SphK1与食管癌侵袭和转移的关系

目的 探讨鞘氨醇激酶1(SphKl)通路在食管癌侵袭和转移中的作用及临床意义。方法 采用Real-time PCR和Western blot检测SphKl在食管癌组织中的表达,设计构建SphKl靶向shRNA质粒,建立SphKl稳定沉默的细胞系。MTT和Transwell法检测SphKl基因沉默对EC-1细胞增殖、侵袭的影响,明胶酶谱检测其对基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和MMP-2分泌的影响。结果 SphKl的mRNA和蛋白质表达水平与侵袭能力明显相关。SphKl-siRNA能显著抑制EC-1细胞的增殖和侵袭,并能显著抑制EC-1细胞的MMP-9和MMP-2蛋白分泌。结论 SphKl与食管癌侵袭和转移关系密切,转染靶向SphKl基因的siRNA序列能够抑制食管癌EC-1细胞的增殖和侵袭,其机制与抑制MMP-9和MMP-2蛋白分泌密切相关。     

Bmi-1在食管鳞癌细胞株EC9706中的表达及初步功能研究

Background and Objective:Previous studies have shown that Bmi-1 is overexpressed in a variety of tumors,suggesting that Bmi-1 plays an important role in tumorigenesis.In this study,we investigated the effect of Bim-1 siRNA on cell proliferation,cell cycle,cell apoptosis and migration of human esophageal carcinoma EC9706 cells,and explored its potential mechanisms.Methods:Bmi-1 small interfering RNA(siRNA) was transferred into EC9706 cells.Then,cell proliferation was measured using cell counting kit-8(CCK-8)...     

颅内胶质瘤组织中OPN和Rac1的表达与患者生存期的相关性

目的 检测颅内胶质瘤组织中OPN和Rac1表达,并探讨二者水平与患者生存期的相关性.方法 以行胶质瘤切除术的60例颅内胶质瘤患者为胶质瘤组,另随机选择同期65例行颅内减压术的非恶性肿瘤患者为正常对照组.采用人ELISA试剂盒对2组研究对象组织中OPN和Rac1的表达水平进行检测,并分析瘤组织中OPN和Rac1表达与患者...     

具有线粒体靶向功能的载去甲斑蝥素TPP-PEG-PCL纳米胶束促肝肿瘤细胞凋亡研究

目的制备去甲斑蝥素(3-丙羧基)三苯基溴化膦(TPP)-聚乙二醇-b-聚己内脂(PEG-PCL)纳米胶束,研究其体外释放、细胞内转运及促肝肿瘤细胞凋亡作用。方法采用薄膜水化法制备去甲斑蝥素TPP-PEG-PCL纳米胶束,测定粒径、Zeta电位及显微电镜形态分析,同时对胶束进行稳定性、体外释放、药代动力学和临界胶束浓度测定;以香豆素-6作为荧光探针,评价TPP-PEG-PCL纳米胶束在肝肿瘤细胞内的摄取、溶酶体逃逸及线粒体靶向功能;采用给药剂量等同条件下,评价去甲斑蝥素TPP-PEG-PCL纳米胶束促肝肿瘤细胞凋亡效果。结果去甲斑蝥素TPP-PEG-PCL纳米胶束粒径为(16.8±0.2)nm,Zeta电位为(14.3±0.2)m V,透射电镜图片该纳米胶束呈规则圆球型;荧光试验结果显示,TPP-PEG-PCL纳米胶束可以促进药物的细胞摄取、逃逸溶酶体的捕获,最终靶向聚集在线粒体部位;细胞存活率和Hoechst染色结果显示去甲斑蝥素TPP-PEG-PCL纳米胶束具有很好的促肝肿瘤细胞凋亡作用,去甲斑蝥素TPP-PEG-PCL纳米胶束可以明显降低线粒体膜电位、提高细胞内活性氧(ROS)水平...     

姜黄素抑制耐紫杉醇食管癌细胞的上皮间质转化作用及机制探讨

目的 建立耐紫杉醇食管癌(EC)细胞系EC9706/PTX,观察姜黄素对EC9706/PTX细胞上皮间质转化(EMT)的抑制作用并探讨其机制,为耐药EC的治疗提供理论依据.方法 用中等浓度间歇作用法建立耐紫杉醇EC细胞EC9706/PTX,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞耐药指数及交叉耐药性,检测不同浓度姜黄素对EC9706/PTX细胞增殖的抑制.使用细胞骨架染色、划痕实验、Transwell侵袭实验检测姜黄素对EC9706/PTX细胞形态变化、迁移和侵袭能力的影响.荧光定量PCR及蛋白免疫印迹(Western blot)检测姜黄素对EC9706/PTX细胞中EMT相关分子标志物E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白、纤维连接蛋白在mRNA和蛋白水平的表达影响.Western blot检测姜黄素对EC9706/PTX细胞中转录因子NF-κB p65及Snail在蛋白水平的表达影响.结果 EC9706/PTX对紫杉醇的耐药指数为28.4,对顺铂、阿霉素产生交叉耐药性,姜黄素能够抑制EC9706/PTX细胞的增殖.在20 μmol/L浓度的姜黄素作用下,EC9706/PTX细胞的迁移和侵袭能力明显降低.荧光定量PCR及West-ern blot检测显示,细胞耐药后E-钙黏蛋白的表达明显下调,而N-钙黏蛋白表达则明显上调,姜黄素逆转了这一现象.Westernblot检测提示,EC细胞发生耐药及EMT后,NF-κB p65及Snail蛋白的表达增强,姜黄素阻断了这一作用.结论 姜黄素能够抑制紫杉醇耐药EC细胞的增殖并且能够逆转紫杉醇耐药EC细胞的EMT现象,其机制可能是通过抑制NF-κB-Snail信号通路实现的.     

RNAi沉默 N-cadherin 表达对 EC9706细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的: 探讨RNAi沉默 N-cadherin 表达对人食管鳞状细胞癌EC9706细胞体内生物学行为的影响。方法: 通过逆转录病毒介导的RNAi技术将 N-cadherin 基因的RNA干扰载体pMSCVneo/N-cadherin质粒及对照质粒pEGFP-MSCVneo质粒分别转染至人食管癌细胞系EC9706,运用G418进行抗性克隆的筛选和扩增,进而得到稳定转染的人食管癌细胞系EC9706(分别命名为干扰载体组和空载体组),将正常对照组、空载体组和干扰载体组EC9706细胞通过皮下注射的方式接种于裸鼠背部肩胛区,比较各组裸鼠成瘤期、成瘤大小、瘤体终重量及终体积等情况。运用免疫组织化学方法和Western blotting方法检测3组裸鼠移植瘤组织中E-cadherin、N-cadherin和MMP-9蛋白的表达情况。TUNEL法检测3组裸鼠移植瘤组织中细胞的凋亡水平。结果: (1)与正常对照组和空载体组相比较,干扰载体组裸鼠移植瘤的生长速率、成瘤大小、瘤体终重量和终体积明显降低(P<0.05)。(2)与正常对照组和空载体组相比,干扰载体组裸鼠移植瘤组织中N-cadherin和MMP-9的蛋白表达均下调(P<0.05),而E-cadherin的蛋白表达则无明显变化(P>0.05)。(3)与正常对照组(51.55±4.68)和空载体组(54.17±5.26)相比,干扰载体组(106.81±6.47)裸鼠移植瘤组织中凋亡的阳性细胞数明显增加(P<0.05)。结论: RNAi沉默 N-cadherin 表达可明显抑制EC9706细胞裸鼠体内移植瘤的生长,其作用机制可能是通过下调MMP-9的表达,降低细胞对细胞外基质的降解能力,进而降低EC9706细胞的体内侵袭力。RNAi沉默 N-cadherin 表达具有体内抑制食管鳞状细胞癌细胞生长的作用。N-cadherin可望成为抗食管鳞状细胞癌治疗的潜在分子靶点。     

草酸铂联合氟尿嘧啶和甲酰四氢叶酸治疗晚期大肠癌

结肠癌是十大常见恶性肿瘤之一 ,近几年随着我国经济的发展及生活方式的改变 ,其发病率有上升的趋势。在我国城市地区恶性肿瘤发病率中排第四位 ,发病率北京地区16 .1/10万 ,占 9.1% [1] ,目前手术仍为其主要的治疗手段 ,在所有新诊断的患者中约 5 0 %由于局部进展和 /或远处转移往往失去手术治疗机会。晚期大肠癌预后差 ,复发、转移后化疗效果不理想 ,多年来 ,氟尿嘧啶 (5 -FU)一直是治疗大肠癌的首选药 ,联合甲酰四氢叶酸 (LV)被认为是治疗大肠癌的标准方案 ,有效率约 2 8% [2 ] 。草酸铂 (L -OHP)是继顺铂、卡铂类化合物后的第三代铂…     

伊立替康联合奈达铂二线治疗晚期食管鳞癌24例

目的:观察伊立替康(CPT-11)联合奈达铂(NDP)二线治疗晚期食管鳞癌的疗效及不良反应.方法:依照开放原则,24例经组织学证实的食管鳞状细胞癌患者一线化疗疾病进展(PD)者,按CPT-11 65 mg/m2在第1-8天1h内静脉输注,然后NDP 80 mg/m2第12 h内静脉输注,21 d为1周期.每化疗2周期后按RECIST标准评价疗效,每1周期后根据CTCAE3.0进行不良反应分级.所有患者随访24 mo,结果采3用KaplanMeier进行生存分析.结果:24例均可评价疗效,完全缓解(CR)1例(4%),部分缓解(PR)5例(21%),稳定(SD)7例(29%),PD 11例(46%),有效率25%(CR+PR),疾病控制率54%(CR+PR+SD);中位生存时间(OS)248.5 d(95%CI:159-563 d),中位至疾病进展时间(TTP)131 d(95%CI:45-382 d).3级血液学毒性:贫血1例(4%),中性粒细胞减少4例(17%),白细胞减少5例(21%),血小板减少1例(4%).仅有1例4级中性粒细胞减少,研究中未观察到3-4级非血液学毒性,无治疗相关性死亡.结论:伊立替康联合奈达铂二线治疗晚期食管鳞癌的近期疗效显著,不良反应轻,耐受性好.     

大肠癌组织c-Met和VEGF表达及其与微血管密度关系的初步研究

目的:探讨大肠癌组织c-Met和血管内皮生长因子(VEGF)的表达以及两者与肿瘤血管生成的关系及其临床病理学意义。方法:选取经病理确诊的51例大肠腺癌手术切除组织标本,免疫组化SP法检测c-Met和VEGF的表达及微血管密度(MVD)。结果:大肠癌组织中c-Met和VEGF的阳性表达率分别为72.55%(37/51)和52.94%(27/51);与Dukes分期密切相关,P<0.05。大肠癌组织c-Met、VEGF均为阳性时MVD值为37.94±7.53,单一阳性时分别为30.67±1.45和23.82±7.45,均为阴性时MVD值最小,为13.64±5.33。大肠癌组织中c-Met和VEGF的表达呈显著正相关,rs=0.614,P<0.05。结论:c-Met和VEGF在大肠癌发生、发展和转移过程中起重要作用,并与肿瘤血管生成相关。     

TP方案治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察

紫杉醇(商品名为特素，由海南轻骑海药股份有限公司生产，Paclitaxel，TAX)是一种新型抗癌药，在非小细胞肺癌(NSCLC)治疗中单药有效率达21％～24％。我院以TAX DDP(TP)治疗NSCLC27例，观察临床疗效和毒性反应。现将结果分析报告如下：