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目的 构建 β2 糖蛋白 (β2 - GPI)的原核表达载体并诱导其表达。方法 利用 PCR技术从 β2 - GPI昆虫表达载体中扩增出编码β2 - GPI目的 DNA片段 ,将其插入 GST融合表达载体 p GEX- 2 T多克隆位点 ,以 IPTG诱导 GST融合 β2 - GPI的表达。结果 凝胶电泳显示昆虫表达载体的 PCR扩增产物的分子量大小与目的片段大小相符。对重组质粒 (p GEX- 2 T- β2 - GPI)分析表明 ,插入片段的序列与发表的 β2 - GPI基因编码序列一致。在 IPTG的诱导下 ,BL 2 1重组菌高效表达出一个分子量约为 6 4 k Da产物 ,与预期相符。结论 β2 - GPI编码序列已被克隆至 GST融合表达载体 p GEX- 2 T。 相似文献
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一例遗传性凝血因子Ⅴ缺乏症发病机制研究 总被引:7,自引:0,他引:7
目的研究遗传性凝血因子Ⅴ(FⅤ)缺乏症的发病机制.方法通过免疫学方法和发色底物法检测血浆和血小板中的FⅤ含量,采用PCR产物直接测序和限制性酶切分析FⅤ基因,应用分子模建对所鉴定突变的生物结构病理学进行研究.结果先证者血浆和血小板中FⅤ均缺乏.先证者FⅤ基因第1?763位核苷酸存在A→C突变(1?763A→C,EMBL AJ297254).模建分析表明,该突变将导致分子内部形成空洞,并可能破坏Tyr530与Glu330之间形成的氢键.结论 1?763A→C 突变将导致FⅤ稳定性降低,是致病的重要原因. 相似文献
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凝块分离双缩脲比色测定纤维蛋白原的改进方法 总被引:2,自引:0,他引:2
当前纤维蛋白原(Fib)的测定方法甚多,按其测定的原理大体上可分为三大类:热/盐沉淀法、可凝固蛋白法(功能法)和免疫学方法[1]。凝块分离双缩脲比色法是卫生部医政司编印的《全国临床检验操作规程》(下称《规程》)推荐的方法[2],属于可凝固蛋白法。我们将其与参考方法——Jocobsson法和冯·克劳斯(vonClauss)法作了比较,探讨其实用性和可靠性,同时对方法本身进行了部分改进。方 法一、Jocobsson法 系WHO推荐的Fib参考方法,具体操作见参考文献[3]。二、克劳斯法 系NCCLS推荐的Fib常规测定方法,具体操作见参考文献[4]。三、凝块分离… 相似文献
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507例男性不育症患者细胞遗传学分析 总被引:15,自引:3,他引:12
作者对507例男性不育患者进行外周血染色体检查,检出异常核者94例,检出率为18.54%(94/507)。其中性染色体数目和结构异常者76例,以克氏征为最多;常染色体异常者有17例,以平衡易位为主;46,XX男性1例。本文结合文献阐述了Y染色体的结构和功能,并重点对5例46,XY(小Y)、2例46;XY,i(Yp)和3例46,X del(Yqll→qter)引起少精子、无精子或清子活力异常及1例46,XX男性进行了讨论。 相似文献
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斑马鱼是研究脊椎动物器官发育和人类疾病的重要遗传学模型动物之一。它具有独特的生理特征:如体积小、生殖周期短、生殖能力强、体外受精且胚胎发育透明等特点,适宜于作大规模的突变筛选。斑马鱼已成为造血系统研究的重要的模式生物体。 相似文献
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凝血酶原时间测定标准化及在抗凝治疗中应用 总被引:12,自引:0,他引:12
凝血酶原时间测定标准化及在抗凝治疗中应用程烽,朱忠勇凝血酶原时间(PT)测定(一期法)是一种外源性凝血系统的过筛试验。PT延长多见于先天性VII、X、V及凝血酶原缺乏症,获得性缺乏多见于肝病、阻塞性黄疸、弥漫性血管内凝血(DIC)及口服抗凝药物治疗时... 相似文献
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目的调查福州地区健康体检人群脂肪肝患病率以及年龄分布特征,并探讨脂肪肝的健康管理方案。方法对2011年1—3月,在福建中医药大学附属第二人民医院健康体检中心进行健康体检的11343例个体进行调查,根据脂肪肝超声诊断标准,将脂肪肝分为轻度、中度、重度,并按性别、年龄分组进行统计学分析。结果福州地区体检人群脂肪肝的总患病率为20.43%,男性(28.77%)高于女性(10.68%),差异有统计学意义(P〈0.01)。脂肪肝的总患病率随着年龄增长而增加。性别分层后,在20~59岁各年龄组间,男性脂肪肝患病率均高于女性,差异有统计学意义(P〈0.01)。在60-69岁和I〉70岁2个年龄组,女性患病率略高于男性,但差异无统计学意义。结论福州地区健康体检人群的脂肪肝患病率与其他城市相近,并呈年轻化趋势。提倡定期健康体检,及时发现脂肪肝,并通过健康教育,早期防治脂肪肝。 相似文献
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遗传性高铁血红蛋白血症(RCM)是一种常染色体隐性遗传性疾病。通常是由患者的NADH-细胞色素b5还原酶(b5R)缺陷所致。近年来通过对该病的患者进行生物化学、免疫学及分子生物学研究。共发现6种新的突变基因型(R57Q,L72P、C203Y、R60H、M176T和P264L)。为了探讨b5R基因突变引起RCM的分子病理机制,研究突变型b5R蛋白结构和功能的关系,我们构建了野生型pGST-b5R和突变型pGST—b5RL72P表达载体,并在大肠杆菌中表达,获得了纯化的GST—b5R和GST—b5RL72P蛋白,为研究该突变对b5R酶的影响打下了基础。 相似文献
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目的:构建人膜联蛋白V的原核表达载体并诱导其表达。方法:利用RT-PCR技术从人胎盘组织总RNA扩增膜联蛋白V基因的编码序列,将扩增产物克隆至GST融合表达载体pGEX-2T,以ITPG诱导GST融合人膜联蛋白V的表达。结果:凝胶电泳显示人胎盘组织RT-PCR扩增产物的分子量大小与目的片段大小相符。对重组质粒分析表明,插入片段的序列与发表的人膜联蛋白V基因编码序列一致。在IPTG的诱导下,BL21重组菌高效表达出一个分子量约为61kDa产物。结论:人膜联蛋白V编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-2T。 相似文献
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Graves病是一种器官特异性自身免疫病,是一种由多个基因与环境因素参与的多基因病。尽管进行了大量的研究, GD的遗传学机制至今尚未阐明。与GD发病相关的候选基因主要分成两大类:(1)与机体免疫调节有关的基因:(2)与甲状腺生理机能调节有关的基因。本文就与 GD易感性研究最多的基因 HLA 、CTLA-4 、TSH-R 及一些细胞因子作一简要综述。 相似文献