野生型p53基因导入诱导神经细胞凋亡

目的　观察野生型 p5 3基因诱导神经细胞凋亡的现象 ,探讨外源性 p5 3基因对神经细胞 p2 1、c-fos和 c-jun基因表达的影响。方法　构建了野生型 p5 3基因的重组线病毒载体 ,体外转染胚胎大鼠神经细胞 ,应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的切口末端标记技术原位检测细胞凋亡 ,以免疫组化法测定 P2 1 、c-Fos和 c-Jun蛋白表达水平。结果　外源性基因导入神经细胞后 ,P2 1、c-Fos和 c-Jun蛋白水平显著增高 ,d UTP切口末端标记阳性细胞百分率约为 4 0 %。结论　野生型 p5 3基因可诱导神经细胞凋亡和促进 p2 1、c-fos和 c-jun基因表达     

HPD-红光对离体培养人胃癌MGC80-3细胞DNA、RNA和蛋白质前体掺入的影响

测定了HPD光敏作用对MGC80-3细胞DNA、RNA、蛋白质合成的影响,5μg/ml HPD作用30分钟,红光照射50mw/cm~25分钟,在细胞数量和活力没有改变的情况下,3H-胸腺嘧啶核苷掺入量明显减少,2小时后逐渐恢复,10小时和24小时超过对照,48和72小时又行减少,同时活细胞数量减少。3H-尿嘧啶核苷和3H-亮氨酸掺入始终没有因光敏作用而下降,前者24小时后掺入量还明显高于对照。文章对结果进行了讨论。     

血清总胆固醇、总甘油、游离甘油和甘油三酯标准物质的研制

目的 研制与临床标本基质相似的血清总胆固醇(TC)、总甘油(TTG)、游离甘油(FG)和甘油三酯(TG)标准物质.方法 按国家标准物质技术规范的要求,制备4种血脂浓度的健康人新鲜混合血清,用酶法测定TC检测均匀性,用HPLC法检测稳定性并定值,评估不确定度.结果 4种血清均匀性检验数据方差分析P值分别为0.339、0.212、0.275、0.196(均＞0.05),说明均匀性良好;稳定性研究结果显示4种血清TC和TG在-20℃保存至少可稳定4年;4种血清的标准值和不确定度TC分别为(5.110±0.064)mmol/L、(4.761±0.062)mmol/L、(3.941±0.050)mmol/L和(3.158±0.041)mmol/L;TTG分别为(2.212±0.043)mmol/L、(1.679±0.033)mmol/L、(1.275±0.027)mmol/L和(1.067±0.023)mmol/L;FG分别为(0.142±0.005)mmol/L、(0.149±0.004)mmol/L、(0.146±0.003)mmol/L和(0.122±0.003)mmol/L;TG分别为(2.069±0.043)mmol/L、(1.530±0.033)mmol/L、(1.129±0.027)mmol/L和(0.945±0.023)mmol/L.结论 研制的血清总胆固醇、总甘油、游离甘油和甘油三酯标准物质均匀性和稳定性良好,定值可靠,已被国家质量监督检验检疫总局发布为国家一级标准物质(GBW 09145、GBW 09146、GBW 09147、GBW 09148).     

血清载脂蛋白参考值

目的调查健康中、老年人载脂蛋白（ａｐｏ）ＡＩ、ＡⅡ、Ｂ、ＣＩ、ＣⅡ、ＣⅢ、Ｅ及脂蛋白（ａ）［Ｌｐ（ａ）］的参考值，分析各项血脂与ａｐｏ之间的相关。方法严格选择生活水平一般的北京健康居民，男２２５人，女５８人，年龄３８～８３岁（大都在４５～７０岁间）。血脂测定用标准化方法，ａｐｏＡＩ、Ｂ参考血清的定值符合ＷＨＯ国际标准。除Ｌｐ（ａ）与ａｐｏＣＩ测定用ＥＬＩＳＡ法外，其他各项ａｐｏ分析均用免疫透射比浊法。结果统计得各项ａｐｏ的均数与百分位数分布并与国内外资料比较。相关分析显示Ｌｐ（ａ）与ａｐｏＣＩ是独立的变量，与年龄、体重及各项血脂均无明显相关。其他各项血脂与ａｐｏ指标可以分为３组，分别代表高密度、低密度与极低密度脂蛋白水平。分析了体重指数、甘油三酯与高密度脂蛋白的相互关系。结论ａｐｏＡＩ、Ｂ测定中采用了ＷＨＯ国际参考血清后结果比以往的报告有明显提高。其他ａｐｏ测定尚未开始标准化研究，但作者所列参考值大致与用同类方法所报告的数据近似。１４项血脂之间的相关分析，有助于研究有关代谢问题及临床上实验指标的合理选用     

同位素稀释质谱法在美国CDC-CRMLN计划中的比对结果分析

目的总结并回顾性分析同位素稀释质谱法在美国疾病预防控制中心(CDC)胆固醇参考方法实验室网络(CRMLN)中的比对结果,为我国血脂测定提供质量保证。方法采用我国建立的同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC/MS/MS)测定血清总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)的方法参加CRMLN比对。2016年之前每3个月1次,每次4种样品,测定2批。2016年之后每半年比对1次,每次4种样品,测定2批。每次测定中至少同时测定2个有证标准物质作为质控品。结果 15次TC比对结果显示,本血脂参考实验室(以下简称"本室")平均CV为0.43%,CDC各参加实验室间CV为0.42%,本室与实验室间总体均值的偏移为0.22%,与CDC靶值的偏移为0.58%。15次TG比对结果显示,本室平均CV为0.62%,本室测定TG的结果与实验室间均值的偏移为-0.98%,与CDC靶值的偏移为-0.80%。TC和TG各60个比对结果中,98%(59/60)的TC测定CV满足CDC的精密度要求,70%(42/60)的测定满足TC准确度要求(TC:CV≤1%,偏移≤1%);92%(55/60)的TG测定准确度满足CDC的要求(TG:偏移≤2.55%)。结论 ID-LC/MS/MS测定血清TC和TG的方法在CRMLN比对中数据良好,与CDC及各网络实验室测定结果一致,有望在我国血脂标准化中发挥重要作用并为参考测量比对计划提供经验和技术支持。     

血脂水平在长时期内的生物学变异

目的：探讨我国人血脂水平的长期个体内生物学变异情况。方法：在多年从事血脂标准化研究及参加国际血脂标准化计划基础上长期测定一相对稳定人群的血脂水平，分析其中23例1年多次及100例10-15年间每年1次血脂测定结果。结果：两组病例血脂水平的个体内总变异（包括生物学变异和分析变异）大致为，总胆固醇10％，甘油三酯28％，低密度脂蛋白胆固醇18％，高密度脂蛋白胆固醇16％。结论：血脂指标，尤其是甘油三酯有较大生物学变异，临床上判断血脂水平高低时需考虑到生物学变异的存在，并采取适当措施减小生物学变异。     

丹参红花提取物保护内皮细胞免受氧化损伤的体外实验

目的：观察低密度脂蛋白和无血清培养刺激下人脐静脉内皮细胞内活性氧、NOX4mRNA水平和细胞凋亡的变化，以及丹参红花提取物的干预作用。 方法：实验于2005-11／2006—05在卫生部老年医学重点实验室完成。取人新鲜脐带分离培养人脐静脉内皮细胞，分为：①正常对照组。②无血清培养组：用无血清培养基培养24h。③低密度脂蛋白处理组：以含有800mg／L低密度脂蛋白的培养基培养16h。④丹参红花提取物预处理组：用丹参红花提取物（商品名丹红滴注液，由陕西步长集团提供浓缩液，国药准字号Z 20026866／Z 20026867）预处理24h后加入800mg／L低密度脂蛋白继续培养16h或在无血清培养基中培养24h。以MTT法观察丹参红花提取物对人脐静脉内皮细胞生长的影响；应用反转录-聚合酶链反应检测NOX4mRNA水平；用流式细胞仪分析细胞凋亡率；并以DCFH-DA法检测细胞内活性氧生成量。 结果：①低密度脂蛋白处理组NOX4 mRNA表达、细胞内活性氧生成量和细胞凋亡为正常对照组的1.3倍，1.2倍和4倍。②无血清培养组NOX4 mRNA表达、细胞内活性氧生成量和细胞凋亡分别为正常对照组的1．4倍、1．6倍和3倍。③丹参红花提取物预处理组NOX4 mRNA表达、细胞内活性氧生成量和细胞凋亡分别为低密度脂蛋白处理组的0．4倍，0．5倍和0．2倍。④丹参红花提取物组NOX4 mRNA表达、细胞内活性氧生成量和细胞凋亡分别为无血清培养组的0．2倍、0．5倍和0．6倍。 结论：丹参红花提取物能够有效抑制高脂及缺血状态下NOX4 mRNA表达水平，从而抑制人脐静脉内皮细胞内活性氧的产生及细胞凋亡，对内皮细胞起到很好的保护作用。     

载脂蛋白A-Ⅳ基因36O位点与阿尔茨海默病和帕金森病的关系研究

目的　探讨载脂蛋白 A- (apolipoprotein A- ,Apo A- )基因 3 60位点多态性和血脂指标与阿尔茨海默病 (Alzheimer disease,AD)和帕金森病 (Parkinson disease,PD)的关系。方法　应用存在特异性引物的简便、直接的聚合酶链反应 (PCR)方法 ,检测具有临床诊断证据的 3 9例 AD患者 [(77.7± 8.1 )岁 ]、3 6例 PD患者[(74.8± 1 0 .0 )岁 ]和 2 0 8名健康人 [(5 4.3± 1 1 .2 )岁 ]Apo A- 基因 3 60位点 (Gln/His)的突变 ,同时应用常规临床化学方法检测上述人群的血清总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)和高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-C)水平。结果　在所有患者和健康人群中 ,均未发现 Apo A- 3 60 His等位基因携带者 ;两个病患组与对照组血清 TC和HDL-C水平差异无显著性 ,但病患组血清 TG水平却显著高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;PD组血清 TG水平显著高于 AD组 (P <0 .0 5 )。结论　此研究未发现 Apo A- 基因 3 60位点突变基因型携带者 ,故无法探讨其与 AD和PD的关系 ;血脂水平与 AD和 PD的关系有待扩大病例样本进一步研究     

北京市部分人群血压、血糖、血脂异常的知晓率、治疗率和达标率的调查

近年来,许多与生活方式有关的心血管病危险因素如高血压、血脂异常、糖尿病、吸烟、少活动、肥胖等都在增加,但由于国人对其危害和预防的认识不够,服药和治疗效果均不满意[1,2].我们调查分析了2002年1～12月在我院体检者对血压、血糖、血脂异常的知晓率、治疗率和达标率,旨在为临床心血管病防治提供参考,报告如下.     

丹参红花提取物保护内皮细胞免受氧化损伤的体外实验

目的:观察低密度脂蛋白和无血清培养刺激下人脐静脉内皮细胞内活性氧、NOX4mRNA水平和细胞凋亡的变化,以及丹参红花提取物的干预作用。方法:实验于2005-11/2006-05在卫生部老年医学重点实验室完成。取人新鲜脐带分离培养人脐静脉内皮细胞,分为:①正常对照组。②无血清培养组:用无血清培养基培养24h。③低密度脂蛋白处理组:以含有800mg/L低密度脂蛋白的培养基培养16h。④丹参红花提取物预处理组:用丹参红花提取物(商品名丹红滴注液,由陕西步长集团提供浓缩液,国药准字号Z20026866/Z20026867)预处理24h后加入800mg/L低密度脂蛋白继续培养16h或在无血清培养基中培养24h。以MTT法观察丹参红花提取物对人脐静脉内皮细胞生长的影响;应用反转录-聚合酶链反应检测NOX4mRNA水平;用流式细胞仪分析细胞凋亡率;并以DCFH-DA法检测细胞内活性氧生成量。结果:①低密度脂蛋白处理组NOX4mRNA表达、细胞内活性氧生成量和细胞凋亡为正常对照组的1.3倍,1.2倍和4倍。②无血清培养组NOX4mRNA表达、细胞内活性氧生成量和细胞凋亡分别为正常对照组的1.4倍、1.6倍和3倍。③丹参红花提取物预处理组NOX4mRNA表达、细胞内活性氧生成量和细胞凋亡分别为低密度脂蛋白处理组的0.4倍,0.5倍和0.2倍。④丹参红花提取物组NOX4mRNA表达、细胞内活性氧生成量和细胞凋亡分别为无血清培养组的0.2倍、0.5倍和0.6倍。结论:丹参红花提取物能够有效抑制高脂及缺血状态下NOX4mRNA表达水平,从而抑制人脐静脉内皮细胞内活性氧的产生及细胞凋亡,对内皮细胞起到很好的保护作用。