋巴瘤病例,完成4～6个周期化疗序贯放射治疗.按世界卫生组织（WHO）的疗效评价标准评价疗效,采用SPSS13.0统计学软件包的Kaplan-Meier方法计算生存率.结果 全组共43例患者在完成4～6个周期化疗后总有效率为60.5％,其中完全缓解为25.6％（11例）,部分缓解15例（34.9％）.单因素分析表明,影响韦氏环非霍奇金淋巴瘤的预后因素主要为放疗时间有无延长和国际预后指数（IPI）评分.结论 4～6个周期化疗序贯放射治疗对韦氏环非霍奇金淋巴瘤总生存率较现有文献报道有明显提高,尤其对Ⅰ～Ⅱ期患者可能存在更大的受益.     

基于生熟异用的何首乌及其制剂相关肝损伤不良反应报告分析

摘 要 目的：分析对比生、制何首乌及其制剂相关药物性肝损伤（DILI）病例报告的临床特征及用药特点。方法：基于2012～2016年中草药肝损伤病例数据库收集的疑似DILI病例报告，经过临床医生再评价排除非DILI的病例报告，参考《中草药相关肝损伤临床诊疗指南》及《中药药源性肝损伤临床评价技术指导原则》中的整合证据链法进行因果关系评价进而筛查出生、制何首乌及其制剂相关DILI病例报告，并对其进行回顾性研究。结果：共筛选出何首乌及其制剂相关DILI的病例报告258例，经再评价排除111例，筛查到单用生何首乌及其制剂相关DILI 37例（生何首乌组）及单用制何首乌及其制剂相关DILI 96例（制何首乌组）。研究发现两组间性别、年龄的构成总体差异无统计学意义，但体现出何首乌生熟异用相关的疾病人群特点，可能存在病证和免疫状态相关的易感因素。两组的用药剂量及时间分布均较广，其中10例(63%)使用单味中药饮片是在临床规定剂量范围内出现肝损伤，可能与特异质型肝损伤有关。与生何首乌组相比，制何首乌组服药至发生DILI的时间相对较长，严重药品不良反应报告的构成比较低，提示炮制可降低其肝损伤风险。结论：生、制何首乌及其制剂均可导致DILI。本文首次基于临床不良反应报告验证了何首乌炮制后可降低肝损伤风险。建议临床应用何首乌及其制剂须注意生熟异用，并加强炮制质量标准研究。