金银花药材HPLC指纹图谱研究

目的研究金银花药材的指纹图谱测定方法,确定金银花药材HPLC标准指纹图谱。方法采用Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈和0.4%磷酸为流动相梯度洗脱,流速:1 mL/min。结果获得17个共有指纹峰。结论该方法准确、可靠,为更好地控制金银花的内在质量提供了科学依据。      

兔风寒湿痹证型颈椎病模型的建立

目的：模拟自然界不同强度风寒湿刺激，建立中医风寒湿痹证型颈椎病动物模型。 方法：选择24只8月龄雄性新西兰白兔，随机分为正常对照组以及轻、中和重度刺激组。基本刺激条件是6级风力（10．8～13．8m／s），（5±0．5）℃，100％湿度，按轻、中、重度刺激组的不同要求，分别给予32、64和128h的间断重复刺激，每日刺激4h。HE染色，光学显微镜下观察椎间盘组织形态改变，放射免疫法检测前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）、6-酮-前列腺素F1α（6-ketone—prostaglandin F1α，6-K—PGF1α）和血栓素B2（thromboxane B2，TXB2）含量，免疫组织化学ABC法检测Fas和Bcl-2表达情况，逆转录-聚合酶链反应法检测白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α，TNF—α）和转化生长因子β（transforming growth factor β，TGF—β）mRNA表达情况。 结果：轻、中度刺激组椎间盘髓核收缩，重度刺激组纤维疏松断裂，软骨终板增厚。与正常对照组比较，轻度刺激组椎间盘组织PGE2有所升高，中度和重度刺激组PGE2、6-K—PGF1α和TXB2升高，IL-1β、TNF—α mRNA和Fas表达明显增加，TGF—βmRNA和Bcl-2表达明显降低。重度刺激组Fas表达进一步增加，Bcl-2表达进一步降低。 结论：中、重度风寒湿刺激可以导致家兔颈椎间盘明显退变，可用于建立风寒湿痹证型颈椎病动物模型。     

玉竹百合蛤蜊汤煎煮工艺及抗疲劳作用的研究

目的?研究经典食疗方玉竹百合蛤蜊汤的最佳煎煮方法及其抗疲劳的作用,为今后以该方为基础的抗疲劳保健品的开发提供理论依据。方法?为优选玉竹百合蛤蜊汤的煎煮工艺,以浸膏得率,总多糖、牛磺酸的含量为考察指标,以加水量、提取时间、提取次数为考察因素,采用正交试验优选其煎煮方法;并按照2003版《保健食品检验与评价技术规范实施手册》的要求,设正常组、模型组、阳性组及玉竹百合蛤蜊汤低、中、高3个剂量组,经口给予样品,采用小鼠游泳疲劳模型,对比各组小鼠负质量游泳时间、不负质量游泳后血清乳酸（LA）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）指标的差异,观察玉竹百合蛤蜊汤对小鼠的抗疲劳能力影响。结果?玉竹百合蛤蜊汤最佳煎煮工艺为加10倍量水,提取3次,每次60?min,在最佳煎煮工艺下,总多糖含量为(79.48±7.82)mg/g,牛磺酸含量为(1.95±0.02)mg/g,干浸膏得率为(26.82±0.53)%。高、中剂量组的玉竹百合蛤蜊汤能显著延长小鼠负质量游泳时间(P<0.05);与模型组相比,3个剂量组的玉竹百合蛤蜊汤能显著降低小鼠血清乳酸(P<0.01)及丙二醛(P<0.01)的含量,且呈剂量依赖性,并能显著降低肌酸激酶(P<0.01)、乳酸脱氢酶(P<0.01)的活力,并升高超氧化物歧化酶的活力。结论?本实验确定了玉竹百合蛤蜊汤的最佳煎煮工艺,并证明了该食疗方具有较好的抗疲劳功效,为该方作为保健食品进一步开发提供依据。      

干燥温度对珍珠贝软体中核苷影响

目的对马氏珍珠贝软体中核苷类成分进行分析并且考察干燥温度对核苷类成分的影响。方法采用HPLC-Q-TOF/MS鉴别珍珠贝中核苷类成分,通过鉴别共有13种核苷类成分;使用HPLC-UV对不同温度干燥的珍珠贝软体进行核苷类成分含量测定。结果显示60℃下干燥的马氏珍珠贝核苷含量最高,三角帆蚌在50℃含量最高。结论马氏珍珠贝软体中除了大分子的蛋白质多糖外,实验首次对小分子的核苷类成分进行了鉴定并建立了HPLC-UV含量测定方法。     

正交试验优化文蛤水溶性多糖的水提醇沉工艺

目的:优选文蛤水溶性多糖的水提醇沉工艺,为该有效部位的保健品开发提供实验依据。方法:采用蒽酮-硫酸法测定水溶性多糖的含量,检测波长625 nm。以水溶性多糖转移率为指标,通过单因素试验考察提取溶剂p H及绞碎程度对文蛤水溶性多糖转移率的影响。以水溶性多糖转移率为指标,通过正交试验考察加水量、提取时间、提取次数对文蛤水溶性多糖水提工艺的影响。以水溶性多糖得率及质量分数的综合评分为指标,通过正交试验考察浓缩程度、醇沉浓度、醇沉时间对文蛤水溶性多糖醇沉工艺的影响。结果:文蛤水溶性多糖的最佳水提工艺为加3倍水煎煮3次,每次40 min,水提液浓缩至原料的1/2,加乙醇醇沉至体积分数达80%,醇沉12 h,抽滤,60℃减压干燥。文蛤水溶性多糖得率7.71%,质量分数42.53%。结论:优选的文蛤水溶性多糖水提醇沉工艺稳定可行,可兼顾该有效部位的得率和纯度,为该部位的研究与开发提供参考。     

针刀治疗腰椎间盘突出症的系统评价

目的运用循证医学方法系统评价针刀治疗腰椎间盘突出症的有效性及安全性。方法采用Cochrane系统评价方法 ,电子检索MEDLINE、EMBASE、Cochrane图书馆临床对照试验资料库、中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库、重庆维普数据库、万方数据库等,手工检索相关中医学术期刊,有关学术会议已发表与未发表的相关文献。纳入治疗组采用针刀治疗、对照组采用非针刀疗法的随机对照试验。由2名评价者独立选择试验、提取资料、交叉核对和进行方法学质量评估。统计分析采用RevMan4.2软件进行。结果共13个针刀治疗腰椎间盘突出症的临床随机对照试验符合纳入标准,仅有2篇高质量研究文献。针刀治疗腰椎间盘突出症近期疗效汇总:OR=3.17(95%CI:2.58～3.90),Z=10.93,P0.00001。远期疗效汇总:OR=6.48(95%CI:4.64～9.06),Z=10.95,P0.00001。复发率汇总:OR=0.56(95%CI:0.31～1.01),Z=1.91,P=0.06。结论目前有限的纳入研究初步显示针刀治疗腰椎间盘突出症安全,在改善症状、提高整体功能等方面均较对照组有效,但因本系统评价纳入研究的方法学质量较低,例数较少,且诊断标准、随访时间、结果测量指标和判效标准等均不一致,因此需要开展设计合理、执行严格的大样本、多中心和方法科学、规范的高质量随机对照试验进一步验证其疗效及安全性。     

电针夹脊穴对海洛因依赖者心理渴求及血浆β-EP、Dyn-A影响

目的:探讨电针夹脊穴干预海洛因依赖者心理渴求的临床效应及作用机制。方法:将120例海洛因依赖者随机分为4组,每组30例。针刺1组穴取T5-T7夹脊穴、肾俞,予电针治疗;针刺2组取四肢穴位内关、神门、足三里等,予电针治疗;模拟组于足三里、三阴交行模拟电刺激;空白组不予任何干预治疗。采用心理渴求程度视觉类比量表(VAS)评定心理渴求程度变化,采用放射免疫法检测血浆β-内啡肽(β-EP)和强啡肽-A(Dyn-A)治疗前后的变化。结果:针刺1组复吸率为77.3%(17/22),低于针刺2组的88.5%(23/26)、模拟组的90.5%(19/21)和空白组的95.7%(22/23)(均P0.05)。治疗8周、治疗10周时,针刺1组、针刺2组心理渴求程度VAS积分明显低于空白组和模拟组(均P0.01),针刺1组低于针刺2组(P0.05),模拟组低于空白组(P0.05);治疗10周后,针刺1组、针刺2组血浆β-EP、Dyn-A水平均较治疗前有所上升(P0.05,P0.01),模拟组和空白组Dyn-A水平较治疗前下降(均P0.01),两个针刺组较空白组和模拟组明显上升(均P0.01),针刺1组较针刺2组上升更明显(P0.05)。结论:电针夹脊穴可明显抑制海洛因依赖者心理渴求,降低复吸率,其机制可能与增加血浆β-EP的含量,尤其是促进血浆Dyn-A增加有关。     

基于网络药理学探讨复方鲜石斛颗粒防治酒精性肝病的作用机制及实验验证

目的 结合网络药理学方法和实验验证探讨复方鲜石斛颗粒防治酒精性肝病(ALD)的作用靶点及潜在机制。方法 借助TCMSP、ETCM、BATMAN-TCM数据库及文献报道检索复方鲜石斛颗粒的化学成分,利用Swiss ADME数据库筛选优效目标化合物,并通过Swiss Target Prediction数据库对活性成分靶点进行预测。通过GeneCards、OMIM、DrugBank、DisGeNET数据库获取ALD相关疾病靶点,采用String数据库和Cytoscape软件构建靶点相互作用网络图(PPI)及“中药-活性成分-靶点-疾病”网络图,将预测的潜在作用靶点通过DAVID数据库进行GO/KEGG功能富集分析预测作用机制。构建酒精性肝损伤小鼠模型,通过病理染色、ELISA检测、qPCR及Western blot来验证网络药理学富集分析结果。结果 通过数据库及文献报道共筛选获得73个关键活性成分,与ALD交集靶点有720个,根据P<0.05,FDR<0.05的GO注释分析得到789个BP信息,93个CC信息,204个MF信息,194个KEGG信号通路,主要涉及代谢过程、PI3K...     

限制性酶解修饰对郁李仁分离蛋白结构和功能特性的影响

目的 以郁李仁分离蛋白为研究对象,探讨限制性酶解修饰对郁李仁蛋白结构和功能特性的影响。方法 采用碱性蛋白酶修饰郁李仁分离蛋白,探讨酶解时间对郁李仁分离蛋白亚基组成、二级结构、三级结构、溶解性、乳化性、ζ-电势、表面疏水性以及热稳定性的影响。结果 郁李仁分离蛋白经过酶解修饰后,其溶解性提高了156%,乳化活性提高了135%,乳化稳定性提高了696%,表面疏水性提高了182%。这些功能特性的改善主要是因为酶解修饰诱导郁李仁分离蛋白质中小分子肽链的释放、无规则卷曲结构的增加、分子的去折叠化以及表面电荷数量的增加。然而,郁李仁分离蛋白功能特性的改善与水解度密切相关。过度水解(水解度>6.3)会诱导蛋白质发生聚集行为,从而导致功能特性的下降。此外,酶解修饰还会降低郁李仁分离蛋白的热稳定性。结论 在采用限制性酶解修饰技术时,可以通过控制水解度,从而改善郁李仁分离蛋白的功能特性。     

基于经典名方的药食同源大健康产品开发应用探讨

从近年来国家的引导政策和药食同源联合经典名方的开发利弊等方面综合阐述了药食同源经典名方的发展趋势。为中医药大健康平台注入经典力量的同时融入现代化的科技研发能力,开发出适用人群广泛且易于为现代人群接受的产品。形成以中医药理论为基础、药食同源物质为原料、中医药现代化推广与应用化为目标的药食同源经典名方产品的开发策略。