老化大鼠坐骨神经Fas与FasL的表达及纤维结构变化

为了观察老化对神经纤维组成和结构的影响以及对凋亡相关因子Fas及其配体FasL表达的影响,随机取3月龄(成年组)和24月龄(老年组)正常SD大鼠各16只进行以下实验:采用透射电镜(TEM)观察坐骨神经的超微结构变化;苏木精-伊红(HE)染色计数轴突数与Schwann细胞数的比例;免疫组织化学染色检测大鼠坐骨神经老化时Fas和FasL的表达变化。结果显示:透射电镜下可见老年大鼠坐骨神经轴突直径增加,轴突周围间隙扩大,多数髓鞘分离,部分板层结构排列紊乱、破坏甚至呈气球样变。老年组的轴突数与Schwann细胞数的比例较成年组变大(P<0.01)。两组动物坐骨神经的髓鞘与轴突均可见Fas和FasL免疫组化阳性染色,但老年组大鼠的Fas和Fasl表达量明显增多(P<0.05)。以上结果提示老化大鼠坐骨神经神经纤维的形态结构发生很大的变化,可能与凋亡相关基因产物Fas及其配体FasL的表达增加有关。     

体外原代培养大鼠胚胎脊髓神经细胞机械损伤后的凋亡与caspase-3的表达

为了研究体外培养大鼠胚胎脊髓神经细胞损伤前后的凋亡变化及caspase-3的表达情况,本实验建立了一个模拟脊髓横断损伤后脊髓组分-原代培养的脊髓神经细胞机械损伤模型,并用Hoechst33342/PI双染法检测脊髓神经细胞的凋亡变化,用免疫荧光染色方法检测caspase-3的表达。结果显示:(1)损伤前几乎未见凋亡的神经细胞,损伤后6 h凋亡细胞开始出现,损伤后12 h明显增多,1 d时达高峰,但损伤后3 d凋亡细胞开始呈明显下降的趋势,至损伤后7 d又开始增加,一直持续到损伤后14d;(2)相应时刻caspase-3表达趋势的改变与脊髓神经细胞凋亡趋势的变化基本相同;(3)经过caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO干预后,凋亡细胞的数量与caspase-3的表达均减少,并呈剂量依赖性。以上结果提示,机械损伤可以诱发体外培养的脊髓神经细胞凋亡,且此凋亡的发生可能与caspase-3的表达有关。     

轴索生长抑制因子DNA疫苗安全有效地防治大鼠缺血性脑中风

目的评估轴索生长抑制因子DNA疫苗(pcDNA3.1(+)-neurite growth inhibitors,pcDNA-NGIs)防治缺血性脑中风的安全性和有效性。方法肌肉注射pcDNA-NGIs后,采用改良实验性自身免疫性脑髓鞘炎记分系统、改良神经病严重程度记分和逃避作业评估神经系统炎症、感觉运动和认知缺陷;采用生物素右旋糖胺追踪皮质红核投射的新生轴索。结果pcDNA-NGIs免疫不会引起神经系统炎症和感觉运动缺陷;阻塞大脑中动脉之前或之后进行pcDNA-NGIs免疫可增加皮质红核投射的新生纤维数(P=0.018)并削弱缺血性脑中风的感觉运动缺陷(P=0.042)。结论pcDNA-NGIs免疫不会使健康大鼠产生神经炎症和神经病症状,但可促进中风大鼠的神经再生和感觉运动功能恢复。     

面神经损伤大鼠脑内移植绿色荧光蛋白转基因胎鼠神经干细胞的

背景：目前面神经损伤后的修复主要集中在外周神经干,但面神经损伤后会导致部分中枢运动神经元凋亡。现阶段关于干细胞植入面神经损伤大鼠脑后对面神经核团内凋亡神经元的影响相关报道甚少。 目的：观察大鼠面神经损伤后,脑内移植绿色荧光蛋白转基因胎鼠的神经干细胞的成活和迁移情况。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008-07/12在昆明医学院神经科学研究所完成。 材料：孕14~16 d的绿色荧光蛋白转基因蛋白小鼠1只,用于制备转基因神经干细胞。清洁级SD雄性大鼠24只,随机分为3组：面神经损伤转基因细胞组12只、面神经损伤细胞培养液组6只、面神经正常转基因细胞组6只。 方法：面神经损伤转基因细胞组、面神经损伤细胞培养液组大鼠建立面神经切断模型。造模后1周,行转基因神经干细胞立体定向移植,注射点为前囟后方11.30 mm、背侧9.00 mm、正中线位置。面神经损伤转基因细胞组、面神经正常转基因细胞组各注入10 μL转基因神经干细胞悬液(含5×106 个细胞),面神经损伤细胞培养液组注入10 μL神经干细胞培养液,4周后制作脑组织冰冻切片。 主要观察指标：荧光显微镜观察移植部位绿色荧光蛋白阳性神经干细胞的存活情况,及其向损伤侧面神经核团周围迁移的情况。 结果：①移植处：面神经损伤转基因细胞组、面神经正常转基因细胞组均可见数量不等的绿色荧光蛋白阳性细胞,其中部分绿色荧光蛋白阳性细胞位于血管内;面神经损伤细胞培养液组未见绿色荧光蛋白阳性细胞。②面神经核团周围：仅面神经损伤转基因细胞组可见数量不等的绿色荧光蛋白阳性细胞迁移于损伤侧面神经核团周围,而健侧面神经核周围未见绿色荧光蛋白阳性细胞;余2组双侧面神经核周围均未见绿色荧光蛋白阳性细胞。③移植处与面神经核团周围之间：未见绿色荧光蛋白阳性细胞相连。 结论：神经干细胞移植入面神经损伤大鼠脑内后,可以向损伤侧面神经核周围迁移。     

人胎脑神经生长因子4基因与质粒载体重组体的体外构建

BACKGROUND： Neurotrophin-4 （NT-4） can promote neuronal growth, development, differentiation, maturation, and survival. NT-4 can also improve recovery and regeneration of injured neurons, but cannot pass through the blood-brain barrier, which limits its activity in the central nervous system. Delivering NT-4 into the central nervous system v/a cells or vectors may have therapeutic benefit. OBJECTIVE： To construct a recombinant vector with a human embryonic brain-derived NT-4 gene and pEGFP-NI. DESIGN, TIME AND SETTING： Neural genetic engineering experiment. The study was performed at the Neuroscience Institute of Kunming Medical College between October 2007 and March 2008. MATERIALS： The pEGFP-N1 plasmid vector was provided by Kunming Institute of Zoology, Chinese Academy of Sciences; embryonic brain tissues were provided by the First Affiliated Hospital of Kunming Medical College. TRIzol RNA extraction Kit was purchased from Sigma （USA）, One Step RNA PCR Kit （AMV） etc. were from Takara （Dalian, China）. METHODS： Total RNA was extracted from human embryonic brain tissues using Trizol. The agarose gel electrophoresis showed two bands： 18 S and 28 S, which were essential subunits of total RNA. The human NT-4 DNA was obtained via RT-PCR and inserted into the pEGFP-N1 vector using ligation and transformation reaction. MAIN OUTCOME MEASURES： The sequencing results of the DNA in the recombinant of NT-4- pEGFP-NI. RESULTS： The NT-4-pEGFP-N1 vector was sequence-verified and showed the expected molecular weight. CONCLUSION： The recombinant of NT-4-pEGFP-N1 was constructed successfully in vitro.     

人神经生长因子β基因克隆及其真核表达载体的构建

神经生长因子(nerve growth factor,NGF)是神经营养因子家族中最早被发现,也是迄今为止研究得最为清楚的细胞生长因子.研究表明,NGF能够维持神经元的生长、发育、分化、存活.此外,NGF还参与神经损伤的再生与修复,促进受损神经元的修复和再生[1].然而,NGF属生物大分子,不能通过血脑屏障,限制了其应用.基因治疗是目前解决NGF给药途径问题最有希望的方案.本研究将克隆人NGF-β基因编码序列并构建其真核表达载体,为进一步应用其开展帕金森病(Parkinson's dis-ease,PD)的基因治疗研究奠定基础.     

常用中医外治疗法治疗急性踝关节扭伤有效性的网状meta分析

目的：应用网状Meta分析方法比较与评价常用的中医外治疗法治疗急性踝关节扭伤的临床疗效。方法：用计算机在中国知网(CNKI)、万方(WanFang)、维普(VIP)等网站数据库中检索并筛选关于中医外治疗法治疗急性踝关节扭伤的随机对照试验(Randomized controlled trial, RCT)的文献。将各数据库建库-2021年12月31日设为检索时限范围。将纳入的文献进行评估和筛选,提取有效资料。用Stata 16.0软件完成数据分析。结果：该研究纳入的RCT合计37个,所涉及急性踝关节扭伤患者共3573例,其中对照组、治疗组分别为1773例和1800例。在一般资料性别、年龄、病情等方面,各组间无显著不同。研究共涉及13种中医外治疗法。对于中医外治疗法治疗急性踝关节扭伤有效性的排序,排名前3位依次为中医手法+西医常规、针灸、针灸+拔罐。结论：中医外治疗法治疗急性踝关节扭伤方面疗效显著,在选用中医外治疗法治疗急性踝关节扭伤的有效性方面考虑,中医手法+西医常规疗效较好,但后续仍需要大样本量的设计科学、高质量的RCTs进一步佐证和说明。     

生物电磁波在中重度阻塞性睡眠呼吸暂停诊断中的应用

目的 初步判断生物电磁波在中重度阻塞性睡眠呼吸暂停（OSA）诊断中的应用价值。方法 选取2021年1—12月于广东省中医院经多导睡眠监测（PSG）确诊的中重度OSA患者85例作为试验组,选择同期120名来自社区和学校健康人群的健康者作为对照组。两组均进行生物电磁波检测,通过Logistic回归模型筛选独立风险因子,通过ROC曲线分析诊断灵敏度和特异度。结果 Logistic回归分析结果显示,OSA的风险因子是喉气管的冠状横截面S2(OR=2.882,P=0.005)。ROC分析结果显示,喉气管的冠状横截面S2诊断OSA的曲线下面积为0.666,诊断灵敏度为55.3%,特异度为74.2%,约登指数为0.295。结论 生物电磁波对OSA具有良好的诊断价值,经其喉气管数据分析显示,喉气管的冠状横截面S2有助于OSA患者的疾病初筛和普查。     

脑性瘫痪手的外科治疗——附22例报告

目的 探讨脑性瘫痪手的外科治疗。方法 选用1994年1月-2000年3月收治的脑瘫、掌指、指间关节屈曲畸形，行屈指浅肌腱(远端)、屈指深肌腱(近端)切断，交叉吻合术。结果 经平均2．5年随访，优4例，良13例，差2例，优良率89％。结论 采用屈指浅、深肌腱切断，交叉吻合并根据手部、前臂伴随的其它畸形而采用相应术式治疗本病，方法简单，解剖合理，效果良好。     

持续冲洗法预防封闭式负压引流导管堵塞的观察

目的:观察输液泵在封闭式负压引流术预防导管阻塞的应用效果。方法:将80例应用负压引流治疗的患者随机分为泵入组和普通组,泵入组45例,采用输液泵持续冲洗预防导管阻塞,普通组行传统的导管冲洗法。结果:泵入组导管阻塞率低于普通组(P<0.05)。结论:应用输液泵进行持续冲洗,能够降低负压引流导管阻塞率的发生。