Bikunin的分子克隆及真核分泌型表达载体的构建和表达

目的 构建含有Bikunin的哺乳类细胞表达载体pSecTag2B-Bikunin,应用哺乳类细胞表达系统,表达分泌型Bikunin融合蛋白.方法 用RT-PCR方法,从人肝细胞系L02扩增Bikunin编码区序列,将其克隆于pMD18-T Simple Vector中构建pMD18-T-Bikunin,经酶切、PCR...     

精准护理在我国临床实施的现状及展望

结合精准护理在不同临床专科护理领域的实施现状,探讨精准护理实施中存在的问题和不足,提出改进策略,包括扩大学科知识体系、实施精准用药护理、强化多元学科合作、以循证护理指导科学的精准护理实践、开展精准延续护理等,为提高精准护理实施的科学性和针对性提供参考。     

生脉注射液在胃癌根治术患者术后机体状态改善中的应用价值研究

目的观察生脉注射液在胃癌根治术患者术后机体状态改善中的应用价值,以为胃癌根治术患者术后机体的恢复提供参考依据。方法选取2015年2月至2016年11月期间进行胃癌根治术治疗的64例患者为研究对象,将64例患者根据随机数字表法分为对照组32例和治疗组32例,对照组进行常规围手术期治疗,治疗组则在对照组的基础上加用生脉注射液进行治疗。然后分别检测与比较两组患者治疗前和治疗后5 d、10 d、20 d的免疫功能指标、炎性反应指标及氧化应激指标。结果两组患者治疗后不同时间治疗组的免疫功能指标、炎性反应指标及氧化应激指标均显著优于对照组,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论生脉注射液可显著地改善胃癌根治术患者的术后免疫、炎性反应及氧化损伤状态,因此在机体状态改善中的应用价值较高。     

不良妊娠患者应对方式的现状及其影响因素

目的了解不良妊娠患者的应对方式并分析其影响因素,为进行针对性的护理干预提供依据。方法方便抽样法选取2013年1月至2014年1月宁波市某三级甲等妇女保健医院收治的不良妊娠患者125例,采用自制的一般情况调查问卷及应对方式问卷(coping style questionnaire,CSQ)对其进行调查,分析调查结果。结果不良妊娠患者最常采用解决问题和求助等成熟型应对方式,不同年龄、文化程度、经济收入、孕龄和生育史的不良妊娠患者在应对方式选择上的差异有统计学意义P0.05或P0.01。结论护理人员应帮助年龄较轻、文化程度和收入较低、孕龄较大及未生育过的不良妊娠患者采用成熟型应对方式,以促进其身心健康。     

不良妊娠患者抑郁现状及影响因素分析

目的探讨不良妊娠患者发生抑郁现状及影响因素,为不良妊娠患者针对性干预提供参考。方法采用一般资料调查表、Beck抑郁量表、社会支持量表和应对方式问卷对125例不良妊娠患者进行问卷调查。结果不良妊娠患者抑郁发生率为56.0%。社会支持总分42.86±6.70,应对方式6个分量表均分0.46~0.79;Logistic回归分析显示,孕周、解决问题、自责、客观支持4个变量进入回归方程。结论不良妊娠患者抑郁发病率较高,社会支持处于中等水平,孕周、自责应对方式为危险因素,客观支持、解决问题应对方式为保护因素。护理人员可根据患者的个体特征进行干预,防止抑郁的发生。     

人-人杂交瘤单克隆抗体分泌的变异性

UC729-6细胞与淋巴结细胞一次性融合产生了几株人-人杂交瘤,对其所分泌和合成大分子类型和性质进行了鉴定。VLN3G2杂交瘤株生长4天后,分泌的IgG比细胞浆高4倍。而IgM的分布与IgG正相反。与VLN3G2不同,VLN5C7在同一时间内,胞浆中所含IgG与IgM的量比分泌型的量高出几倍。这二株杂交瘤所分泌的IgG和JgM,只有IgG对靶A431细胞表面抗原有免疫反应性。还有一株为VLN1H12,所分泌的IgM对靶A431细胞有免疫活性,未测到有IgG的分泌。反复冻融杂交瘤细胞制备的胞浆蛋白,NP-40的细胞膜提取获得膜蛋白,用ELISA检测各杂交瘤上清的分泌蛋白,以了解细胞和细胞外观察到的免疫蛋白的变异性。用于融合的亲本UC-729-6细胞系只产生微量无免疫活性的IgM。对这些杂交瘤上清的分子筛柱层折提示有完整IgG和IgM分子,缺乏游离重链或同时含有μ和γ量链的杂交抗体。用抗硫-蛋氨酸内标记VLN3G2杂交瘤细胞说明不仅有非免疫球蛋白存在,而且在培养上清有小分子量A蛋白结合多肽存在。从VLN3G2培养液,胞浆及细胞膜分离到的硫-蛋氨酸整合IgG和IgM抗体,也表明可与菌体A蛋白结合。因此本文结论就是,人-人杂交瘤分泌的MCAbs量的变异不是由于这些分子的合成减少所引起的。     

中国不同人群的抗TTV血清流行病学及TTV基因不同区段的分子流行病学研究

目的　了解不同人群血清中抗 TTV抗体及ORF1 、ORF2 区段基因的分布状况 ,并分析其间的关系。方法　根据TTV的ORF1 、ORF2 区段的基因序列分别合成巢式PCR引物 ,扩增 2 46例血清标本中的TTV部分基因片段 ;采用TTVORF2 部分基因原核表达抗原 ,应用酶联免疫吸附试验(ELISA) ,检测相同血清标本中TTV抗体。结果　不同人群TTVORF1 、ORF2 基因及抗体检测的阳性率分别为 :有偿献血者 16 0 % (12 75 ) ,10 7% (8 75 )和 2 5 3% (19 75 ) ,甲型肝炎患者 10 0 % (3 30 ) ,16 7% (5 30 )和 16 7% (5 30 ) ;乙型肝炎患者 47 5 % (19 40 ) ,42 5 % (17 40 )和 2 2 5 % (9 40 ) ,丙型肝炎患者 42 9% (15 35 ) ,37 1% (13 35 )和 2 8 6 % (10 35 ) ;丁型肝炎患者 2 0 0 % (3 15 ) ,2 6 7% (4 15 )和13 3% (2 15 ) ;戊型肝炎患者 16 7% (2 12 )、16 7% (2 12 )、33 3% (4 12 ) ;庚型肝炎患者 2 3 8% (5 2 1) ,38 1% (8 2 1)和 2 3 8% (5 2 1) ;非甲～庚型肝炎患者 6 1 1% (11 18) ,5 0 0 % (9 18)和 44 4% (8 18)。统计分析TTVORF1 与ORF2 基因的检出率相关有统计学意义 (P =0 0 0 0 <0 0 1) ;不同人群间基因检出率相差有统计学意义 (P <0 0 1) ;TTV抗体的检出率与TTVDNA的检出率相关无     

HGV E1区5′端基因的克隆、序列分析及表达

通过ＲＴ－ＰＣＲ从庚型肝炎患者血清中扩增出庚型肝炎病毒Ｅ１区５′端基因Ｅｐ，经限制性内切酶消化后克隆入ｐＵＣ１９质粒中。序列分析结果表明，该基因与中国河北株相关基因核苷酸的同源性为９２％。将该基因亚克隆入原核表达载体ｐＥＸ３１ｂ中，成功地构建了ｐＥＸ３１ｂ－Ｅｐ重组质粒，经４２℃诱导表达，在Ｍｒ２００００处可见一条明显的表达带，表达产物约占总菌体蛋白的８％。经蛋白铜染洗脱法纯化蛋白，ＥＬＩＳＡ检测表明，该蛋白具有抗原性。     

HGV E1区5‘端基因的克隆,序列分析及表达

通过ＲＴ－ＰＣＲ从庚型肝炎患者血清中扩增出庚型肝炎病毒Ｅ１区５’端基因Ｅｐ，经限制性内切酶化后克隆入ｐＵＣ１９质粒中，序列分析结果表明，该基因与中国河北株相关基因核苷酸的同源性为９２％，将该基因亚克隆入原核表达载体ｐＥＸ３１ｂ中，成功地构建了ｐＥＸ３１ｂ－Ｅｐ重组质粒，经４２℃诱导表达，在Ｍｒ２００００处可见一条明显的表达带，表达产物约占总菌体蛋白的８％，经尿白铜染洗脱法纯化蛋白，ＥＬＩＳＡ检测表