Crizotinib对NSCLC裸鼠HGF表达影响及生存分析

目的:研究Crizotinib对非小细胞肺癌裸鼠肝细胞生长因子表达及生存情况影响.方法:我们将60只裸鼠分组造模后,用不同药物灌胃给药.比较药物治疗后三组大鼠的肿瘤生长情况,分析比较三组大鼠8周生存率,采用ELISA法测定治疗前后大鼠血清HGF水平.结果:Crizotinib灌胃组裸鼠肿瘤增长速度明显降低,血清HGF水...     

雌激素剂量依赖性促进小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化

背景:绝经后骨质疏松的发病与雌激素水平的下降关系密切。目的:观察不同浓度雌激素对小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化能力的影响,及其与微小RNA-26a的关系。方法:取小鼠股骨与胫骨骨髓,全骨髓贴壁法获得并纯化骨髓间充质干细胞,分别以0,10-10,10-9,10-8,10-7,10-6 mol/L的雌二醇对其成骨诱导过程进行干预。结果与结论:雌二醇对骨髓间充质干细胞的增殖能力影响不明显,但可明显提高其成骨能力;同时雌二醇可促进骨髓间充质干细胞成骨基因RUNX2,OCN mRNA及RUNX2,SP7蛋白的表达,以10-9 mol/L雌二醇的作用最明显,但10-9mol/L雌二醇促进微小RNA-26a mRNA表达的能力最弱。说明雌二醇可剂量依赖性促进骨髓间充质干细胞的成骨分化,微小RNA-26a可能在此过程中发挥作用。     

体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经胶质样细胞的实验研究

目的：观察体外以不同方法诱导的骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells，MSCs)分化为神经胶质样细胞，探讨MSCs作为组织工程周围神经种子细胞的可行性。方法：以大鼠MSCs为研究对象，分化学诱导组，共培养诱导组，未经诱导的MSCs作为对照组。通过体外动态观察细胞形态，免疫细胞化学，western blot，RT-PCR等手段对各组诱导后的细胞进行鉴定。结果：形态学观察显示两种诱导过程中的部分MSCs细胞都出现明显的神经胶质细胞的形态，共培养诱导组的MSCs在诱导后仍可继续传代培养，对照组细胞形态无变化。细胞免疫组织化学染色，western blot和RT-PCR结果显示两个诱导组细胞都能够表达神经干细胞标志性抗体(Nestin)、神经胶质纤维酸性蛋白抗体(GFAP)和S-100抗体。结论：我们推断MSCs很有可能成为TEPN的理想种子细胞来源。     

体外成牙环境对牙髓干细胞和外胚间充质干细胞分化的影响

目的利用牙胚细胞（TGC）作为诱导成牙环境,将牙髓干细胞（DPSC）、外胚间充质干细胞（EMSC）分别与其共培养,观察DPSC和EMSC的分化能力。方法利用出生后4 d的大鼠TGC作为诱导成牙环境,将培养的DPSC、EMSC使用BrdU标记及鉴定后与其共培养,免疫荧光双标检测标记细胞表面抗原牙本质涎蛋白（DSP）的表达和碱性磷酸酶（ALP）活性的变化,免疫组化染色鉴定及图像分析DPSC、EMSC在成牙环境中的分化能力。结果共培养7 d后,EMSC共培养组DSP阳性细胞的转化率高于DPSC共培养组（P<0.05）。免疫组化染色图像分析结果表明共培养7 d后,共培养组与TGC单独培养组差异显著（P<0.05）。共培养组3、7 d后ALP活性明显增高,EMSC共培养组较DPSC共培养组ALP活性高。结论混合培养的TGC作为诱导细胞分化的微环境与DPSC、EMSC共培养后,能够诱导细胞向成牙本质细胞分化,EMSC分化能力高于DPSC。     

维甲酸处理未分化间充质细胞后细胞增殖与凋亡的变化

目的：研究维甲酸处理未分化外胚间充质细胞后,细胞增殖和细胞凋亡的变化,探讨细胞增殖、凋亡与维甲酸之间的关系。方法：用５μｍｏｌ／Ｌ维甲酸处理未分化外胚间充质细胞,绘制维甲酸处理前后细胞的生长曲线,并用ＴＵＮＥＬ法检测细胞凋亡数量的变化。结果：维甲酸处理未分化外胚间充质细胞后,细胞增殖受到抑制,细胞凋亡数量显著增加。结论：维甲酸可明显抑制未分化外胚间充质细胞的增殖,这种抑制作用可能是由于启动了细胞凋亡而引发的     

腭胚间充质细胞增殖变化在腭裂形成中的意义

腭胚间充质 (ｅｍｂｒｙｏｎｉｃｐａｌａｔａｌｎｅｓｅｎｃｈｙｍｅ ,ＥＰＭ)细胞的增殖与腭裂的发生密切相关。胚胎早期的腭胚间充质不同程度表达各种生长因子 ,表现出ＥＰＭ细胞的增殖活跃。我们利用维甲酸 (ｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄ ,ＲＡ)诱导建立的小鼠腭裂模型 ,检测腭裂发生中ＥＰＭ细胞增殖的变化并探讨其意义。1 材料与方法 :Ｃ5 7ＢＬ/6Ｎ系 2 4只妊娠 10ｄ的孕鼠随机分为实验组和对照组。实验组管饲维甲酸 (按 80ｍｇ/ｋｇ体重) ,对照组管饲等体积的植物油。妊娠 13ｄ第 14ｈ即ＧＤ1314 (ｇｅｓｔａｔｉｏｎｄａｙ ,ＧＤ ,以下类同 ) ,ＧＤ132 2 ,ＧＤ148,ＧＤ1414 ,ＧＤ142 2 ,ＧＤ15 8,ＧＤ15 2 2 ,ＧＤ16 88个时间点分别脱颈处死动物 ,取胚鼠头部 ,包埋连续切片。行免疫组织化学处理 ,ＴＵＮＥＬ染色及图像分析。2 结果 :按腭突的正常生长形态将腭突发育分为垂直生长期 (ＧＤ1314 ～ＧＤ148)、上抬期 (ＧＤ1414 ～ＧＤ15 8)、融合期(ＧＤ15 2 2 ～ＧＤ16 8) ,分别观察比较。对照组增殖细胞核抗原(ＰＣＮＡ)、细胞周期蛋白...     

骨形成蛋白在神经生长及再生过程中的营养作用

骨形成蛋白最初囚其能在骨骼外异位诱导软骨和骨形成的能力而被认识。近年的研究发现它是一类具有多种功能的细胞因子家族,作用范围极其广泛,包括全身多种组织和细胞。特别是发现骨形成蛋白具有神经营养作用,已引起广泛重视。其家族的多个成员可促进神经元的存活,并可通过直接和间接方式影响神经元的再生。     

DNA酶Ⅰ抑制细胞聚集降低骨髓间充质干细胞静脉注射发生急性肺栓塞的风险

目的:探索DNA酶Ⅰ处理后骨髓间充质干细胞降低急性肺栓塞的发生。方法:体外培养小鼠骨髓间充质干细胞。C57小鼠分PBS注射组、10U/mL DNaseⅠ-PBS注射组、正常BMSCs注射组、DNaseⅠ处理后BMSCs注射组。PBS注射组与正常BMSCs注射组尾静脉注射PBS或临界致死剂量的BMSCs,脏器组织学检测,PBS注射组对照,观察急性死亡率;比较正常BMSCs与DNaseⅠ处理后BMSCs体外增殖、分化能力和悬液中细胞聚集状态;DNaseⅠ处理后BMSCs注射组注射DNaseⅠ处理后3×106个BMSCs 5ml/kg观察急性死亡率。结果:PBS注射组相比正常BMSCs注射组急性死亡率为60%、心肺异常、肺血管内异染物质,急性肺栓塞;DNaseⅠ预处理不影响BMSCs体外增殖分化能力;DNaseⅠ处理BMSCs较正常BMSCs聚集成团细胞比例显著下降。DNaseⅠ处理后BMSCs注射组的急性死亡率为23.3%,与正常BMSCs注射组比较差异显著。结论:DNaseⅠ预处理不影响BM-SCs的生物学特性并能抑制单细胞聚集降低静脉注射BMSCs所导致的急性肺栓塞。     

联合培养的成纤维细胞对平滑肌细胞增殖和形态的影响

目的:观察体外联合培养的成纤维细胞对平滑肌细胞形态和增殖的影响,为研究成纤维细胞和平滑肌细胞生物学特性和相互关系以及体外构建含此两种细胞的组织工程皮肤提供理论和实践基础。方法:在体外分别分离培养成纤维细胞和平滑肌细胞并常规传代培养。模拟组织工程皮肤的结构及成纤维细胞和平滑肌细胞间的相互影响途径,按照不同比例(平滑肌细胞:成纤维细胞=1:1,1:2,1:3)建立以胶原凝胶为基质的成纤维细胞与平滑肌细胞联合培养模型。应用荧光标记、组织学观察和MTT法对平滑肌细胞的形态和代谢进行研究。结果:联合培养模型法可以有效地建立起成纤维细胞和平滑肌细胞的相互影响模式。1:1组的成纤维细胞对联合培养的平滑肌细胞增殖有促进作用,1:3组的促增殖作用则不明显。结论:1:1联合培养的成纤维细胞对平滑肌细胞增殖有促进作用,对它们体外培养和扩增以及相互关系的研究对阐明这两种细胞组合作为真皮替代物种子细胞具有重要的意义。     

体外构建含细胞组织工程角膜基质的方法

目的:研究体外构建组织工程角膜基质的方法.方法:用去垢剂联合酶的方法脱细胞处理猪角膜基质,在去细胞猪角膜基质材料上接种体外培养的兔角膜基质细胞,并将兔角膜基质细胞进行PKH26荧光标记,在体外构建组织工程角膜基质.用倒置荧光显微镜;HE染色光学显微镜;扫描电镜观察.结果:利用异种去细胞角膜基质组织为支架材料而构建的组织工程角膜基质具有近似正常角膜基质的三维立体结构.结论:以去细胞猪角膜基质材料为支架,利用组织工程技术可成功的在体外构建出含细胞的组织工程角膜基质组织.