茯神指纹图谱结合化学模式识别和多指标成分定量研究

目的 建立茯神HPLC指纹图谱及10个三萜类成分（16α-羟基松苓新酸、茯苓酸B、去氢土莫酸、茯苓酸A、多孔菌酸C、3-表去氢土莫酸、3-O-乙酰基-16α-羟基松苓新酸、去氢茯苓酸、松苓新酸、去氢齿孔酸）的含量测定方法。方法通过HPLC建立茯神指纹图谱,对37批茯神10个成分的含量进行测定。并结合相似度评价、聚类分析（clusteranalysis,CA）、主成分分析（principal component analysis,PCA）及正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA）对茯神质量进行综合评价。结果 37批茯神HPLC特征图谱共匹配10个共有峰成分,除S23、S37外,其余样品间相似度为0.791～1.000;CA将37批样品分为3类,PCA提取了2个主成分,OPLS-DA确定去氢茯苓酸、16α-羟基松苓新酸、多孔菌酸C、3-表去氢土莫酸4个质量差异标志物。结论 建立的指纹图谱及含量测定方法操作简便、专属性强、重复性好,可为茯神的质量控制提供参考。     

俯卧位下自制U形骨垫在经皮肾镜取石术中的应用

【目的】探讨俯卧位下自制U形骨垫在经皮肾镜取石术（PCNL）的临床应用价值。【方法】回顾性分析本院2008年7月至2012年12月收治的行PCNL术128例患者的临床资料,其中男101例,女27例,将其随机分为观察组（ n ＝64）和对照组（ n ＝64）。观察组俯卧位下行 PCNL术时给予本院自制 U 形骨垫支撑,对照组则不给予自制U形骨垫支撑。观察并记录两组患者术中平均动脉压（MAP）,心率（HR）,呼吸频率（RR）,手术时间,大出血发生例数,术后结石残留情况。【结果】观察组患者均穿刺成功,术中无一例需要中转气管插管全麻,无一例因呼吸及循环系统问题终止手术;对照组有2例术中转气管插管全麻,1例因呼吸及循环系统问题终止手术,两组比较均有显著性差异（均 P ＜0．05）。与对照组相比,观察组MAP、HR及RR均低于对照组,差异均有统计学意义（均 P ＜0．05）。观察组大出血及结石残留发生率均低于对照组,差异均有统计学意义（均 P＜0．05）。【结论】自制U形骨垫降低了俯卧位下行PCNL术对患者循环及呼吸系统的不良影响,提高了患者术中体位耐受程度,降低术中大出血的风险,减少了结石残留率,有一定的临床应用价值。     

三维聚丙烯酰胺凝胶DNA芯片用于大样本单核苷酸多态分型的方法研究

目的 建立三维聚丙烯酰胺凝胶DNA芯片用于大样本单核苷酸多态(single nucleotide polyrnorphisms,SNP)分型的方法.方法 丙烯酰胺基团修饰的PCR产物与丙烯酰胺单体混合后,在丙烯酰胺基团修饰的玻片上点样进行共聚合,建成三维凝胶DNA阵列;芯片与一对特异探针和一对分别标记了Cy3或Cy5的通用序列标签(Tag1和Tag2)进行杂交;杂交后用施加电场的方法去除非特异吸附和错配,最后通过双色荧光共聚焦扫描进行SNP分型.结果 3-D凝胶芯片不但具有很高的固定效率,而且可以提供高效的杂交环境;通用序列标签的使用木需对每个位点都标记荧光,使检测成本大幅降低;外加电场使得单碱基错配容易识别,且能显著降低芯片的信噪比.结论 基于3-D凝胶的基因芯片技术用于大样本SNPs分型简单易操作,且高通量、高特异性、低成本,该方法将可以更广泛地应用于不同需求的DNA检测中.     

三维聚丙烯酰胺凝胶DNA芯片用于大样本单核苷酸多态分型的方法研究

目的 建立三维聚丙烯酰胺凝胶DNA芯片用于大样本单核苷酸多态(single nucleotide polyrnorphisms,SNP)分型的方法.方法 丙烯酰胺基团修饰的PCR产物与丙烯酰胺单体混合后,在丙烯酰胺基团修饰的玻片上点样进行共聚合,建成三维凝胶DNA阵列;芯片与一对特异探针和一对分别标记了Cy3或Cy5的通用序列标签(Tag1和Tag2)进行杂交;杂交后用施加电场的方法去除非特异吸附和错配,最后通过双色荧光共聚焦扫描进行SNP分型.结果 3-D凝胶芯片不但具有很高的固定效率,而且可以提供高效的杂交环境;通用序列标签的使用木需对每个位点都标记荧光,使检测成本大幅降低;外加电场使得单碱基错配容易识别,且能显著降低芯片的信噪比.结论 基于3-D凝胶的基因芯片技术用于大样本SNPs分型简单易操作,且高通量、高特异性、低成本,该方法将可以更广泛地应用于不同需求的DNA检测中.     

广州及其周边地区福寿螺体内广州管圆线虫感染的现状调查

目的了解广州及其周边地区福寿螺感染广州管圆线虫的情况，为防治提供依据。方法．人式消化174只福寿螺。显微镜下检查消化液中有无广州管圆线虫幼虫。结果广东省广州市花都区、广州市越秀区、兴宁、化州、蕉岭、茂名等六地的福寿螺感染率分别为25．0％、23．1％、24．2％、18．5％、14．3％、13．3％，广东省东莞采集的福寿螺未发现感染广州管圆线虫。结论广东省广州市花都区、广州市越秀区、兴宁、化州、蕉岭、茂名等六地存在广州管圆线虫的自然疫源地。     

气相色谱法测定麝心通胶囊中麝香酮的含量

目的:建立麝心通胶囊中麝香酮的含量测定方法。方法:采用2%OV-17不锈钢色谱柱,柱温200℃,进样口温度250℃,检测器温度275℃,氮气压力280kPa。结果:麝香酮在0.1224～1.7135μg范围内与其峰面积呈良好线性关系,平均回收率为101.3%(RSD=1.2%)。结论:此法简便、快速、准确,可作为麝心通胶囊含量测定的方法。     

细菌人工染色体标记-微球鉴别/分离法在产前诊断中的临床应用价值

目的:探讨细菌人工染色体标记-微球鉴别/分离法(BoBs)在产前诊断中的临床应用价值。方法:对2015年1月至2018年4月空军军医大学第一附属医院4882例有产前诊断指征的孕妇羊水细胞行染色体核型分析和BoBs检测,检测结果进行比较分析。结果:4882例羊水中共检出胎儿染色体异常289例,异常检出率5.92%。其中染色体核型分析检出271例,BoBs检出266例。不同产前诊断指征下,无创产前检测高风险组的染色体异常检出率最高,占56.00%。289例异常核型中,染色体非整倍体239例,BoBs检测结果与染色体核型分析结果吻合;染色体微缺失/微重复综合征21例,染色体核型分析仅检出3例;性染色体嵌合11例,BoBs检出6例;染色体结构异常18例,BoBs均未检出。结论:BoBs技术是一种可靠的检测技术,可以全面快速检测胎儿染色体非整倍体及9种常见的微缺失/微重复综合征,与染色体核型分析联合可以提高产前诊断的效率及准确性,具有较高的临床应用价值。     

SLC25A12基因多态性与孤独性障碍的关联

目的：探讨SLC25A12基因单核苷酸多态性（SNP）与孤独性障碍的遗传关联性。方法：采用聚合酶链式反应和DNA芯片杂交技术,在124个汉族孤独性障碍患儿核心家系中,检测了SLC25A12基因的2个SNP位点（rs2056202,rs2292813）,采用传递不平衡检验（TDT）和单倍型的方法进行关联分析。结果：在124个患儿核心家系中,所测得的2个SNP位点的等位基因和基因型的频数分布均符合Hardy-Weinberg平衡检验（χ^2=0.009,P=0.92;χ^2=0.006,P=0.94）。而且这2个SNP处于一个强连锁不平衡区域（D’=0.842,r2=0.566）。对124个核心家系TDT检验,发现带有杂合子基因的父代优先传递给子代的等位基因的传递率和此传递率的置信区间差异无显著性（P〉0.05）;所有样本的2个SNP位点,未发现与孤独性障碍的显著关联。结论：SLC25A12基因可能不是这些汉族家庭儿童孤独性障碍的主要易感基因。     

要健身不要伤害

肌肉痉挛 肌肉痉挛就是俗称的"抽筋",在健身房内经常会做一些快节奏的、高频率的动作.例如:动感自行车、搏击操等,这时很容易发生肌肉痉挛,而小腿腓肠肌是最容易发生痉挛的肌肉之一.     

弓形虫可遗传及可诱导的RNAi载体系统的构建

目的 构建弓形虫可遗传及可诱导的RNAi载体系统,为弓形虫基因功能研究提供工具.方法 通过PCR和酶切连接,首先构建弓形虫主要表面抗原1(SAG1)基因启动子驱动的绿色荧光蛋白基因载体pBSK-SAG1/5UTR-eGFP-SAG1/3UTR(pBSK-SAG1/GFP),然后构建以弓形虫热休克蛋白HSP70基因启动子驱动的反向重复序列RNAi载体pBSK-HSP70/5UTR-IntronC-HSP70/3UTR,将载体pBSK-SAG1/GFP中的SAG1/5UTR-eGFP-SAG1/3UTR片段克隆到载体pBSK-HSP70/5UTR-IntronC-HSP70/3UTR中形成载体pBSK-GFP-Hairpin,再将该载体中的GFP-Hairpin片段克隆到载体pHANA-0.5中形成弓形虫可遗传及可诱导的RNAi载体系统pHANA-hairpin.通过PCR分别扩增SAG1和缓殖子蛋白1(BAG1)基因的正向和反向序列,通过酶切连接.将正向和反向序列克隆到载体pHANA-hairpin中.分别构建靶向SAG1和BAG1基因的RNAi载体pHANA-hairpin/SAG1和pHANA-hairpin/BAG1.结果 酶切鉴定和测序结果表明成功构建载体pHANA-hairpin、pHANA-hairpin/SAG1和pHANA-hairpin/BAG1.结论 弓形虫可遗传及可诱导的RNAi载体系统成功构建,为下一步基因功能研究奠定基础.