钙调神经磷酸酶-T细胞核因子信号通路在应力诱导成肌细胞凋亡中的作用

目的 探讨钙调神经磷酸酶（CaN）-T细胞核因子（NFAT）信号通路在应力介导的成肌细胞凋亡中的作用。方法 构建成肌细胞体外培养-力学刺激模型,利用多通道应力加载系统对细胞加载不同时间的周期性张应力,加入CaN的特异性抑制剂环孢素（CsA）作为对比。采用Hoechst 33258染色法和流式细胞术检测成肌细胞凋亡情况,实时聚合酶链式反应检测CaN和NFAT mRNA的表达情况,蛋白质印迹法检测NFAT3的蛋白含量。结果 随加力时间的延长,细胞凋亡逐渐增加,CaN亚基CnA、CnB及NFAT3的mRNA表达及NFAT3蛋白含量逐渐升高;加入 CsA后,细胞凋亡减少,CnA、NFAT3的mRNA表达及NFAT3的蛋白含量明显减少。结论 周期性张应力可以诱导成肌细胞发生凋亡;CaN-NFAT信号通路可能参与了周期性张应力诱导的成肌细胞凋亡。     

恶性血液病患者血清sHLA-Ⅰ水平的变化及临床意义

目的探讨白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤等恶性血液病患者体内可溶性人类白细胞抗原Ⅰ（sHLA-Ⅰ）水平的变化及其临床意义。方法用ELISA方法检测112例恶性血液病患者的血清sHLA-Ⅰ水平。结果血清8HLA．冰平白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤均高于正常对照组（P均〈0．01）,淋巴瘤、多发性骨髓瘤高于白血病（P均〈0．05）,淋巴瘤组与多发性骨髓瘤组比较无统计学意义（P〉0．05）;白血病初治组、复发或未缓解组血清sHLA-Ⅰ水平高于缓解组（P均〈0．01）,初治组与复发组比较无统计学意义（P〉0．05）。血清sHLA-Ⅰ水平与患者外周血乳酸脱氢酶及β2-微球蛋白水平有关。结论血清sHLA-Ⅰ可以作为一种辅助监测及判断恶性血液病预后及复发的指标。     

人工合成FGL多肽对大鼠PC-12细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨人工合成FGL多肽对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞增殖和凋亡的影响。方法设计并人工合成FGL多肽。培养PC-12细胞,取生长状态良好者,分为对照组和实验组,实验组中加入FGL多肽溶液。对照组预先用多聚赖氨酸包被培养板。分别于培养1、3、5、7、9 d采用细胞活性检测试剂盒（CCK-8）检测两组细胞增殖情况。取PC-12,待细胞贴壁融合80%后,换无血清的培养基继续培养16 h。对照组加入H2O2刺激16 h。实验组先加入FGL多肽预孵育30 min,再加H2O2刺激16 h。流式细胞仪检测两组细胞凋亡情况;荧光定量PCR法检测PC-12中的核因子（NF）-κB mRNA。结果实验组培养1、3、5、7、9 d PC-12增殖数量均高于对照组;H2O2处理后,实验组PC-12凋亡数量及其中NF-κB mRNA的表达量均低于对照组（P均〈0.05）。结论人工合成FGL多肽可促进PC-12细胞增殖,并抑制其凋亡。     

复发/难治性急性淋巴细胞白血病患者多药耐药基因表达及临床意义

目的探讨复发/难治性急性淋巴细胞白血病(ALL)患者多药耐药基因(mdr1基因)的表达及其临床意义。方法采用Northern blot法检测K562/A02细胞株mdr1基因的表达,RT-PCR法检测42例ALL患者(ALL组)、27例非白血病患者和健康人(对照组)mdr1基因的表达水平,分析mdr1基因过度表达的临床意义。结果ALL组mdr1基因过度表达率显著高于对照组(P<0.01),其中复发/难治者高于初诊和完全缓解(CR)者(P<0.01),临床耐药者高于非临床耐药者(P<0.01);非临床耐药者CR率显著高于临床耐药者(P<0.001)。结论mdr1基因过度表达与ALL患者临床耐药密切相关,是影响预后的重要因素;mdr1基因表达可作为判断ALL患者临床耐药和预后的指标。     

肺癌切除术中血管重建术的应用

1990年4月至2005年5月,我们对59例肺癌侵犯血管的患者行肺叶切除术,同时对被侵犯的肺动脉、上腔静脉实行了重建术,效果良好。现报告如下。资料与方法：本组59例中,男43例,女16例;年龄35～73岁,平均61岁。左侧肺癌45例,行左肺上叶袖状切除加左肺动脉侧壁切除缝合15例,左肺上叶左肺动脉联合袖状切除27例,余3例行肺叶切除及受侵血管切除、同种异体血管问位移植。右侧肺癌14例。行右肺上叶右肺动脉侧壁切除1例,右肺中上叶切除加右肺动脉侧壁切除3例。右肺上叶右肺动脉联合袖状切除2例。右肺动脉切除加上腔静脉侧壁切除5例,上腔静脉切除人造血管替代上腔静脉2例。奇静脉上转替代上腔静脉1例。     

靶向survivin的siRNA并氟尿嘧啶转染对HepG2增殖影响

目的研究靶向survivin的小分子干扰RNA（siRNA）和氟尿嘧啶（5-FU）联用对肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用及对凋亡的影响。方法将HepG2细胞分为空白对照组、阴性对照组、5-FU处理组、siRNA转染组及5-FU＋siRNA转染组。转染采用脂质体法。采用RT-PCR法分别检测HepG2细胞survivin mRNA转录水平;MTT法分别检测靶向survivin的siRNA和5-FU对HepG2细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测HepG2细胞凋亡情况。结果 siRNA转染组、5-FU＋siRNA转染组survivin mRNA表达较空白对照组、阴性对照组、5-FU处理组明显下降（F=326.78,q=5.78～7.12,P〈0.05）。5-FU＋siRNA转染组细胞增殖抑制率为51.58%±1.35%,与其他各组相比明显增高（F=1 293.24,q=15.31～82.26,P〈0.01）。5-FU＋siRNA转染组与其他各组相比细胞凋亡率明显增高（F=13 568.68,q=110.47～327.16,P〈0.01）。结论将靶向survivin的siRNA和5-FU联合应用可以显著抑制肝癌细胞survivin基因表达,并协同抑制HepG2细胞增殖,共同发挥诱导细胞凋亡作用。     

胰腺肿瘤病人介入化疗前后肿瘤标志物水平的变化

①目的　观察胰腺肿瘤介入化疗术前后相关血清肿瘤标志物糖链抗原 19 9(CA19 9)、糖类抗原 2 4 2(CA2 4 2 )及癌胚抗原 (CEA)的水平变化及其意义。②方法　应用ELISA法检测 4 3例胰腺肿瘤病人介入化疗前后血清CA19 9、CA2 4 2及CEA的水平 ,同时以Karnofsky评分法评价其生活质量变化情况 ,观察治疗后临床受益反应率 (CBRR)。③结果　胰腺肿瘤病人介入化疗后血清CA19 9、CA2 4 2及CEA水平显著降低 ,与治疗前相比差异具有显著性 (F =5 31.2 1～ 5 4 31.0 1,q =13.5 1～ 16 0 .91,P <0 .0 1) ;治疗后病人生活质量明显好转 ,病人Karnofsky评分与化疗前比较差异有显著性 (uc=2 8.4 8,P <0 .0 1)。CBRR为 31.34%。④结论　血清CA19 9、CA2 4 2及CEA水平对评价胰腺肿瘤病人介入化疗效果和观察病情具有一定的临床参考价值     

线粒体通透性转换孔在缺血预处理脑保护中的作用及机制

目的观察线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)在缺血再灌注及缺血预处理脑保护中的作用。方法将体外培养8 d的海马神经元分为五组,正常对照组(A组),缺血再灌注组(B组),缺血预处理+缺血再灌注组(C组),苍术苷+缺血再灌注组(D组),缺血预处理+苍术苷+缺血再灌注组(E组)。使用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,罗丹明123染色流式细胞术检测线粒体膜电位,Western-blot检测Bcl-2,Bax的表达水平。结果与A组比较,其余四组线粒体膜电位均降低,神经元凋亡率升高(P<0.05);与B组比较,C组线粒体膜电位升高,神经元凋亡率升高,Bcl-2表达上调,Bax表达下调(P<0.05);与C组比较,E组粒体膜电位降低,神经元凋亡率升高,Bcl-2表达下调,Bax表达上调(P<0.05)。结论缺血预处理能有效减轻海马神经元缺血再灌注损伤,抑制缺血再灌注后神经细胞凋亡,其机制可能与抑制MPTP的开放有关。     

食管曲张静脉套扎术后再出血预防及治疗

目的:分析探讨食管曲张静脉套扎术后再出血预防和治疗措施.方法:将89例行食管曲张静脉套扎术患者分为三组,第一组给予静滴生长抑素0.25mg/小时;第二组给予垂体后叶素4.8U/小时和硝酸甘油0.4mg/小时;第三组为对照组,行常规抑酸.术后观察三组再出血现象.结果:第一组术后再出血率为3.4％ (1/29),第二组术后再出血率为6.4％ (2/31),第三组为20.6％(6/29).结论:应用生长抑素和垂体后叶素对降低食管曲张静脉套扎术后再出血效果显著,垂体后叶素经济优势明显.     

茶多酚并紫杉醇对食管癌Eca-109细胞增殖与凋亡影响

目的探讨茶多酚(TP)、紫杉醇(Paclitaxel)抑制食管癌Eca-109细胞生长、诱导细胞凋亡的作用及其可能机制。方法取对数生长期的Eca-109细胞,分为TP组、Paclitaxel组、两药联合组,分别加入100μL含不同浓度TP(125、250、500、1 000mg/L)、Paclitaxel(0.2、1.0、5.0、25.0mg/L)及TP+Paclitaxe(500mg/L TP+1mg/L Paclitaxel)的培养液,并设立阴性对照组、空白对照组,置于培养箱中避光培养12、24、48h。应用MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率的变化,显微镜观察细胞形态的变化,RT-PCR方法检测细胞凋亡相关调节基因Caspase-3的表达。结果不同浓度、不同作用时间TP组、Paclitaxel组细胞增殖抑制率差异有显著性(F=134.46～423.75,P<0.05)。两药联合组细胞的抑制率明显高于TP组、Paclitaxel组(q=8.63～26.96,P<0.05)。TP组、Paclitaxel组及两药联合组诱导24h的Eca-109细胞G1期细胞比例均高于对照组(F=54.52,q=5.39～17.53,P<0.05);与TP组、Paclitaxel组比较,两药联合组诱导Eca-109细胞凋亡率增高(F=446.82,q=16.27、31.64,P<0.05)。培养12h后,两药联合组Eca-109细胞Caspase-3mRNA表达较TP组、Pa-clitaxel组分别增高17.22%、11.63%(F=108.33,q=30.37、20.52,P<0.05)。结论 TP、Paclitaxel能抑制Eca-109细胞生长、诱导细胞凋亡,使细胞周期阻滞在G1期的比例增高;两药联合其作用更明显,其机制可能与Caspase-3mRNA表达增高有关。