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目的:克隆人IL- 3基因cDNA ,构建真核表达质粒并转导脐带血造血干细胞(HSC) ,探讨IL -3在HSC中的表达情况,从而为脐血HSC扩增及移植奠定基础。方法:从人外周血单个核细胞中提取IL -3mRNA ,用逆转录 聚合酶链反应(RT- PCR)扩增IL -3cDNA ,通过T/A克隆法,构建真核表达型载体pcDNA3/IL- 3。将pcDNA3/IL -3质粒转导脐血HSC ,并于1~7d检测IL- 3表达情况。结果:pcDNA3/IL -3重组质粒的插入基因与I-L 3基因序列相同;pcDNA3/IL- 3转导脐血HSC后,经检测能够有效表达。结论:成功克隆了hIL- 3基因cDNA并构建了重组质粒pcD -NA3/IL- 3,该质粒转导脐血HSC后,能在短期内有效表达。 相似文献
353.
短程免疫法制备高效价抗血清研究 总被引:9,自引:0,他引:9
目的:探索快速制备免疫血清的方法和效果。方法:采用短程免疫法,分别以伤寒沙门菌O抗原和卵黄抗原分组小剂量连续多次免疫家兔后,收集抗血清,用ELISA间接法测定抗体效价。结果:ELISA结果显示伤寒沙门菌O抗原和卵黄抗原抗血清最终分别达到1∶20 480和1∶10 240的高效价。结论:短程免疫法所制备抗血清效价高,亲和力强。 相似文献
354.