MEK/ERK信号通路在环磷酰胺诱导的白细胞减少症模型大鼠造血功能中的作用研究

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶激酶/细胞外信号调节激酶(MEK/ERK)信号通路在环磷酰胺诱导的白细胞减少症模型大鼠造血功能中的作用。方法采用随机数字表法将60只SD大鼠分为ARRY-162组、模型组和空白对照组。ARRY-162组和模型组连续3 d腹腔注射环磷酰胺30 mg/(kg·d)造模,对照组注射等体积生理盐水。自造模当天起,ARRY-162组给予ARRY-1623 mg/(kg·d)尾静脉注射,模型组和对照组给予生理盐水尾静脉注射处理。连续干预7 d,采用全自动分析仪分析外周血白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)、网织红细胞(REC)数量,苏木素-伊红(HE)染色观察骨髓组织病理改变,流式细胞仪检测骨髓细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹分析Bax、Bcl-2、MEK1/2、ERK1/2蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠外周血WBC、RBC、PLT数量及REC比率均显著减少,差异有统计学意义(P0.05);骨髓组织增生程度低,造血细胞减少,现大量脂肪组织增生,造血组织结构被破坏;骨髓细胞凋亡率明显升高(P0.05);骨髓组织Bcl-2蛋白水平显著降低,Bax、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白水平明显增高(P0.05)。与模型组比较,ARRY-162组大鼠外周血WBC、RBC、PLT数量及REC比率均明显增多(P0.05);骨髓细胞凋亡率明显降低(P0.05);骨髓组织增生明显好转,组织损伤程度减轻;骨髓组织Bcl-2蛋白水平显著升高,Bax、p-MEK1/2、pERK1/2蛋白水平明显降低(P0.05)。结论 MEK/ERK信号通路在环磷酰胺诱导的白细胞减少症大鼠的造血功能下降中具有重要作用,MEK抑制剂ARRY-162可有效改善白细胞减少症大鼠的造血功能。     

RT-PCR检测早幼粒细胞白血病PML-RARa融合基因及其意义

用筑巢式逆转录酶／聚合酶链反应（RT－PCR）方法，对16例早幼粒细胞白血病（AML－M3）患者进行了PML－RARa融合基因的检测，所有患者标本均为阳性，1例呈正常核型也检出阳性扩增带，14例经全反式维甲酸（ATRA）诱导缓解时，10例仍可以检测到融合基因的表达，经过两个疗程的化疗巩固强化后，其中7例转阴，而3例融合基因持缓阳性的患者均在半年内复发，PCR阴性者始终处于完全缓解（CR）中。结果表明，RT－PCR检测ML－RARa基因在AML－M3的诊断、疗效评价及微小残留病（MRD）监测中是一种有力的手段，同时也证明了ATRA治疗AML－Ma的高效性及CR后加用化疗巩固强化的必要性。     

筑巢式PCR检测白血病bcr—ablmRNA

应用筑巢式逆转录酶聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）方法检测了２６例慢性粒细胞性白血病及１０例急性淋巴细胞白血病患者的ｂｃｒａｂｌｍＲＮＡ，在２１例ｐｈ阳性的慢粒和２例ｐｈ阳性的急淋患者中，检出两种ｂｃｒａｂｌ融合基因ｍＲＮＡ（１６５ｂｐ或９０ｂｐ），５例ｐｈ阴性的慢粒中，４例阳性，１例阴性，经治疗后ｐｈ染色体消失，ＲＴＰＣＲ仍能检出ｂｃｒａｂｌ融合基因。本方法具有高度敏感性，可从１０６个正常细胞ＲＮＡ中检出１个白血病细胞。是对慢粒和部分急淋的诊断及监测的一种快速、灵敏、特异的方法     

紫杉醇mPEG-PLGA纳米粒的制备及其抗肿瘤作用研究

目的 探讨负载紫杉醇的聚乙二醇单甲醚-聚乳酸-乙醇酸(mPEG-PLGA)亲性嵌段共聚物纳米粒及其对肝癌H22细胞的体内抗肿瘤作用.方法 采用界面沉积法制备紫杉醇mPEG-PLGA纳米粒(Ptx-Nps);应用透射电镜表征纳米粒的形态;粒径分析仪测其粒径及Zeta电位;研究mPEG在共聚物中的含量及紫杉醇投药量对纳米粒的影响;考察纳米粒对昆明小鼠肝癌H22的疗效和过敏实验.结果 Ptx-Nps成球型,粒径为纳米级(＜120 nm),均带负电荷(适合于静脉注射),与紫杉醇注射液(Ptx)相比,Ptx-Nps对肝癌H22的抑制作用比Ptx好.结论 采用界面沉积法制备的纳米粒在紫杉醇投药量为1%,mPEG含量为4%时包封率最佳,本研究为开发紫杉醇新型静脉注射制剂提供了实验依据,mPEG-PLGA共聚物可成为抗肿瘤药物的理想新型载体.     

CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白在丹参酮ⅡA诱导急性早幼粒细胞白血病细胞分化中的作用

 目的　探索CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）在丹参酮ⅡA（TanⅡA）诱导急性早幼粒细胞白血病（APL）细胞分化中的作用。方法　反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blot测定TanⅡA干预的NB4细胞的CHOP表达,通过形态学和膜表面标志检测APL细胞的分化,RNA干扰抑制CHOP表达。结果　TanⅡA诱导APL分化过程中伴有CHOP蛋白表达（1.933±0.987）和mRNA表达（1.587±0.815）的增加,相对于对照组蛋白和mRNA表达（0.537±0.110和0.713±0.090）,差异有统计学意义（mRNA水平F＝52.256,P＜0.01;蛋白水平F＝114.852,P＜0.01）;TanⅡA联合RNA干扰抑制CHOP的表达能更加有效的提高APL的分化[（50.767±1.241）% 与（16.167±2.122）%]（F＝989.431,P＜0.05）和凋亡[（89.233±5.581）%与（27.433±2.957）%]（F＝308.961,P＜0.05）。结论　CHOP在TanⅡA诱导APL分化过程中起着负向调节作用,抑制CHOP表达联合TanⅡA可能成为一个更好的治疗策略。     

31例异基因造血干细胞移植患者疗效观察

目的:观察异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病的临床疗效.方法:选取住院接受异基因移植患者31例,采用改良马利兰/环磷酰胺(Bu/Cy)方案预处理,对移植后造血重建、移植物抗宿主病(GVHD)及生存率进行分析.结果:31例患者全部植活,100％获造血重建,GVHD发生率为19.4％,移植后100 d内移植相关死亡率为3....