表面修饰二氧化硅的脂质体对阿霉素的包埋与释放性质

背景：脂质体药物载体近年来被用以增加药物的稳定性,提高药效,降低药物的毒副作用。然而研究发现由于稳定性较差,脂质体药物载体难以实现药物缓释与长效给药。大量研究表明,二氧化硅无毒,具有化学惰性和生物相容性,是很好的修饰材料。 目的：为了提高脂质体药物载体的稳定性,延长给药时间,采用二氧化硅对脂质体进行表面修饰并用于抗癌药物盐酸阿霉素的包埋。 设计、时间及地点：体外观察实验,1：200705／2008—06存哈尔滨工业大学生物医学工程中心的纳米医药与生物传感器实验室完成。材料：L-α二棕榈酰磷酯酰胆碱购自南京康森特化工有限公司,正硅酸乙酯购自美国Aldrich公司,盐酸阿霉素购白北京华奉联博科技有限公司,葡聚糖凝胶G-50购自瑞典Amersham公司,其他化学试剂均为分析纯。 方法：通过溶胶凝胶沉积二氧化硅的方法修饰模板L-α二棕榈酰磷酯酰胆碱脂质体。主要观察指标：通过激光粒度仪与Zeta电位仪测定二氧化硅修饰后的脂质体粒径分布与表面电荷;通过透射电镜观察二氧化硅修饰后脂质体的形态;通过傅里叶变换红外光谱表征材料的化学结构;通过荧光光谱仪测定溶液中阿霉素浓度;通过阿霉素浓度回归方程计算脂质体药物包封率与脂质体体外释放速率。 结果：①成功制各了二氧化硅包裹修饰的脂质体。②傅里叶变换红外光谱结果显示在1166cm^-1,1080cm^-1,859cm^-1和526cm^-1存在Si-O-Si振动峰。③：氧化硅修饰的脂质体对阿霉素的包封率为724％。④药物体外释放结果移示二氧化硅包裹修饰的脂质体使阿霉素达到缓释效果。结论：由于在脂质体的表面形成纳米级厚度的无机Si-O-Si网络作为保护层,使得脂质体的稳定性显著提高,并且对阿霉素有缓释效果。     

大鼠胸主动脉损伤后基质金属蛋白酶组织抑制因子1,2的表达与血管内膜增生

背景：已有研究发现,基质金属蛋白酶及其组织特异性抑制因子通过影响血管平滑肌细胞迁移以及细胞外基质的代谢参与再狭窄过程。目的：观察基质金属蛋白酶组织抑制因子1,2在大鼠胸主动脉损伤后不同时间的表达情况。设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008-07在辽宁医学院动物实验中心完成。材料：选用SD雄性大鼠60只,按随机数字表法分为2组,单纯球囊损伤组及对照组各30只。方法：单纯球囊损伤组大鼠采用2FFogarty导管损伤胸主动脉;对照组行左颈总动脉结扎术,不插入2FFogarty导管。主要观察指标：2组于术后第1,3,7,10,14,28天分别处死5只大鼠,取完整的血管内膜,应用蛋白印迹法检测动脉损伤后不同时间点基质金属蛋白酶组织抑制因子1,2表达水平,并进行比较。结果：基质金属蛋白酶组织抑制因子1于大鼠动脉损伤后第1天开始表达增加,第7天达到高峰,第28天几乎无表达。基质金属蛋白酶组织抑制因子2于大鼠动脉损伤后第1,3天仅有较弱的表达,第7,10天表达明显增加,第14天达到高峰,第28天仍有较强表达。对照组中各时间点基质金属蛋白酶组织抑制因子1,2的表达均无明显变化（P〉0.01）。术后各时间点基质金属蛋白酶组织抑制因子1,2的表达水平单纯球囊损伤组均显著高于对照组（P〈0.01）。结论：大鼠胸主动脉球囊损伤后基质金属蛋白酶组织抑制因子1,2的表达均明显增加。     

坚忍链球菌致感染性心内膜炎1例

患者男,32岁,因高热2个月伴活动后发憋、气短,应用青霉素治疗无效而住我院.入院查体:T 38.5℃,Bp 125/62 mmHg,双肺呼吸音清,心率98次/min,主动脉瓣听诊区可闻及舒张期叹气样杂音.超声检查示:主动脉瓣赘生物形成,约1.4 cm×0.7 cm大小,主动脉瓣大量返流,LVEDD 6.5 cm,EF52％.     

体外循环手术后血浆PAF、ⅠL-8、ⅠFN-γ的变化与急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的相关性研究

目的：体外循环手术后测定血浆血小板激活因子（ PAF）、白细胞介素-8（ⅠL-8）、γ-干扰素（ⅠFN-γ）水平变化,分析血浆PAF、ⅠL-8、ⅠFN-γ水平与急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征关系。方法选择2006年12月份至2014年6月份应用体外循环手术治疗的156例患者作为观察对象,其中67例并发急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征,即观察组,另89例未发生急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征作为对照组。在术前、术后1d、3d及7d采用酶联免疫吸附测定法检测血浆中PAF、ⅠL-8及ⅠFN-γ浓度,并对结果进行统计学分析。结果观察组患者手术后血浆PAF、ⅠL-8和ⅠFN-γ浓度明显高于手术前（ P <0.05）;对照组患者手术前后各时段血浆PAF、ⅠL-8和ⅠFN-γ无明显波动（ P >0.05）;观察组血浆PAF、ⅠL-8和ⅠFN-γ浓度明显升高并在术后3 d时达最高值后逐渐下降,但术后各时间的浓度值均显著高于手术前（ P <0.05）;手术后同一时间点相比较,观察组血浆PAF、ⅠL-8和ⅠFN-γ水平显著高于对照组（ P <0.05）。结论体外循环手术后ALⅠ/ARDS患者血浆PAF、ⅠL-8和ⅠFN-γ变化显著,血浆PAF、ⅠL-8和ⅠFN-γ变化与ALⅠ/ARDS发生关系密切。     

个青皮总糖及总黄酮含量测定

目的对个青皮多糖及总黄酮含量进行测定。方法多糖采用水提醇沉法提取,硫酸-苯酚法显色,分光光度法进行含量测定;总黄酮采用回流提取法进行提取,分光光度法测定含量。结果个青皮多糖含量为4.99%,总黄酮含量为14.57%。结论本法简便、重现性好,可用于个青皮的质量控制。     

水泵试验台液压夹紧装置设计

从系统机构设计、夹紧力分析、液压系统设计和电气控制原理等方面,阐述了水泵试验台液压夹紧装置的设计构造过程.为了保证试验时不发生泄漏现象,在管道联接端面采用抠槽密封处理技术,并对液压夹紧力进行计算与分析,得出在6.4 MPa的压力下,液压夹紧力约为88.238 kN,液压缸提供的最小工作压力为17.563 MPa.现场试验结果表明:与传统法兰联接方式相比,在规定试验压力下,该夹紧装置无泄漏现象,联接端面水力损失减小约0.156%,自动化程度高,水泵出厂检测台数增加约1.5倍,大幅度改善了水泵出厂检测的效率.     

天麻舒心颗粒对自发性高血压大鼠血压及颈动脉重构的影响

目的探讨天麻舒心颗粒降压及改善颈动脉重构的疗效。方法50只自发性高血压大鼠（SHR）随机分成天麻舒心大、中、小剂量组及阳性对照组、模型对照组．10只Wistar大鼠为正常对照组,分别给予不同剂量的天麻舒心浸膏液、卡托普利片、蒸馏水。2周测量1次鼠尾动脉收缩压;3个月后,观察每组左颈总动脉内-中膜厚度（IMT）、腔径、IMT／腔径及血浆肾素活性（PRA）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）。结果给药12周后．与模型对照组比较,各给药组SHR左颈动脉IMT、PRA、AngⅡ均显著降低（P〈0．01或P〈0．001）。随着鼠龄的增加,天麻舒心各组血压虽有所上升．但上升的幅度明显低于模型对照组。结论天麻舒心颗粒治疗高血压病确实有效,而且能通过改善动脉重构,减轻甚至逆转高血压靶器官损害。     

奥硝唑联合盆腔操治疗慢性盆腔炎的有效性和安全性研究

目的探究奥硝唑联合盆腔操治疗慢性盆腔炎的有效性和安全性。方法选择2016年12月至2017年9月徐州医科大学附属连云港市第一人民医院诊治的86例慢性盆腔炎患者为研究对象,将其随机分为观察组和对照组,每组43例患者。观察组患者采用奥硝唑联合盆腔操治疗,对照组患者采用奥硝唑治疗,比较两组患者疗效、治疗前后VAS评分、血清炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)]水平和不良反应发生情况。结果观察组患者总有效率(93.1%)明显高于对照组患者(74.5%),其差异具有统计学意义(P0.05);两组患者治疗前后VAS评分显著改善,且观察组患者治疗后VAS评分明显低于对照组患者,其差异具有统计学意义(P0.05);两组患者治疗前后TNF-α、CRP、IL-6显著改善,且观察组患者治疗后上述指标显著低于对照组患者,其差异均具有统计学意义(均P0.05);两组患者不良反应(恶心、头晕、困倦及胃部不适)发生率比较,其差异无统计学意义(P0.05)。结论奥硝唑联合盆腔操治疗慢性盆腔炎效果确切,安全性高,值得在临床上推广应用。     

不同Miyazaki分级颈椎间盘内髓核细胞的生物学特性

目的 :比较不同Miyazaki分级颈椎间盘内髓核细胞生物学特性的差异,评估该分级系统反映颈椎间盘退变程度的可靠性与一致性。方法:收集我院2017年12月～2018年7月36例行颈前路手术患者术中切除的颈椎间盘髓核组织。患者男21例,女15例,年龄为41.2±4.5岁,手术节段为单节段27例,两节段9例。将收集到的45个髓核组织按照术前颈椎MRI T2像上的Miyazaki分级分为4组,依次为Ⅱ级(n=6),Ⅲ级(n=10),Ⅳ级(n=14),Ⅴ级(n=15)。组织切片后行甲苯胺蓝染色,观察髓核组织内细胞的密度以及分布情况。免疫组织化学染色和蛋白免疫印迹实验检测不同分级组织内聚集蛋白聚糖(Aggrecan)和Ⅱ型胶原蛋白(typeⅡcollagen,ColⅡ)的表达量。采用酶消化法分离不同分级髓核组织内的细胞并进行体外培养,光镜下观察髓核细胞的形态,台盼蓝染色测定各组髓核细胞的活性比率,CCK-8法绘制各组1代髓核细胞的生长曲线。结果:Ⅱ级组髓核组织内细胞密度显著高于Ⅲ级组,Ⅲ级组高于Ⅳ级组,Ⅴ级组的细胞密度最低。Aggrecan和ColⅡ在Ⅱ级组织中表达量最高,Ⅲ级组高于Ⅳ级组,Ⅴ级组中表达量最低,组间比较均有统计学差异(P0.05)。Ⅱ级组椎间盘内髓核细胞多呈三角形、短梭形,折光性较好;Ⅲ级组髓核细胞出现突起,轮廓不清晰;Ⅳ级组细胞形态多呈长梭形,细胞扁平且突起明显;Ⅴ级组髓核细胞形态各异,轮廓模糊,折光度差。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ级组的细胞活性比率分别为(94.8±2.8)%、(84.3±2.6)%、(75.1±4.8)%和(66.1±3.3)%,其中Ⅱ级组高于Ⅲ级组,Ⅳ级组低于Ⅲ级组,而Ⅴ级组最低,组间比较均有统计学差异(P0.05)。Ⅱ级组髓核细胞生长速率比Ⅲ级组快,Ⅲ级组比Ⅳ级组快,Ⅴ级组生长速率最低,组间比较均有统计学差异(P0.05)。结论:颈椎间盘Miyazaki分级系统可以较好地反映髓核细胞的生物学特性和颈椎间盘的退变程度,可作为临床治疗和诊断的重要参考。     

肝卵圆细胞对肝纤维化大鼠细胞外信号调节蛋白和丝裂原激活蛋白激酶的影响

目的 观察肝卵圆细胞(hepatic oval cell,HOC)对肝纤维化(hepatofibrosis,HF)大鼠肝组织中细胞外信号调节蛋白(extracellular regulated protein kinases,ERK)和丝裂原激活蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,P38MAPK)信号通路蛋白的影响.方法 SD大鼠以高脂低蛋白饲养、饮用10%乙醇,皮下注射40%CCl4,隔4 d注射一次,连续8周制备HF模型.HF大鼠采用胶原酶原位灌注法分离,percall纯化原代HOC.HOC悬液0.5 ml(1×109个细胞)经门静脉植入8周HF大鼠的肝脏内,分别于8、15、30d处死大鼠,HE和Masson染色观察HF病理组织学变化,Western blot 法检测肝组织ERK与P38MAPK信号通路蛋白的表达,同时检测ALB、FGF-3、c-kit、HNF-1α、PCNA表达.结果 病理组织学显示,HOC处理组大鼠HF被部分逆转,肝组织胶原纤维增生程度明显减轻,肝组织Ras、ERK、p-ERK、c-fos、c-jun、STAT3、ALB、FGF-3、PCNA蛋白表达显著下降(分别F=91.88,36.28,54.66,93.07,64.76,58.49,52.63,20.45,27.03,均P＜0.05),而HNF-α1和c-kit表达上调(分别F=18.63,25.99,均P＜0.05).结论 HOC抑制HF活化的ERK信号通路而改善肝纤维化程度,在HOC存在条件下p-P38并不激活c-fos、c-jun、STAT3、5表达,c-kit和HNF-1α表达增加,而肝组织结构损害程度明显减轻,肝纤维化程度明显改善.

Abstract：

Objective To observe the influence of hepatic oval cell (HOC) on the expression ERK and P38MAPK signaling pathway protein in liver tissue of murine experimental hepatofibrosis (HF).Method SD rats were fed with 10% ethanol and food with high-fat and low-protein, and were injected subcutaneously with carbontetrachloride once every four days for 8 weeks to establish hepatic fibrosis. HOGs were isolated from male HF rats by collagenase porfusion of the liver. HF rats at 8th week were transplanted with 0. 5 ml HOC suspension medium at a density of 1 × 109 cell /ml via portal vein, and the rats were sacrificed at 8th, 15th, 30th day respectively. Histopathologic changes of liver tissues were observed by HE and Masson. The expression of ERK and P38MAPK signaling pathway protein were determined by Western blotting. Result Hepatofibrosis was reversed and the degree of hyperplasia fibrilcollagen in hepatic fibrosis rats decreased significantly by HOC transplantion. HOC down-regulated the protein expression of Ras, ERK,p-ERK, c-fos, c-jun, STAT3, ALB, FGF-3, PCNA ( F = 91.88,36.28,54.66,93.07,64.76,58.49,52.63,20.45 ,27.03, all P ＜ 0.05 ), up-regulated the protein expression level of HNF-α1, PDGF-Rβ significantly in liver tissues(F = 18.63,25.99,P ＜0.05). Conclusions HOC improves the degree of hepatofibrosis through inhibiting hyperplasia of collagen fibril in liver tissue of hepatofibrosis rats. With the presence of HOC the expression of c-fos,c-jun,STAT3,5 was not activated by p-P38MAPK. The expression of c-kit and HNF-1α increased and that liver tissue injury alleviated, and hepatofibrosis was improved.