荧光显微镜自动化检测血液残留白细胞方法的建立和应用

目的建立荧光显微镜自动化检测血液残留白细胞的方法。方法用不同浓度的残留白细胞[(1—150)个/μL]对LEICA-DM6000B荧光显微镜做放大倍数、荧光试剂配方、样品与试剂比例等参数优化及精密度试验,以ADAM白细胞计数仪做参比配对验证准确度试验。结果 LEICA-DM6000B荧光显微镜放大倍数选100倍形成88个图谱保存电脑;荧光试剂配方:碘化丙啶(PI)含量4 mg%(W/V),吐温含量0.60%(V/V);红细胞样品与荧光试剂比例为1∶14,曝光时间选择591 ms;血小板样品与荧光试剂比例为1∶4,曝光时间选择329 ms;红细胞样品与荧光试剂混合后取样量100μL;加入Nageotte计数板上静置时间选择20 min;Z轴调节上下范围(97±40)μm;避光保存2年的试剂检测残留白细胞值无明显变化(P0.05);红细胞和血小板样品均为残留白细胞精密度15%;LEICA-DM6000B荧光显微镜与ADAM计数仪配对检测残留白细胞相关性:红细胞样品为y=0.978 9x+0.381 6,r=0.9951(P0.05),血小板样品为Y=0.985 3X+0.494 2,r=0.996 9(P0.05)。结论采用荧光显微镜自动检测白细胞计数,准确、省工省时、检测费用低,克服了人为差错,并实现数据图像存档,有助于减少临床输血不良反应,保证临床输血的有效性及安全性。     

视觉诱发电位对亚临床肝性脑病的诊断价值

目的通过对肝硬化患者进行视觉诱发电位（VEP）检查及数字连接试验,探讨VEP对亚临床肝性脑病的诊断价值。方法对30例正常人及62例住院的肝硬化患者采用图形VEP（PVEP）检查,记录PVEP P100潜时和振幅,潜时〉105ms为异常,振幅〈6μV为异常;数字连接试验超过60s为异常,同时进行脑电图检查及学氨检测。结果PVEP异常34例（54．84％）,数字连接试验异常24例（38．71％）,两者均异常21例（33．87％）,三组比较差异有统计学意义（χ^2=6．03,P〈0．01）。结论视觉诱发电位联合数字连接试验对亚临床肝性脑病的诊断有较高的敏感度和特异度,是诊断亚临床肝性脑病的可靠依据。     

促进采供血机构持续发展的相关建议

对河南省采供血机构存在问题进行了分析。结合工作实践提出了5点建议：采取政府推进模式,促无偿献血持续发展;增加人员编制和投入,提高采血服务质量;合理规划集中检测实验室;积极采用先进检测手段,确保临床用血安全;完善质量管理体系等。     

不同来源人羊膜间充质干细胞的混合培养

背景：人羊膜间充质干细胞可诱导分化为神经样细胞,但在培养过程中发现干细胞增殖的数量不足。目的：为了获得足够数量的人羊膜间充质干细胞,观察人羊膜间充质干细胞混合培养的生长情况及经碱性成纤维细胞生长因子诱导人羊膜间充质干细胞向神经样细胞的分化情况。方法：将两个不同胎盘来源的羊膜分离培养、混合,采用细胞分离和培养技术获取人羊膜间充质干细胞,分离人羊膜间充质干细胞后传代培养,加入碱性成纤维细胞生长因子诱导分化。当细胞传至第3代时,随机取培养的6份人羊膜间充质干细胞（半量）为A组,6份人羊膜间充质干细胞（半量）为B组,将A、B组各剩余的半量人羊膜间充质干细胞混合为C组。3组细胞浓度均为1.0×107L-1。以活细胞计数和MTT比色法比较3组细胞扩增数量,以免疫组织化学法检测羊膜间充质干细胞神经胶质细胞标志物、神经元特异性烯醇化酶和巢蛋白的表达。结果与结论：混合人羊膜间充质干细胞之间有互相促增殖的作用。人羊膜间充质干细胞具有较强的可朔性,经碱性成纤维细胞生长因子诱导的人羊膜间充质干细胞可表达神经胶质细胞标志物、神经元特异性烯醇化酶和巢蛋白。     

人类Y染色体STR基因座多态性及其法医学应用

人类基因组的基因及基因外区域含有的二碱基、三碱基及四碱基的短串联重复序列 (ｓｈｏｒｔｔａｎｄｅｍｒｅｐｅａｔ,ＳＴＲ) ,能提供大量的遗传标记 (ｇｅｎｅｔｉｃｍａｒｋｅｒ ,ＧＭ) [1,2 ] ,可用于构建基因连锁图 ,诊断遗传性疾病 ,以及解决法医学实践中生物物证的个人识别及亲子鉴定等问题。ＳＴＲ基因座的ＤＮＡ多态性可用聚合酶链式反应 (ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ ,ＰＣＲ)、聚丙烯酰胺凝胶电泳 (ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ ,ＰＡＧＥ)及硝酸银染色法检测 ,通过待…     

河南省骨髓库汉族捐献者HLA-A、B、DR高分辨基因多态性调查分析

背景:2009年开始,中华骨髓库加大HLA高分检测的力度,可缩短配型检索周期,提高配型成功率.目的:统计分析河南省骨髓捐献者HLA-A、B、DRB1高分辨基因多态性.方法:河南省汉族造血干细胞志愿捐献者血样3 874人份,志愿捐献静脉血,EDTA抗凝.采用SSO HD 荧光微珠流式高分辨HLA-A、B、DRB1基因分型检测方法,对3 874份骨髓捐献志愿者血样进行高分辨分型检测,用PCR-SSP高分辨检测、SBT检测解决存在的模棱两可问题.等位基因计数法计算等位基因的基因频率.结果与结论:共检出A 34个,B 84个,DRB1 50个,A位点基因频率处于前5位的有A*0201(0.160 9)、A*1101(0.162 7)、A*2402(0.160 2)、A*3001(0.080 8)、A*3303(0.078 9);B位点处于前5位的是B*1302(0.077 7)、B*4001(0.072 2)、B*5101(0.062 8)、B*4601(0.061 2)和B*0702(0.050 7);DRB1位点处于前5位的是DRB1*1501(0.146 9)、DRB1*0901(0.131 8)、DRB1*0701(0.121 1)、DRB1*1202(0.061 2)、DRB1*0405(0.058 2).     

老年人群代谢综合症与缺血性脑卒中的关系探讨

目的:了解老年人群MS在缺血性脑卒中的危险性。方法:对2006年3月至2007年5月在我院接受体检的65~82岁离退休老干部共361人进行病史调查、体检、实验室检查及影像学检查,根据2004年中华医学会糖尿病学分会推荐的MS诊断标准将所有受检者分为MS组和非MS组。通过统计学方法对两组间的资料进行对比。结果:MS组98人(27.1%)。两组之间血压、BMI、各项生化指标、影像学检查缺血性脑卒中检出率等的差异均具有统计学意义,P<0.05。结论:老年人群MS患者缺血性脑卒中的危险性明显升高。     

不同来源人羊膜间充质干细胞的混合培养

背景：人羊膜间充质干细胞可诱导分化为神经样细胞,但在培养过程中发现干细胞增殖的数量不足。 目的：为了获得足够数量的人羊膜间充质干细胞,观察人羊膜间充质干细胞混合培养的生长情况及经碱性成纤维细胞生长因子诱导人羊膜间充质干细胞向神经样细胞的分化情况。 方法：将两个不同胎盘来源的羊膜分离培养、混合,采用细胞分离和培养技术获取人羊膜间充质干细胞,分离人羊膜间充质干细胞后传代培养,加入碱性成纤维细胞生长因子诱导分化。当细胞传至第3代时,随机取培养的6份人羊膜间充质干细胞(半量)为A组,6份人羊膜间充质干细胞(半量)为B组,将A、B组各剩余的半量人羊膜间充质干细胞混合为C组。3组细胞浓度均为1.0×107 L-1。以活细胞计数和MTT比色法比较3组细胞扩增数量,以免疫组织化学法检测羊膜间充质干细胞神经胶质细胞标志物、神经元特异性烯醇化酶和巢蛋白的表达。 结果与结论：混合人羊膜间充质干细胞之间有互相促增殖的作用。人羊膜间充质干细胞具有较强的可朔性,经碱性成纤维细胞生长因子诱导的人羊膜间充质干细胞可表达神经胶质细胞标志物、神经元特异性烯醇化酶和巢蛋白。