浙江省柯萨奇病毒A16 VP1基因特征分析及B细胞抗原表位预测

目的了解浙江省柯萨奇病毒A16(CA16)VP1基因特征及其变迁规律并预测VP1蛋白上B细胞抗原表位。方法在Gen Bank检索并下载35个浙江省CA16流行株及69个已知基因型CA16参考株的VP1基因序列,使用MEGA 6.0软件进行比对分析和构建种系进化树,确定浙江省CA16流行株的基因型,并分析VP1核苷酸和氨基酸同源性及氨基酸变异;运用DNA Star中的Protean模块预测VP1上可能的线性B淋巴细胞抗原表位。结果浙江省CA16病毒基因型为B1基因型(34株)和A基因型(1株)。B1型中以B1b亚型(24株)占绝对优势,其次为B1a亚型(10株)。浙江省CA16流行株VP1核苷酸和氨基酸同源性分别为75.5%~100%和89.5%~100%;VP1区氨基酸序列高度保守,但也存在部分变异。VP1中可能的B细胞抗原表位(氨基酸肽段)有13个,分别为10-20、30-38、57-62、73-79、98-106、118-123、159-168、173-177、184-189、240-246、265-273、274-284和289-295。结论浙江省CA16流行株存在A、B1 2个基因型,B1b和B1a为主要基因型,其VP1区氨基酸变异程度较低,VP1中13个预测的B细胞抗原表位可为CA16疫苗的研制提供科学依据。     

Xpert MTB/RIF和T-SPOT.TB对涂阴肺结核诊断价值的评估

目的评估并比较Xpert MTB/RIF和T-SPOT.TB对涂阴肺结核的诊断价值。方法收集2014年12月至2015年12月天津市海河医院门诊和住院的呼吸疾病患者208例,分为结核组125例和对照组83例,同时对其痰液样本行涂片镜检、液体快速培养和Xpert MTB/RIF检测,对其血液样本行T-SPOT.TB试验。结果 Xpert MTB/RIF诊断涂阴肺结核的敏感性、特异性、ROC曲线下面积(AUC)及优势比(odds ratio,OR)分别为56.5%(95%CI:45.8%~66.8%)、98.8%(95%CI:93.5%~100.0%)、0.777(95%CI:0.708~0.836)及106.60(χ~2=62.87,P0.01);T-SPOT.TB诊断涂阴肺结核的敏感性、特异性、AUC及OR值分别为83.7%(95%CI:74.5%~90.5%)、62.7%(95%CI:51.3%~73.0%)、0.732(95%CI:0.660~0.796)及8.61(χ~2=39.44,P0.01);两者敏感性(χ~2=18.58)和特异性(χ~2=28.03)的差异有统计学意义(P0.05),AUC的差异无统计学意义(Z=1.235,P0.05);Xpert MTB/RIF阴性的涂阴肺结核患者T-SPOT.TB阳性率为70.0%。结论 Xpert MTB/RIF和T-SPOT.TB均有助于早期、快速、准确地辅助诊断肺结核,T-SPOT.TB可以作为Xpert MTB/RIF的后续试验辅助诊断Xpert MTB/RIF阴性的涂阴肺结核。     

前胡香豆素类提取物的UPLC/Q-TOF-MS分析及其初步药效学研究

目的建立UPLC/Q-TOF-MS法分析前胡香豆素类提取物的化学成分,并对其初步药效学进行研究。方法采用Acquity UPLC BEH C_(18)色谱柱;以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱;检测波长321 nm;采用电喷雾正离子化模式(ESI~+),扫描范围m/z 100~1 000;利用链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病大鼠模型,对前胡香豆素类提取物的调脂降糖作用进行初步药效学研究。结果前胡香豆素类提取物中的qianhucoumarinD(1)、peucedanocoumarinⅡ(2)、白花前胡甲素(3)、peucedanocoumarin I(4)、白花前胡乙素(5)、praeuptorin E(6)得到良好的分离与鉴定。初步药效学实验结果表明,前胡香豆素类提取物能显著降低2型糖尿病大鼠空腹血糖、胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白及肝脏指数(P0.05),升高高密度脂蛋白(P0.05),提示前胡香豆素类提取物能改善2型糖尿病大鼠糖与脂质代谢,发挥治疗2型糖尿病的作用。结论建立了前胡香豆素类的UPLC/Q-TOF-MS的分离鉴定方法;初步药效学研究表明前胡香豆素类提取物具有显著的调脂及降糖作用。     

3种清热解毒类中药注射剂治疗小儿手足口病的Meta分析

摘 要 目的：评价清热解毒类中药注射剂在手足口病治疗中的临床应用的疗效和安全性。 方法: 计算机检索 PubMed、Cochrane Library、CNKI,VIP和WanFang Data数据库,搜集清热解毒类中药注射剂治疗小儿手足口病的随机对照试验（RCTs）,检索时限均为建库至2019年3月,由两名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。 结果: 共纳入11个RCTs,共 2 071例患儿。Meta分析结果显示,与西药常规疗法组比较,中药注射剂组治疗小儿手足口病可提高总有效率 [OR=2.88,95%CI（1.62,5.10）,P=0.000 3]、缩短退热起效时间 [MD=-8.10,95%CI（-11.77,-4.42）,P＜0.000 1]、缩短体温恢复正常时间 [MD=-16.63,95%CI（-22.68,-10.59）,P＜0.000 01]、缩短手足皮疹消退时间 [MD=-29.57,95%CI（-47.18,-11.95）,P=0.001];在不良反应发生率、重症转化率上,两组的差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论: 清热解毒类中药注射剂治疗小儿手足口病具有一定的优势,可在临床推广使用。但现有高质量文献不多,因此本研究最终纳入文献数量较少,未能对3种中药注射剂之间的疗效和安全性进行比较,需要更多设计严谨的高质量、多中心的随机双盲临床研究进一步验证。     

星点设计-效应面法优化姜黄素牛血清白蛋白纳米粒的制备工艺

摘 要 目的：星点设计 效应面法优化姜黄素牛血清白蛋白纳米粒(CUR BSA NPs)的制备工艺,考察其外观粒径分布及体外释放特性。 方法: 以牛血清白蛋白为载体材料,姜黄素作为模型药物,采用去溶剂法制备CUR BSA NPs,通过星点设计 效应面法优化其制备工艺,并对CUR BSA NPs的外观形态、粒径分布、包封率、载药量及体外释放进行研究。 结果: CUR BSA NPs制备的最佳工艺条件为牛血清白蛋白浓度10 mg·ml-1,乙醇体积7.79 ml,搅拌速度915 r·min-1。根据优化处方工艺制备的CUR BSA NPs外观呈圆形或类圆形,平均粒径（203.93±83.10） nm,Zeta电位-40～-50 mV;包封率为86.53%,载药量为3.89%。 结论: 最优工艺条件下制备的CUR BSA NPs包封率和载药量高,粒径分布较为均匀,体外释放试验表明与姜黄素原料药相比制备的CUR BSA NPs有良好的缓释特性。     

水解酪蛋白肽粉抗肾性高血压大鼠心肌重构作用研究

摘 要 目的：考察酪蛋白肽粉对肾性高血压大鼠收缩压及心肌重构的作用并探讨其机制。方法: 将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组（依那普利,1 mg·kg-1）,水解酪蛋白肽粉低（12.5 mg·kg-1）、中（25 mg·kg-1）、高（50 mg·kg-1）剂量组,每组10只。用双肾双夹法建立肾性高血压大鼠模型,连续给药4周后,测定大鼠收缩压、心脏结构;Masson染色后观察心脏胶原含量;测定心脏组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的含量变化,肥大基因β肌球蛋白重链（β-MHC）、纤维连接蛋白（FN）mRNA表达及还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶（NADPH）亚型NOX 2、NOX 4 mRNA表达。 结果: 酪蛋白肽粉中、高剂量组与模型组相比能降低肾性高血压大鼠收缩压,改善心肌重构,减轻心肌肥厚和心肌纤维化,降低β-MHC、FN、NOX 2、NOX 4 mRNA的表达,增加SOD活性,降低MDA含量（P＜0.05）。结论: 酪蛋白肽粉对肾性高血压大鼠具有积极的心肌保护作用,这可能与降低β-MHC、FN、NOX 2、NOX 4 mRNA的表达,减轻氧化应激有关。     

丹参提取物改善大鼠重症急性胰腺炎肺损伤模型的ROS-NLRP3炎症小体信号通路机制

摘 要 目的：探讨活性氧簇（ROS） 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体信号通路在丹参提取物改善急性胰腺炎肺损伤大鼠的作用机制。 方法: 60只SD大鼠随机分组5组：假手术组、模型组、丹参提取物（1.5 g·kg-1）组、ROS抑制剂组[N 乙酰 L 半胱氨酸（NAC）,20 mg·kg-1]、丹参提取物+NAC组（1.5 g·kg-1＋20 mg·kg-1）,每组12只。以逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠（1 ml·kg-1）法建立急性胰腺炎肺损伤大鼠模型,各组灌胃给药,模型组和假手术组给予等量生理盐水,qd,持续5 d。处死大鼠,测量腹水量、右肺干质量、右肺湿质量,计算湿质量/干质量（W/D）比值,采用苏木精 伊红（HE）染色法对大鼠肺组织病理症状进行Holfbauer评分,以全自动血气分析检测仪检测动脉血中氧分压（PaO2）、二氧化碳分压（PaCO2）、氧合指数（OI）,用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清肿瘤坏死因子 α（TNF α）、白介素 6（IL 6）水平,ROS检测试剂盒检测肺组织中ROS水平,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶 1（caspase 1）、凋亡相关的斑点样蛋白（ASC）表达。 结果: 与假手术组比较,模型组大鼠腹水量、W/D比值、Holfbauer评分、PaCO2、TNF α、IL 6、ROS水平、NLRP3、caspase 1、ASC蛋白表达显著升高（P＜0.05）,PaO2、OI显著降低（P＜0.05）;与模型组比较,各药物处理组大鼠腹水量、W/D、Holfbauer评分、PaCO2、TNF α、IL 6、ROS水平、NLRP3、caspase 1、ASC蛋白表达显著降低（P＜0.05）,PaO2、OI显著升高（P＜0.05）;与丹参提取物组及NAC组分别比较,丹参提取物+NAC组大鼠腹水量、W/D、Holfbauer评分、PaCO2、TNF α、IL 6、ROS水平、NLRP3、caspase 1、ASC蛋白表达均显著降低（P＜0.05）,PaO2、OI显著升高（P＜0.05）。结论: 丹参提取物可以保护急性胰腺炎肺损伤大鼠的肺组织,可能通过下调ROS-NLRP3炎症小体信号实现。     

土家药大泽兰化学成分的分离鉴定

摘 要 目的：研究土家药大泽兰所含的化学成分。 方法: 采用多种柱色谱方法对大泽兰乙醇提取物的化学成分进行分离,并通过波谱分析和文献对比进行结构鉴定。 结果: 分离得到7个化合物,分别鉴定为蒲公英甾醇乙酸酯(1)、豆甾醇(2)、9 angeloyloxythymol(3)、9 acetoxythymol 3 O tiglate(4)、邻羟基苯丙酸(5)、7 hydroxy 4 methyl isochroman 1 one (6)、香豆素(7)。 结论: 化合物5~7为首次从泽兰属植物中分离得到,化合物1~7均为首次从该植物中分离得到。     

大黄素对胃癌细胞增殖、凋亡及ERK1/2-PKM2/P53通路的影响

摘 要 目的：探讨大黄素对胃癌细胞增殖、凋亡及ERK1/2-PKM2/P53通路的影响。 方法: 实验分为MGC803胃癌细胞组、氟尿嘧啶组、大黄素低剂量组、大黄素高剂量组,测定并比较各组细胞癌细胞活力、癌细胞单克隆形成数目、癌细胞凋亡率、穿膜孔数、以及MGC803胃癌细胞ERK1/2、PKM2、P53mRNA、蛋白水平。 结果: 与MGC803细胞组比较,氟尿嘧啶组、大黄素低、高剂量组吸光度（A）值、存活率水平、克隆形成数目、穿膜数、p ERK1/2、p PKM2 mRNA及蛋白表达水平降低,凋亡率、P53 mRNA及蛋白表达水平升高（P<0.05）。与氟尿嘧啶组比较,大黄素低剂量组A值、存活率水平、克隆形成数目、穿膜数、p ERK1/2、p PKM2 mRNA、蛋白升高,凋亡率、P53 mRNA、蛋白表达水平降低（P<0.05）。与大黄素低剂量组比较,大黄素高剂量组A值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、P ERK1/2及P PKM2 mRNA及蛋白表达水平明显降低,凋亡率、P53 mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。 结论: 大黄素可能通过抑制ERK1/2-PKM2通路诱导P53高表达从而抑制胃癌细胞的增殖及迁徙,促进胃癌细胞的凋亡。     

广地龙药材、汤剂及配方颗粒的元素分析

摘 要 目的：分析广地龙药材、汤剂及配方颗粒中多种重金属及有害元素,比较三者元素差异。方法: 通过电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS）对广地龙样品中的铬、铜、砷、镉、锡、锑、钡、汞、铅、铋等10种元素进行检测。结果: 大部分广地龙样品的重金属和有害元素,如As、Cd等含量较高,药材样品中8批As含量高于2 mg·kg-1,10批Cd含量高于0.3 mg·kg-1,配方颗粒样品则分别为10批和2批。 结论: 广地龙药材的元素含量直接反映在汤剂及配方颗粒中,应从药材来源保证临床使用安全性,提高现有广地龙药材质量标准,建立配方颗粒质量标准。