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目的:观察感染Ad-IκBaM对NF-κB激活的抑制及对亚砷酸诱导肝癌细胞凋亡的增强效应,探讨亚砷酸对肝癌细胞的治疗作用.方法:选择人肝癌细胞系BEL-7402和SMMC-7721,以不同浓度亚砷酸处理.制备重组腺病毒Ad-IκBaM,用来转染经和未经亚砷酸处理的肝癌细胞.MTT和TUNEL方法观察各组细胞生长及凋亡情况;应用EMSA及Westernblot研究肝癌细胞核内NF-κB的激活情况和感染Ad-IκBaM对NF-κB激活的抑制效果.结果:MTT结果表明各浓度亚砷酸对肝癌细胞的作用较正常肝细胞显著(P<0.01);Westernblot和EMSA结果提示亚砷酸可明显抑制肝癌细胞生长,使细胞内NF-κB系统活化;感染重组腺病毒Ad-IκBaM的肝癌细胞后,亚砷酸引起的NF-κB的激活受到明显抑制.亚砷酸联合Ad-IκBaM或Ad-IκBa作用于肝癌细胞SMMC-7721的凋亡指数分别为66.47%和36.67%;亚砷酸联合Ad-IκBaM或Ad-IκBa作用于肝癌细胞Bel-7402的凋亡指数分别为74.5%和32.37%.结论:亚砷酸对肝癌细胞有明显的杀灭作用,同时激活了肝癌细胞内的NF-κB;应用重组腺病毒Ad-IκBaM可以有效抑制NF-κB的激活,并可明显增强亚砷酸对肝癌细胞的作用. 相似文献
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目的:研究重组腺病毒Ad-IκBαM对5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导胃癌细胞凋亡的作用情况,进而研究胃癌细胞抵抗5-FU的机制.方法:培养胃癌SGC-7901细胞,感染重组腺病毒Ad-IκBαM的细胞为实验组,感染Ad- IκBα及非感染的空白对照为对照组,以5 mg/L 5-FU加入上述各组细胞,采用EMSA法检测5-FU处理后各组细胞内NF-κB激活情况:应用MTT和TUNEL法分别检测5-FU对各组细胞诱导凋亡的情况.结果:5-FU作用于胃癌细胞可使细胞内NF-κB激活,感染Ad-IκBαM使NF-κB活性受到明显抑制.MTT法证明,5-FU作用后,感染Ad-IκBαM细胞的凋亡(56.36%±0.60%)较感染Ad-IκBα组(47.50%±1.42%)及未感染组(42.95%±1.27%)明显,各组间比较有统计学差异(P≤0.001);TUNEL法结果与MTT相符,感染Ad-IκBαM组的凋亡率为29.7%±2.5%,明显高于感染Ad-IκBα组(20.0%±2.6%)及未感染组(12.3%±1.1%)(P<0.01).可见,感染Ad- IκBαM可明显提高5-FU诱导的细胞凋亡.结论:感染Ad-IκBαM可通过抑制胃癌细胞NF-κB的活性增强5-FU的诱导凋亡作用. 相似文献
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目的:探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)粉针剂联合重组腺病毒介导的IκBαM抑制肝癌细胞增殖及对大鼠肝癌的治疗效果.方法:MTT法检测不同浓度As2O3联合Ad-IκBαM对肝癌细胞增殖的抑制作用.探讨体内As2O3联合Ad-IκBαM对二乙基亚硝胺诱发的大鼠肝癌的抑制作用,并应用TUNEL法检测各处理组肝癌的凋亡指数.结果:As2O3处理肝癌细胞SMMC-7721的细胞毒作用存在剂量依赖性以及时间依赖性,16 mol/L的As2O3抑制率最高,48、72、96 h分别为17.7%±5.3%、40.7%±2.5%、62.8%±5.4%.16 mol/L As2O3联合转染Ad-IκBαM处理组在72 h和96 h,对肝癌细胞抑制率分别为68.3%±2.1%和81.9%±3.0%,显著高于16μmol/L As2O3联合Ad-I B组(P值分别为0.004).二乙基亚硝胺于第16周诱发大鼠肝癌,成瘤率约达80%.各处理组成瘤大鼠(包括无菌生理盐水组、As2O3组、As2O3+Ad-I B组以及As2O3+Ad-IκBαM组)的生存期无明显差别.As2O3联合Ad-IκBαM处理组肝癌的凋亡率较其他处理组均显著增高.结论:腺病毒介导的IκBαM与As2O3具有协同作用,转染Ad-IκBαM可以明显增强As2O3的抑制肝癌细胞增殖作用以及体内抑瘤作用. 相似文献