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82.
目的探讨脂质体法转染Raf激酶抑制蛋白(RKIP)基因对宫颈癌细胞增殖的影响及RKIP在宫颈癌转移中的作用。方法应用脂质体法,将含有人RKIP基因的反义质粒asRKIP及空白质粒pcDNA3.1(-)分别转染宫颈癌Caski细胞,采用G418筛选出稳定转染的宫颈癌Caski细胞。空白质粒转染后Caski细胞即空白对照细胞命名为Caski-(-),asRKIP转染后Caski细胞分为平行的两组分别命名为Caski-asRKIP#1细胞和Caski-asRKIP#2细胞,应用Western Blotting方法检测各种Caski细胞中RKIP蛋白的表达,建立RKIP表达下调的宫颈癌细胞系(转染细胞系及对照细胞系);采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、软琼脂集落形成实验和Transwell小室实验检测RKIP表达下调对宫颈癌细胞增殖的影响。结果成功建立了RKIP表达下调的Caski宫颈癌细胞系。Caski-asRKIP#1细胞和Caski-asRKIP#2细胞中RKIP的表达水平明显低于Caski-(-)细胞和Caski细胞,Cas-ki-asRKIP#1和Caski-asRKIP#2细胞的增殖速度比Caski-(-)细胞和Caski细胞快,差异有显著性(t=4.98~6.43,P<0.05);而Caski细胞和Caski-(-)细胞的增殖速度无明显差异(t=1.36,P>0.05)。各组Caski细胞均可以在双层琼脂中增殖形成细胞集落,Caski-asRKIP#1细胞和Caski-asRKIP#2细胞与Caski-(-)细胞、Caski细胞比较,形成的集落大且数目多,差异有统计学意义(F=19.98,P<0.05);Caski-(-)细胞与Caski细胞集落数目比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RKIP表达下调可能对宫颈癌细胞的增殖具有一定的促进作用。 相似文献
83.
患儿男,5岁3个月,因"反复呼吸道感染5年,水肿4年"为主诉,外院疑诊X连锁无丙种球蛋白血症,要求查Btk基因缺陷于2012年02月20日收入我院。患儿自婴幼儿期开始反复出现呼吸道感染,约7~8次/年,药物治疗后好转顺利,无重症感染病史。1岁左右开始出现双眼睑、双手、外阴部非对称性非凹陷性水肿,缓慢加重。曾因缺钙肌注维生素D3治疗2次。平素大便较稀,约3~10次/d。 相似文献
84.
目的:研究丙戊酸钠(Sodium Valproate,VPA)作为组蛋白脱乙酰酶抑制剂对肺癌A549细胞MICA蛋白的影响,并探讨丙戊酸钠在人外周血γδT细胞对肺癌A549细胞免疫中的作用.方法:用Ficoll密度梯度离心法分离健康人外周血单核细胞(PBMC),用流式细胞仪分选纯化γδT细胞,用IL-2及唑来磷酸刺激γδT细胞扩增.用不同浓度的丙戊酸钠处理肺癌A549细胞,培养24小时后用PCR及Western blot检测MICA的变化.将分离纯化的γδT细胞与处于对数期生长的肺癌A549细胞混合培养,并加入VPA、MICA抗体处理,24小时后用LDH法检测γδT细胞的细胞毒性.结果:加入VPA后,PCR及Western blot结果显示肺癌A549细胞MICA蛋白在转录及表达上均增强;分离纯化的γδT细胞经体外扩增后,对肺癌A549细胞有较强的细胞毒性作用;加入VPA后γδT细胞对肺癌A549细胞的细胞毒性作用较未加入组增强(P<0.05).结论:体外扩增的γδT细胞对肺癌A549细胞产生较强的细胞毒性杀伤作用;组蛋白脱乙酰酶抑制剂-丙戊酸钠可上调A549细胞MICA的表达,并增强γδT细胞对肺癌A549细胞的杀伤作用. 相似文献
85.
目的:利用RNAi表达载体法构建并筛选携带针对CD3ζ基因的pSUPER retro RNAi逆转录病毒载体及稳定产毒的细胞克隆。方法:利用DNA重组技术,设计3条60 bp能转录产生靶向CD3ζ小发卡RNA(shRNA)的寡核苷酸序列,以pSUPER.retro.neo+gfp质粒作为空载体经限制性核酸内切酶酶切后与RNAi序列进行重组,构建CD3ζ-pSUPER retroRNAi逆转录病毒载体,脂质体法转染包装细胞系PA317,建立产生逆转录病毒的细胞克隆。结果:重组载体经限制性核酸内切酶酶切、PCR和测序鉴定表明CD3ζ-pSUPER retroRNAi重组质粒构建成功;脂质体法将重组载体转染包装细胞系PA317,表达绿色荧光蛋白,表明包装成功。结论:成功地构建了特异性沉默CD3ζ基因的pSUPER retroRNAi逆转录病毒载体及稳定产毒的细胞系,为后续研究CD59与CD3ζ在T细胞内信号转导的相互作用提供理论和实验依据。 相似文献
86.
近年来,中学校园自杀事件时有发生,给学校师生带来严重的负面影响,故制定校园自杀预防及危机干预方案刻不容缓。本文参照姚月红提出的青少年危机干预体系与日本自杀预防三阶段,试阐述自杀预防与危机干预实施方案的要点事项,构筑自杀教育性防治、干预性防治与巩固性防治三重防线,以减少校园自杀事件的发生概率及降低校园自杀事件发生后所带来的伤害。 相似文献
87.
目的:观察肺脾同治治疗甲状腺结节的疗效。方法:将依据诊断标准诊断为甲状腺结节100例患者随机分为两组,进行临床观察。观察组50例,给予自拟养肺阴、健脾气、化痰散结中药治疗;对照组50例,给予口服左旋甲状腺素治疗;疗程3个月。结果:治疗前后两组经统计学处理,痊愈率比较无显著性差异,但总有效率比较有显著性差异(P〈0.05);治疗前后甲状腺结节大小比较有显著性差异(P〈0.05)(多发结节以最大者计入);各组治疗前后的FT3、FT4差异均无统计学意义,P〉0.05;治疗组的TSH在治疗前后差异无统计学意义,P〉0.05;对照组的TSH治疗后明显低于治疗前,P〈0.05。结论:肺脾同治自拟中药治疗甲状腺结节疗效、安全性优于单纯口服甲状腺激素治疗。 相似文献
88.
89.
兰克的"如实直书"是一个内涵丰富、自成一体的理论体系。"如实直书"理应包括四个方面:一是重视对史料的考证、力求使用原始材料;二是反对抽象概括历史、强调对历史过程的"感通";三是重叙述少评判、不讨论是非,并利用文学技巧将历史过程重演于时代语境中;四是主张书写政治史、限制当代史研究。"如实直书"是兰克探索上帝启示与人类智慧的方式,更是它评价过去、教导现在、以利于未来的高尚追求。 相似文献
90.
目的观察复方苦参注射液治疗湿疹的疗效。方法80例患者随机分为2组,观察组静脉滴注复方苦参注射液(简称治疗组),对照组不用苦参注射液(简称对照组),用药2周后比较疗效。结果治疗2周后,病例组和对照组临床症状改善率分别为85%和63%;病例组总显效率80%,对照组55%,2组之间差异有统计学意义(X2=5.698,P〈O.05)。结论复方苦参注射液治疗湿疹疗效确切,适合于急性、亚急性湿疹的治疗。 相似文献