乳腺癌转移抵制基因和CD44v6在声门上型喉癌中的表达及临床意义

目的：探讨乳腺癌转移抑制基因（BRMS1）蛋白和转移相关基因CD44v6蛋白在声门上型喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义。方法：免疫组织化学法检测70例手术切除的原发性声门上型喉癌组织（肿瘤组）和其相邻的癌旁喉黏膜组织（对照组）石蜡标本中BRMS1蛋白及CD44v6蛋白的表达,分析BRMS1蛋白及CD44v6蛋白的表达与患者年龄、性别、临床分期、病理分级、有无颈淋巴结转移以及预后的关系。结果：BRMS1在对照组中呈阳性表达,阳性表达率为85．7％（60／70）,在肿瘤组中不表达或低表达,阳性表达率为35．7％（25／70）,二者之间差异有统计学意义（P〈0．01）;CD44v6在大多数肿瘤组中呈阳性表达,阳性表达率为82．9％（58／70）,在对照组中不表达,二者之间的差异有统计学意义（P〈0．01）。BRMS1蛋白和CD44蛋白的表达在患者的性别、年龄方面比较,均差异无统计学意义（均P〉0．05）;而BRMS1蛋白与CD44蛋白的表达在肿瘤的病理分级、临床分期和颈淋巴结转移方面比较,均差异有统计学意义（均P〈0．01）;2种蛋白的表达呈负相关（r=-0．9042,P〈0．01）。Kaplan-Meier法计算,BRMS1蛋白阳性组患者与BRMS1蛋白阴性组患者的术后生存率比较,二者之间的差异无统计学意义（P〉0．05）;而CD44v6蛋白阳性组患者与CD44v6蛋白阴性组患者的术后生存率比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：BRMS1蛋白在声门上型喉癌组织中表达显著降低,CD44v6蛋白在声门上型喉癌组织中表达显著增高。BRMS1蛋白及CD44v6蛋白的异常表达与声门上型喉癌的病理分级、临床分期和颈部淋巴结转移密切相关。联合检测2种蛋白的表达对声门上型喉癌患者颈部淋巴结转移的判断有一定指导意义。     

喉白斑病74例临床及病理分析

目的：探讨喉白斑病的临床及病理特征,降低癌变率。方法：临床诊断并经病理证实的74例喉白斑病患者接受显微支撑喉镜下声带白斑切除术或声带白斑激光切除术,术后随访1～4年。结果：18例单纯白斑患者术后无一例复发;56例白斑伴不典型增生患者术后7例仍声嘶;3例复发,并相继进行2次或多次手术;3例癌变。结论：①手术是治疗喉白斑病的主要手段,且效果较好。②喉白斑病伴轻、中、重度非典型增生者都有较高的癌变率,需要引起高度重视,在早期病变时,如患者同意,也可适当扩大手术范围,以防复发或癌变。③手术后患者的密切随访至关重要。     

抗CCP抗体在类风湿性关节炎诊断中的应用

目的 评价抗环瓜氨酸肽抗体(CCP)的检测在诊断类风湿性关节炎中的临床意义,特别是对早期类风湿性关节炎的诊断价值.方法 用酶联免疫固相吸附试验(ELISA法)检测抗CCP,免疫比浊法检测RF,荧光免疫法检测AKA.结果 抗CCP对RA诊断的敏感性为51.2%,特异性为96%,对早期RA的敏感性为66.67%,特异性98%,AKA对早期RA的敏感性为41%特异性为86%,RF对早期RA的敏感性为24%.特异性为82%.结论 抗CCP抗体检测对RA诊断的特异性高于RF,敏感性低于RF,但在早期RA中敏感性高于RF,检测抗CCP抗体对RA的诊断及治疗具有重要意义,若联合检测AKA、抗CCP抗体及RF可提高对RA的诊断的敏感性及特异性.     

抗HBsAg人IgG表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达

目的 尝试将１株来源于人源性噬菌体抗体库的抗ＨＢｓＡｇ人Ｆａｂ,转换成完整的抗ＨＢｓＡｇ人ＩｇＧ。方法 采用重叠ＰＣＲ方法,在抗ＨＢｓＡｇ人Ｆａｂ和Ｖκ的ＶＨ基因的５’端接上人工合成的人κ链的前导序列,构建表达完整ＩｇＧ１的真核表达载体,转染ＧＨＯ（ＤＨＦＲ＾－）细胞,用ＥＬＩＳＡ、ＲＴ－ＰＣＲ和免疫印迹检测抗ＨＢｓＡｇ人ＩｇＧ的表达。通过ＤＨＦＲ／ＭＴＸ体系及金属离子诱导提高Ｉｇ表达。结果：获得     

人源抗体研制及应用进展

单克隆抗体(mAb)技术问世已25年,但由于人mAb制备的困难和鼠mAb的异源性,使mAb在人体内治疗方面的应用进展缓慢.近来由于人源化mAb研制的进展及突破,治疗用抗体的开发呈现了强烈的上升势头,在生物高技术领域中成为一个热点.目前mAb市场正以20%速度递增,预计2002年达11亿美元,占重组药物的9%.10年后市场上的治疗性mAb将从现在的几个增加到100个以上,预计销售额超过500亿美元.我国人源治疗性抗体的研制开发尚处于起步阶段,应当有所加强.     

人源抗丙型肝炎病毒噬菌体抗体库的构建及筛选

目的　构建人丙型肝炎病毒 (HCV)特异性噬菌体抗体库 ,制备人源抗HCV单克隆抗体 (mAb)。方法　用常规RT PCR法 ,直接从 5例丙型肝炎患者外周血混合淋巴细胞中 ,扩增抗体重链Fd基因和κ轻链基因 ,与噬菌体载体pComb3连接 ,构建噬菌体抗体Fab库。对抗体库进行 5轮吸附 -洗脱 -扩增的亲和选择后 ,以ELISA法鉴定抗HCV噬菌体抗体。结果　RT PCR可有效地扩增出Fd和κ基因 ,并以此构建成容量为 1 2× 10 7的噬菌体抗体库。经 5轮亲和选择可使特异性噬菌体抗体得到高度富集 ,抗HCV噬菌体抗体阳性克隆达 96 %。结论　抗HCV噬菌体抗体库的构建和人源抗HCVmAb的制备 ,为HCV感染的诊断、治疗和发病机制的研究提供有效的分子工具     

海水淹溺肺水肿兔血浆丙二醛和超氧化物歧化酶的变化研究

将海水灌入兔肺内,复制出海水淹溺肺水肿（ｐｕｌｍｏｎａｒｙｅｄｅｍａａｆｔｅｒｓｅａｗａｔｅｒｄｒｏｗｎｉｎｇ,ＰＥ－ＳＷＤ）的动物模型［１,２］。对其动脉血浆丙二醛（ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ,ＭＤＡ）和超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ,ＳＯＤ）两项指标进行定量分析和动态观察,研究这些指标在ＰＥ－ＳＷＤ发生发展中的变化规律,探讨其变化的原因和机理。１　材料与方法１－１　一般资料　实验动物为一级纯种新西兰兔１４只（由江苏省农科院动物实验中心提供）,雄性,体重为２－２４±…     

多价钩端螺旋体外膜疫苗的安全性及免疫效果研究

对国内首次研制的多价钩端螺旋体外膜疫苗接种人体安全性和免疫效果进行研究。 10 73名易感青少年随机接种钩端螺旋体三价 (含黄疸出血群赖型、七日热群七日热型、流感伤寒群流感伤寒型 )外膜疫苗、五价 (含黄疸出血群赖型、七日热群七日热型、流感伤寒群流感伤寒型、秋季热群秋季热型、犬群犬型 )外膜疫苗、菌体疫苗和安慰剂 ,分组进行全身和局部的反应观察 ,并以显微镜凝集试验测定各型抗体。结果显示各疫苗组局部和全身反应轻微。三价和五价外膜疫苗免后 1个月和 3个月抗体滴度高于同期相应菌体疫苗诱导的同型抗体滴度 ;且免后 3个月抗体阳转率也较高。提示外膜疫苗较菌体疫苗有更好的免疫原性。     

抗HBsAg人VH基因中异常序列对抗体活性影响的研究

目的:我们曾从噬菌体抗体库中克隆到一株VH第3骨架区中含有异常序列的抗HBsAg人Fab基因,本工作拟探讨该VH基因中异常序列对抗体活性的影响.方法:采用重叠PCR方法去除这段异常序列,构建表达载体,转化大肠杆菌表达出抗HBsAg噬菌体抗体和可溶性Fab,测定了它们与抗原的结合活性.结果:与原抗体比较,改造后的抗体与抗原的结合活性明显下降,分子模建提示这段异常序列对VH CDR_1和CDR_2的部分氨基酸残基的位置有一些影响,测定改造前Fab的亲和力约为0.55×10~9M~(-1),改造后Fab因抗原结合活性过低,无法检测其亲和力.结论:提示这段异常序列在体内就可能存在于该VH之中.     

高频喷射通气对海水淹溺肺水肿兔球结膜微循环和肺Na~ -K~ -ATP酶的影响

目的　观察高频喷射通气 (HFJV )治疗海水淹溺肺水肿 (PE- SWD)时兔球结膜微循环和肺 Na - K - ATP酶的变化 ,并探讨其变化机制。方法　向兔肺内灌入海水复制 PE- SWD动物模型。应用微循环显微镜和计算机图像分析系统 ,对不同处理两组兔球结膜微循环和肺毛细血管内皮细胞 Na -K - ATP酶进行自动检测和定量测量。结果　 HFJV组球结膜微循环的面积、灰度和吸光度八项参数比PE- SWD组明显恢复。肺毛细血管内皮细胞 Na - K - ATP酶活力在 HFJV组中亦较 PE- SWD组明显升高 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 )。结论　 HFJV可改善微循环和增加肺内 Na - K - ATP酶的活力 ,并与其有效地提高动脉血氧分压和纠正代谢性酸中毒密切相关。