表达抗血管内皮细胞生长因子核酶和白细胞介素24腺病毒载体的构建及其对结肠癌HT-29细胞的毒性作用

肿瘤的发生是一个多基因改变过程,因此,在肿瘤基因治疗过程中,以单一基因为靶点的治疗很难取得显著的抗肿瘤效果.我们构建了同时带有双基因抗血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)发夹状核酶(Rz)和白细胞介素24(interleukin-24,IL-24)的腺病毒载体,并初步观察了其对结肠癌HT-29细胞的毒性作用.     

大鼠同种异体心脏移植免疫耐受的特异性实验研究

目的：研究大鼠同种异体心脏移植免疫耐受的特异性。方法：建立大鼠异位心脏移植模型,应用抗淋巴血清（ALS）及／或胸腺内注射脾细胞抗原预处理受体,21天后进行心脏移植,经过心脏移植并产生免疫,耐受的受体鼠在心脏移植60天后再次接受供体鼠的皮肤移植。结果：同时应用ALS及胸腺注射脾细胞抗原组的移植心平均存活时间较其它组显著延长（平均＞72天）,移植的皮肤在移植心耐受组中平均存活7．4天即被排斥,这与未处理组的皮肤移植无判别,但移植皮肤的排斥并不影响移植的心脏。结论：同种异体心脏移植产生的特异性免疫耐受是胸腺内注射供体脾细胞和腹腔注射ALS共同作用的结果。胸腺预注射供体脾细胞并腹腔注射ALS诱导产生的免疫耐受有器官特异性及组织特异性,。     

人延伸体复合物Elp3亚基表达及功能研究

目的将人延伸体复合物(elongator)的中心亚基elp3(elongtor complexprotein3)基因导入293T细胞,观察它对293T细胞生长特性以及基因转录活性的影响。方法用脂质体将pFlAGCMV4-Elp3真核表达载体导入293T细胞,通过G418持续筛选阳性克隆,建立elp3的稳定表达细胞株。通过RT-PCR、免疫荧光法检测外源性elp3基因的表达。MTT法测定细胞生长曲线、流式细胞仪法测定细胞周期及凋亡情况。瞬时转染不同组合的质粒后,收集细胞用荧光素酶报告基因法检测转染前后荧光素酶活性的变化。结果Elp3可以抑制293T细胞生长,并使细胞出现G1期阻滞,未引起293T细胞凋亡。elp3能激活转录,但作用较弱。elp4也可激活转录,过量表达elp3基因与elp4基因时,可明显激活转录,说明两者有协同激活转录作用。Elp3与转录因子TFⅡF亚基RAP30基因过量表达时,两者也可协同激活转录。结论Elp3对293T细胞的生长有明显抑制作用,可诱导G1期细胞阻滞,具有转录激活功能,并可分别与Elp4亚基、RAP30亚基协同激活转录。     

人IL-24重组蛋白免疫刺激及血管形成抑制作用

目的 探讨人重组白细胞介素-24(rhIL-24)蛋白体外免疫刺激功能和血管形成抑制作用.方法 将原核稳定表达得到的rhIL-24蛋白刺激外周血单个核细胞(PBMC),ELISA检测其刺激免疫细胞分泌白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及γ-干扰素(IFN-γ)的活性;利用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型观察rhIL-24蛋白抑制血管形成的效应.结果 rhIL-24蛋白孵育的PMBC在不同时段分泌的IL-6、TNF-α及IFN-γ浓度与阴性对照组相比存在显著差异;rhIL-24蛋白能明显抑制CAM二级和三级血管形成,与阴性组比较,差异极显著.结论 rhIL-24蛋白具有明显的免疫刺激功能和血管形成抑制作用.     

Ad-PTEN体外对SGC-7901胃癌细胞生长的抑制作用

目的:探讨腺病毒介导的PTEN基因表达体外对SGC-7901胃癌细胞生长抑制作用及其分子机制。方法:将携有PTEN基因的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-PTEN)感染SGC-7901胃癌细胞,用RT-PCR法检测Ad-PTEN在细胞中的表达,光学显微镜及荧光显微镜下观察Ad-PTEN感染细胞前后形态的变化,MTT法检测Ad-PTEN对SGC-7901胃癌细胞生长的抑制作用,用流式细胞术(FCM)检测SGC-7901胃癌细胞凋亡率。RT-PCR分析Bax、Bcl-2、p53、Survivin细胞凋亡相关基因的表达。结果:Ad-PTEN基因组感染SGC-7901胃癌细胞后,RT-PCR结果显示PTEN目的基因能在SGC-7901胃癌细胞中转录,其表达可明显抑制该胃癌细胞的生长,并诱导细胞凋亡。其凋亡机制可能与Bax/Bcl-2比值、p53基因表达上调、Survivin下调有关。结论:重组腺病毒Ad-PTEN具有抑制SGC-7901胃癌细胞生长和诱导细胞凋亡的作用。     

再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞生长的影响

目的 研究再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞生长的影响。方法 采用静置贴壁培养法在再生丝素膜上体外培养鼠胚真皮层成纤维细胞，并用活细胞计数法及MTT比色法观察再生丝素膜对细胞的形态、功能和生长的影响。结果 再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞的贴壁能力和形态及其代谢功能未见明显改变，也未见明显毒性，并能支持细胞正常生长，呈现正常的生长繁殖曲线。结论 再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞具有良好的细胞相容性。     

高温对骨肉瘤细胞株体外灭活的实验研究

应用MTT法测定SDH活性及肿瘤干细胞集落形成法对HOS-9603细胞系进行体外热灭活实验研究．结果表明：（1）45℃60min或50℃10min以上，HOS－8603基本失去细胞集落形成能力；（2）SDN的活性随温度升高和时间延长而下降；与细胞集落形成能力有较好的相关性，（3）提示了临床无需采用煮沸灭活即可将肿瘤细胞杀灭．     

敦煌空气净洁剂的抗流感病毒效应

敦煌空气净洁剂是采用中药及其有效成分进行复方配伍的乳化剂,经体外抗病毒试验及气雾杀病毒试验证明具有抗流感病毒效应,既是理想的空气净化剂型,又是有效的空气杀灭流感病毒气雾剂,可用于预防感冒和流感流行。     

5种中药有效成分的干扰素促诱生效应

用100μg/ml的人参皂甙、云芝糖肽、人参多糖、羧甲基茯苓多糖及10μg/ml的刺五加多糖对人脐血白细胞进行了IFN-α和IFN-γ的促诱生试验,其促诱生组的IFN效价比常规诱生组(IFN     

基因工程IFNα_(2a)对肿瘤细胞生长的抑制作用

采用α－干扰素抑制各种肺癌细胞生长的MTT法。结果：不同品牌的10000,1000,100IU／ml的IFNα2a对人脑胶质瘤细胞（SHG—44）、人骨肉瘤细胞（HOS－8603）、人白血病细胞（HL－60）、红白血病细胞（K562）和淋巴瘤细胞（Raji）的生长抑制率分别为20％,10％,5％左右。结论：进口和国产的不同品牌IFNα2a。对上述5种肿瘤细胞株均有较明显的生长抑制效应,且抑制率相近。