骨质疏松hub基因筛选验证及互作miRNA预测

目的 筛选老年性骨质疏松症hub基因及其互作的miRNA。方法 从GEO数据库下载GSE35956基因芯片数据集,利用R语言筛选骨质疏松症患者骨髓间充质干细胞中的差异表达基因（Degs）。利用DAVID数据库对Degs进行GO富集和KEGG通路分析。采用String数据库和Cytoscape软件分析蛋白互作网络,筛选hub基因。通过Targetscan数据库预测与hub基因存在互作关系的miRNA,并通过funrich数据库对预测出的miRNA进行富集分析。提取并培养3～4月龄（青年组）和18～20月龄（老年组）C57BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞,采用荧光定量PCR(qPCR)验证2组小鼠的骨髓间充质干细胞中hub基因表达情况。结果 骨质疏松症患者骨髓间充质干细胞中共鉴定出982个上调的Degs和99个下调的Degs。Degs主要富集到质膜黏附分子介导的同型细胞黏附和钙离子结合等生物过程,主要参与了神经活性配体-受体相互作用信号通路。PPI互作网络分析筛选出8个核心基因：瘦素（LEP）、淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶（LCK）、WT1转录因子（WT1）、SRY-Box转录因子10(SO...     

MiRNAs在脊髓损伤中的作用

microRNAs(MiRNAs)是一类长度18～25个核苷酸的小单链RNA,由DNA转录产生,不翻译成蛋白质,通过碱基互补配对的方式与靶基因的3'UTR区部分或完全互补,剪切靶基因的转录产物或者抑制转录产物的翻译,从而起到转录后凋控靶基因的表达的作用。研究发现在成年大鼠脊髓挫伤(SCI)后,大量miRNAs在表达上发生了以前未知的变化,这些改变可分为3类:(1)损伤后增多,(2)损伤后减少,(3)在早期增多,在晚期逐渐减少。生物信息学分析表明,在SCI后改变的miRNAs的潜在靶点包括编码参与炎症、氧化和凋亡的基因,这些基因在脊髓损伤的发病机制中起着重要调控作用。研究表明miRNAs的异常表达可能与SCI的发病机制有关,是SCI后评估病情的标志以及治疗干预的潜在靶点。本文对MiRNAs在脊髓损伤中的可能作用进行总结。     

仙灵骨葆对兔膝骨性关节炎治疗作用的研究

[目的]研究仙灵骨葆(xianlinggubao, XLGB)对兔骨性关节炎关节软骨及软骨下骨的保护作用.[方法]30只3个月龄雄性日本大耳白兔,随机分为对照组(Sham)、盐水组(ACLT+NS)和仙灵骨葆组(ACLT+XLGB),每组各10只.盐水组和仙灵骨葆组行右膝关节前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transaction, ACLT)造成膝骨性关节炎模型.术后仙灵骨葆组125 mg/(kg*d)灌胃;盐水组则给予等剂量生理盐水.6周后处死动物,取股骨测量骨密度,之后脱钙制片,行HE染色、Mankin评分及BMP-2、MMP-13免疫组化染色;取右膝胫骨近端包埋,制成硬组织切片,用于骨组织形态计量学测量.[结果](1)Mankin评分:仙灵骨葆组显著低于盐水组.(2)股骨远端骨密度及胫骨近端软骨下骨骨量:仙灵骨葆组均显著高于盐水组.(3)免疫组化:仙灵骨葆组MMP-13的表达显著低于盐水组,BMP-2的表达显著高于盐水组.[结论]仙灵骨葆125 mg/(kg*d)灌胃能够部分阻止骨关节炎兔关节软骨的退变,其作用机制可能与下调MMP-13的表达,上调BMP-2的表达,同时增加软骨下骨骨量,改善其微观结构有关.     

罗哌卡因与布比卡因在分娩镇痛中的应用进展

随着分娩镇痛技术的不断发展,其应用也日益广泛,方法逐渐多样化,选择一种镇痛效果好而又对母婴无害的镇痛方法是产科和麻醉科医师共同的追求。硬膜外分娩镇痛是常用的分娩镇痛措施之一,安全性高、产妇感觉舒适,分娩镇痛效果理想。麻醉药物的选择以酰胺类局部麻醉药应用最多。布比卡因是酰胺类局部麻醉药物之一,有着镇痛时间长、镇痛作用明显等优点,但布比卡因是消旋体,     

克氏针表面涂有辛伐他汀聚乳酸涂层对卵巢切除大鼠股骨骨折愈合的影响

背景：前期研究已经证实口服应用辛伐他汀可以显著提高骨折愈合质量,加快骨折愈合的速度。目的：进一步验证克氏针表面涂有辛伐他汀聚乳酸涂层后对卵巢切除大鼠股骨骨折愈合的影响。方法：3月龄雌性SD大鼠40只,随机分为单纯骨折组、去势骨折组、涂层对照组及涂层治疗组,后3组大鼠行双侧卵巢切除制作骨质疏松模型,4周后所有大鼠行闭合性股骨中段骨折克氏针内固定。涂层对照组所用克氏针表面涂以聚乳酸,涂层治疗组克氏针表面涂以混有辛伐他汀（50μg/支）的聚乳酸,其余两组克氏针表面未经特殊处理。结果与结论：与涂层对照组相比,涂层治疗组在骨折后6周,X射线表现骨折线模糊,骨痂填满骨缺损,骨膜反应较深,X射线评分显著增高（P〈0.05）。组织病理学显示涂层治疗组骨痂内新生骨小梁数量较多,排列致密均匀;免疫组织化学染色骨形态发生蛋白2阳性细胞表达强烈,积分吸光度值显著高于涂层对照组（P〈0.05）,但血管内皮生长因子表达水平在骨折后6周时显著低于涂层对照组和模型组（P〈0.05）。提示混有辛伐他汀的聚乳酸涂层可以促进大鼠骨质疏松性股骨骨折的愈合。     

辛伐他汀通过p38MAPK信号通路诱导BMSCs成骨分化的研究

目的观察辛伐他汀(SIM)体外单独给药对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响。方法取第二代大鼠BMSCs随机分为4组,对照组(CM):完全培养基培养;诱导组(OM):成骨诱导培养基培养;辛伐他汀组(SIM):含终浓度为10-7mol/L的辛伐他汀的完全培养基培养;阻断剂组(SB+SIM):先用p38MAPK通路阻断剂SB203580干预30min后,加入等浓度辛伐他汀。给药4 h后,Western Blot检测p-p38MAPK、p38MAPK蛋白的表达。给药7d后,进行碱性磷酸酶(ALP)染色和比活性测定。给药7、14d后,采用Real-time PCR法检测ALP、Ι型胶原(COLΙ)、骨钙素(OCN)和Runt相关转录因子2(Runx2)m RNA的表达。结果 1Western Blot检测:OM组和SIM组p-p38MAPK表达水平显著高于CM组和SB+SIM组(P0.05)。2ALP比活性测定:OM组和SIM组显著高于CM组,与相比,SB+SIM组显著低于SIM组(P0.05)。3ALP染色:OM组和SIM组细胞胞浆内出现棕色颗粒,而SB+SIM组和CM组未见明显阳性染色颗粒。4Real-time PCR检测:在第7d、14d,OM组和SIM组ALP、COLΙ和Runx2 m RNA表达水平均显著高于CM组,SB+SIM组明显低于SIM组(P0.05);第7d,OM组OCN m RNA表达水平明显高于CM组(P0.05);在第14d,OM组和SIM组OCN m RNA表达水平高于CM组,SB+SIM组低于SIM组(P0.05)。结论辛伐他汀可以在缺乏成骨诱导成分的环境下,通过活化p38MAPK信号诱导大鼠BMSCs向成骨细胞分化。     

BMP2信号通路与经典Wnt信号通路及相互交联对成 骨分化的调控

在以间充质干细胞为代表的具有成骨分化潜能的细胞中,多条信号传导通路及其构成的动态调控网络参与调控其成骨分化过程。其中BMP2和经典Wnt信号通路在此过程中的作用日益受到关注。国内外研究表明,BMP2和经典Wnt信号通路在调控靶细胞成骨分化过程中伴有彼此通路中的关键分子的表达水平和功能活性的改变,并在一定条件下表现出对成骨分化特异性标志物的协同和拮抗调控。成骨增殖分化过程是一个动态过程,在成骨分化的不同阶段,分子通路的作用不同,相互之间的调节也动态变化的,研究BMP2和经典Wnt信号通路在成骨分化过程中的相互调节作用,对于指导治疗骨质疏松和骨折有重要的作用,本文就BMP2和经典Wnt信号通路对靶细胞成骨分化的调控作用以及在此过程中两条信号通路之间的交联作一简要综述。     

解聚复肾宁对糖尿病肾病患者的疗效观察

目的探讨解聚复肾宁(JJFSN)对DN患者血清CTGF和MMP-9的影响。方法研究对象为某院收治的120例早期2型DN患者,将其随机分为解聚复肾宁组、厄贝沙坦组、解聚复肾宁+厄贝沙坦组、对照组。每组各30例,12周为1疗程,观察各组治疗前后相关指标的变化。结果解聚复肾宁组治疗后空腹血糖、24 h尿微量白蛋白排泄率、血肌酐、糖化血红蛋白等指标显著好转,血清CTGF显著降低,MMP-9显著升高(P0.05)。结论解聚复肾宁可能是通过改善血清CTGF、MMP-9水平而影响细胞外基质代谢调控系统,延缓DN的进展。     

应力与椎间盘退变的相关性研究进展

椎间盘退变是一个多因素参与的过程。异常应力是导致椎间盘退变的重要因素之一。异常应力可以直接影响纤维环、髓核及终板的正常结构和生理代谢,也可间接影响椎间盘营养途径,使椎间盘细胞发生凋亡,细胞外基质丢失增多,分解代谢相关基因的表达增加,同时可使合成代谢相关基因表达下降,炎性反应增加,从而影响椎间盘的力学特性,加速椎间盘退变。因此研究各种负荷和应力(压缩、拉伸、扭转、弯曲和剪切力等)对椎间盘的影响有重要意义。     

降钙素对去卵巢大鼠椎间盘退变的影响

目的 探讨降钙素对去卵巢大鼠椎间盘退变的治疗作用及其作用机制.方法 选择3月龄健康1级大鼠(Sprague Dawley,SD)50只,随机分为5组,每组10只,Sham8组和Sham20组大鼠暴露卵巢但不切除.给予等剂量生理盐水皮下注射,分别于8、20周后脱颈处死取椎体.OVX8组和OVX20组手术切除卵巢后3 d...