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目的优化大肠杆菌表达重组[Gly14]-Humanin(HNG)融合基因工程菌的发酵工艺。方法在15L发酵罐内,研究培养基、培养条件和诱导时间对工程菌生长和目的蛋白表达的影响,并考察工程菌中重组质粒的遗传稳定性。结果工程菌在pH7.4的2×YT培养基中诱导5h,菌体湿重可达80g/L,目的蛋白表达量约占总蛋白的36%,所构建的重组质粒在BL21宿主菌中传代稳定。结论优化了HNG融合基因工程菌的发酵和表达条件,为药物中试研究和规模化生产奠定了基础。 相似文献
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用基因芯片筛选早期大肠癌相关基因 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 用基因芯片技术筛选早期大肠癌相关基因. 方法 利用HG-U133Plus2.0基因芯片,对大肠腺瘤组织、癌组织和正常组织基因表达谱进行检测,并利用生物信息学方法对检测结果进行分析. 结果 腺瘤组织与正常组织比较,表达差异2倍以上基因及ESTs共有1892个,其中表达上调的485个,表达下调的1407个.腺瘤组织和癌组织同时与正常组织比较,有602个表达相同的基因及ESTs,其中表达上调2倍以上的125个,表达下调2倍以上的477个. 结论 602个腺瘤与癌表达相同的基因可能与早期大肠癌的启动和演化有关. 相似文献
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目的 探讨AP-2α基因对人类结肠癌SW480细胞体外增生及侵袭能力的影响.方法 构建PODNA3.1(+)-AP-2α真核表达载体,利用脂质体介导pcDNA3.1(+)-AP-2α和pcDNA3.1(+)转染5W480细胞,并以正常SW480细胞作为空白对照;采用RT-PCR与Western blotting分别检测转染48 h后各组细胞中AP-2αmRNA与蛋白的表达情况;采用平板克隆、软琼脂克隆形成试验以及Transweil侵袭试验,分别检测各组细胞体外增生及侵袭能力.结果 SW480细胞内源性AP-2α蛋白表达缺失;转染AP-2α基因后,在SW480细胞中可检测到高水平的AP-2αmRNA及蛋白,细胞克隆形成率降低(P<0.05),软琼脂克隆体积小且数量少,细胞侵袭能力下降(P<0.05).结论 转染AP-2α基因可以抑制人类结肠癌SW480细胞的体外恶性增生以及侵袭能力. 相似文献
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DNA错配修复基因SNPs是个体间DNA错配修复能力差异的主要原因,是决定机体肿瘤易感的一个重要因素。当前,关于DNA错配修复系统基因SNPs与大肠癌易感性方面的研究,涉及到的基因还不够全面,尚无法明确二者关系。随着高通量SNPs筛查技术的进步,并充分考虑多基因遗传、环境、种族等因素的情况下,才能建立起基因SNPs与大肠癌易感性之间较为明确的关联,为大肠癌的早诊、预防及治疗提供依据。 相似文献
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GMER注重培养医学生医学专业知识、临床技能,以及医师职业精神、社会科学、健康经济学、医学信息管理和人际交流技巧等,山西医科大学以GMER及其评价方法为出发点,对医学教育进行全面改革,将GMER七大领域要求融入临床医学专业培养目标,全面推进素质教育.构建了临床教学模拟医院,通过改善教学条件,优化课程结构,对教学内容、教学方法及教学手段进行全方位调整,强化素质培养;改革管理体制,创建"可持续发展"的管理与运行机制,使之成为施行GMER的良好基地.临床教学模拟医院以培养学生临床思维能力,提高临床操作能力为目的,融入职业素质训练,强化医学生综合能力培养,推广GMER教育理念,最终使学生逐步完成医学基础课向临床实践、单向技能向综合能力、模式化思维向集成创新思维、临床医学生向职业医生的转换,更好地完成临床医学教学任务,促进我国医学教育改革发展,与世界医学教育接轨. 相似文献
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目的 通过插入突变法,转录前加工、修饰人肝细胞生长因子β基因,构建人肝细胞生长因子β基因的可表达全序列,以使肝细胞生长因子β基因可在细胞内单独表达,用于研究肝细胞生长因子β基因在生物体内的生物学作用。方法 从人肝细胞中提取总RNA,反转录成为含肝细胞生长因子β结构基因区序列的cDNA,在此cDNA序列结构基因区前插入翻译起始密码子、SD序列、SD序列间隔等调节序列和限制性内切酶接头;PCR扩增β基 相似文献
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浅谈如何提高实验教学质量 总被引:4,自引:3,他引:1
随着素质教育的实施和推进,传统的实验教学在学生的实验技能训练和培养方面显得十分落伍,它远不能适应时代发展对学生的素质培养和发展需求,本文就实验教学改革,提高教学质量,着重从师资队伍建设,实验课堂教学改革,学生综合素质提高、实验室建设及实验管理等方面阐述了自己的观点。 相似文献
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鱿鱼肝脏中核酸的纯化工艺研究 总被引:3,自引:0,他引:3
采用离子交换层析,一步分离纯化鱿鱼肝脏中的核酸初抽提样品,层析条件填料为DEAE-纤维素,色谱柱8cm×1cm,流速1ml/min,260nm紫外检测,收集以0.6mol/LNaCl(pH7.4Tris-Cl缓冲液)为洗脱相时的洗脱液,得率为85%~89%,经透析、低压冷冻干燥,可获得纯度为87%~90%的核酸产品,可用于医药及食品工业. 相似文献
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人肝细胞生长因子β链基因的克隆及表达载体的构建 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 构建重组人肝细胞生长因子-β(rhHGF-β)的克隆表达体系。以期进一步研究HGF基因的表达调控及HGF的生物学、医学作用。方法 从人胎肝细胞中提取总RNA,运用RT-PCR技术,对HGF-β基因转录前加工修饰,与载体重组,构建rhHGF-β的克隆,并对克隆进行限制性内切酶酶切图谱分析,对重组体中插入的外源基因进行序列分析。结果 获得了rhHGF-β完整的cDNA序列,重组体克隆的酶切结果与设计一致。结论 首次成功地构建了人肝细胞生长因子-β(rhHGF-β)的克隆表达体系。 相似文献