慢病毒介导的外源基因体外投递系统的建立

目的针对不同哺乳类细胞建立相应的慢病毒体外感染体系，以建立慢病毒介导的外源基因体外投递系统。方法按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒（携带EGFP基因）包装（脂质体介导的瞬时转染）、超速离心浓缩和保存等，随后用病毒上清或浓缩后的病毒感染293FT细胞，24—48h后荧光显微镜下观察是否见绿色荧光以证实慢病毒是否成功生产；将携带EGFP基因的病毒上清或浓缩后的病毒分别加入内含293FF细胞、小鼠ES细胞、小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）或小鼠睾丸生殖细胞的培养板孔内，感染6—12h后，用相应培养基替换感染液，数天后荧光显微镜下观察是否见绿色荧光以证实慢病毒是否成功感染不同哺乳类细胞。结果按标准程序生产的携带EGFP基因慢病毒（病毒上清或浓缩后的病毒）成功高效率感染293FF细胞、MEFs或小鼠睾丸生殖细胞；用浓缩后的病毒（携带EGFP基因）感染小鼠ES细胞，亦可获得EGFP阳性的ES细胞克隆。结论熟练掌握了慢病毒包装、浓缩及鉴定等技术，同时针对不同哺乳类细胞建立了相应的慢病毒介导的外源基因体外传递系统，这些为相关后续研究打下了良好的基础。     

患者知情同意权代为行使的案例分析及启示

以医疗典型纠纷案例为例,通过厘清相关法律对患者知情同意权行使及代为行使的相关规定,探讨知情同意权代为行使行为的界定。启示如下:知情同意权代为行使应设前置条件进行限制和约束;代为行使主体包括近亲属或关系人、委托代理人;患者本人意见具有首要优先性,委托代理人意见应优先于近亲属意见。     

针刀干预对膝骨关节炎兔关节腔内压和滑膜血管增生的影响

目的：探讨针刀对于膝骨关节炎(KOA)兔关节腔内压和滑膜血管增生的作用。方法：新西兰雄兔随机分为正常组、模型组、针刀组和电针组,各7只。左后肢膝关节制动6周制备退行性膝骨关节炎模型。正常组、模型组不予干预,针刀组、电针组各干预3周。测量兔关节腔内压,用HE染色法观察兔滑膜形态学,并用Western Blot技术观测兔滑膜中HIF-1α、VEGF蛋白含量。结果：与正常组相比,模型组关节腔内压显著升高（P<0.01）,滑膜HE染色出现血管增生改变,滑膜HIF-1α、VEGF蛋白含量显著升高（P<0.01）;干预结果表明,与模型组相比,针刀组、电针组关节腔内压显著降低（P<0.01）,滑膜HE染色血管增生减轻,滑膜HIF-1α、VEGF蛋白含量显著降低（P<0.01或P<0.05）;与电针组相比,针刀组关节腔内压显著降低（P<0.01）,滑膜HE染色血管增生减少明显,滑膜VEGF蛋白含量明显降低（P<0.05）,HIF-1α蛋白含量有下降趋势,无统计学差异（P>0.05）。结论：针刀通过降低关节腔内压,进而减少滑膜血管增生,发挥对KOA治疗作用。     

针灸调控HPA轴治疗中风后抑郁的选穴思路探讨

脑卒中作为一种应激反应会使下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴异常兴奋从而导致皮质醇(Cort)含量异常升高,高Cort会加速负反馈调节中枢海马的凋亡诱发中风后抑郁(PSD)。近年来,许多学者已经进行了针灸调控HPA轴治疗PSD作用机制方面的研究,而鲜有人探讨其选穴的理论依据。既往常采取心脑同调治疗PSD,故本文以“心脑共主神明”为理论基础,探讨针灸调控HPA轴治疗PSD的理论基础及选穴依据。     

2014—2019年海口市四区新生儿出生缺陷监测结果分析

目的 分析海口市新生儿出生缺陷发生情况,为提出针对性的防制建议提供科学依据。方法 采用描述流行病学分析方法分析海南省妇女儿童医学中心收集的2014—2019年海口市4个区所有二级以上具临床诊断能力医疗机构报备的新生儿出生缺陷监测资料。结果 2014—2019年海口市4区新生儿出生总数为188 186名,2014年25 587名,2015为28 145名,2016年为29 206名,2017年为32 428名,2018年为34 554名,2019年为38 266名,新生儿出生人数逐年上升。生儿缺陷共1 985例,年均出生缺陷发生率为10.55‰。2014—2019分别为11.73‰、11.19‰、10.51‰、10.64‰、10.59‰、9.20‰,整体呈下降趋势。城市新生儿缺陷发生率（11.39‰）高于乡镇（9.61‰）,男婴（13.22‰）高于女婴（10.38‰）,差异均有统计学意义（均 P<0.01）,产妇年龄不同所分娩新生儿出生缺陷发生率差异有统计学意义（P<0.01）。主要出生缺陷类别前10位病种分别为先天性心脏病、唇裂或腭裂、多指（趾）或并指（趾）、外耳道畸形、马蹄内翻足、先天性脑积水、唐氏综合症、小耳（不包括无耳）、肢体短缩、直肠肛门闭锁或狭窄,占全部出生缺陷的83.13%。结论 海口市近来年出生缺陷发生率呈下降趋势,但发生率仍较高,应从积极治理环境、加强健康教育、加强病因研究、提升医疗机构诊断水平及护理服务质量等方面降低海口市新生儿出生缺陷发生率。     

131I相关唾液腺炎的炎症分级及内镜治疗

目的 结合唾液腺造影及内镜表现对¹³¹I相关唾液腺炎进行炎症分级,评估分析内镜治疗的疗效。 方法 收集2012年11月至2018年10月间在北京大学口腔医院进行唾液腺内镜检查与治疗的¹³¹I相关唾液腺炎患者的临床及影像学资料,分析唾液腺造影与内镜表现的特点并进行炎症分级。根据病变程度,采取内镜下生理盐水与地塞米松混合液灌洗、机械扩张等治疗,术后进行随访。 结果 42例¹³¹I相关唾液腺炎患者中,男性5例、女性37例,男女比例为1 ∶7.4,症状为唾液腺区反复肿胀、疼痛或口干等。腮腺造影主要表现为一处或多处导管狭窄,部分病例分支导管未显影。唾液腺内镜主要表现为导管不同程度狭窄,可见分支导管闭锁。根据腮腺造影及内镜所见分为3级:(1)轻度炎症:主导管存在狭窄和扩张,但0.9 mm内镜可通过;(2)中度炎症:主导管存在一处重度狭窄,内镜不能直接通过;(3)重度炎症:主导管存在2处以上重度狭窄、弥漫性狭窄或导管闭锁。33例(65侧)¹³¹I相关唾液腺炎患者的腮腺同时接受唾液腺造影与内镜检查,其中轻度炎症8侧,中度炎症23侧,重度炎症34侧。内镜治疗后经3~72个月随访,效果评价为显效22侧,缓解22侧,无效19侧,失访2侧,总有效率为69.8%。 结论¹³¹I相关唾液腺炎的临床、腮腺造影以及唾液腺内镜表现具有明确的特点,据此我们提出¹³¹I相关唾液腺炎炎症严重程度的分级标准。唾液腺内镜技术可以明显缓解¹³¹I相关唾液腺炎患者的主观临床症状,对于早期病变效果更佳。     

miR-141-3p、PD-L1及巨噬细胞在子宫内膜异位症中的表达及相关性研究

目的 探讨miR-141-3p、PD-L1及M1、M2型巨噬细胞在子宫内膜异位症 （Endometriosis,EMs） 中的表达及其临床意义。方法 选取2021年10月-2022年7月,因EMs在石河子大学第一附属医院妇科行腹腔镜手术或开腹手术的患者30 例为EMs组,同期选取非EMs患者因子宫肌瘤行诊断性刮宫或子宫全切术的子宫内膜组织30例为对照组,术后病理证实均为增生期子宫内膜。通过qRT-PCR检测子宫内膜组织中miR-141-3p以及PD-L1的表达;通过免疫组化检测子宫内膜组织中 M1型巨噬细胞表面标志物CD86,M2型巨噬细胞表面标志物CD206的表达,并应用Image J软件对免疫组化结果进行平均光密度 （Average Optical Density,AOD） 的检测。通过 Person 或 Spearman 相关检验分析 miR-141-3p、PD-L1、CD86 及 CD206 之间相关性。结果 （1） miR-141-3p 在 EMs 组在位内膜、异位内膜中的表达低于对照组子宫内膜 （P=0.000 5; P＜0.000 1）,且在异位内膜中表达最低。（2）PD-L1在EMs组在位内膜、异位内膜中的表达高于对照组子宫内膜（P=0.013 7; P=0.000 3）,且在异位内膜中表达最高。（3）在EMs异位内膜中miR-141-3p与PD-L1的表达呈负相关（r =-0.648 9,P=0.000 1）。 （4） CD86在EMs组在位内膜、异位内膜中的表达低于对照组子宫内膜 （P=0.047 2;P=0.001 0）。（5） CD206在EMs组在位内膜、异位内膜中的表达高于对照组子宫内膜 （P=0.043 4;P＜0.000 1）,且在异位内膜中表达最高。（6） PD-L1与M1型巨噬细胞标志物 CD86 在 EMs 异位内膜中的表达呈负相关 （r =-0.440 8,P=0.014 8）。（7） PD-L1 与 M2 型巨噬细胞标志物 CD206在EMs异位内膜中的表达呈正相关 （r =0.598 1,P=0.000 5）。结论 EMs患者中miR-141-3p表达降低,PD-L1表达升高,巨噬细胞从M1型向M2型极化,且随病情进展而改变。     

鼻内镜下应用半导体激光治疗顽固性鼻出血

1998年 4月～ 2 0 0 1年 8月笔者于鼻内镜下应用半导体激光治疗顽固性鼻腔出血 52例 ,效果令人满意 ,报道如下。1　资料与方法1.1　一般资料52例病人中 ,男 3 4例 ,女 18例 ;平均年龄 45.3岁。出血部位位于克氏区 13例 ,吴氏静脉丛 12例 ,下鼻甲后端 7例 ,中鼻甲后蝶腭动脉区 6例 ,鼻咽顶 4例 ,嗅裂 5例 ,鼻中隔后端 5例。所有病例在治疗前均行前后鼻孔填塞术 ,15名病人根据出血部位的不同曾行筛前动脉结扎或颈外动脉结扎术 ,8名病人曾行鼻中隔黏膜下划痕术 ,虽经上述治疗但效果不佳。用本方法治疗前再次出血 ,出血量在 40 0ml以上。1.2　治…     

益气活血法治疗疣状胃炎48例

疣状胃炎亦称痘疮样胃炎 ,是一种特殊型胃炎 ,临床上可有胃痛、恶心、呕吐、黑粪、偶有贫血、低蛋白血症等。内镜下见胃体或胃窦都可出现多发的、伴或不伴中心洼陷或糜烂的小隆起 ,组织学表现为淋巴细胞性胃炎 ,病变可能在数月后消退或长期存在。此病病程长 ,迁延难愈 ,可合并出血、贫血、低蛋白血症等。目前此病的临床治疗只有对症治疗 ,改善症状尚可 ,对病变的消除效果不好。因此 ,笔者于近 2年采用益气活血法治疗疣状胃炎 48例 ,取得较好疗效 ,报道如下。1　临床资料本组病例均系我院门诊或住院患者 ,符合五版《内科学》诊断标准。共 48…     

南方菟丝子水溶性成分免疫活性的研究

近年来,随着免疫学研究工作的发展,已发现多种单味和复方中草药具有免疫抑制作用。如喜树碱、昆明山海棠、甘草、雷公藤、青蒿素等临床上单用或中西药合用治疗某些变态反应性疾病,取得较好的疗效,且无严重的毒副反应,引起人们的重视。因此发掘较理想的中草药免疫抑制剂,阐明其作用机理及合理应用,将成为中草药研究工作中的一个新领域。药理实验表明南方菟丝子具有一定的免疫活性及免疫调节作用。下面将实验结果报告如下。