杂色曲霉素灌胃后小鼠脉络丛细胞超微结构和TNF-α表达的改变

本研究观察了杂色曲霉素(sterigmatocystin,ST)对小鼠脉络丛细胞超微结构和TNF-α表达的影响。给BALB/c小鼠一次灌胃ST3000μg/kg,分别于灌胃后0.5,1,2,4,8和16h处死动物,在扫描电镜下观察脉络丛细胞超微结构的改变,并且用原位杂交方法观察了脉络丛细胞TNF-α的表达。结果显示:ST灌胃1h后脉络丛细胞上出现火山口样改变,并且分泌颗粒增多,分泌颗粒在处理4h后最多,处理8h后分泌颗粒明显皱缩,处理16h后分泌颗粒明显减少。TNF-α在对照组和处理组各时间点脉络丛细胞均有表达,但处理组在ST灌胃0.5h后TNF-α表达迅速增加,4h达最高峰,之后开始下降,16h后下降到最低点。处理组与对照组比较,TNF-α表达显著增加(P<0.01)。上述结果表明,单次ST灌胃后对脉络丛细胞有一定程度的损伤,而TNF-α在脉络丛细胞损伤过程中可能起着重要作用。     

反相高效液相色谱法测定张家口赤城大麦中赭曲霉毒素A的含量

赭曲霉毒素（ochratoxins，OT）是由赭曲菌（asperegillus alutacells）和纯绿青霉（penicillium viridicatum）产生的有毒代谢产物，包括7种结构类似的化合物，其中以赭曲霉毒素A（ochratoxin A，OA）为主，毒性也最大。动物实验表明，赭曲霉毒素A具有肾毒性、免疫毒性和致癌、致畸、致突变性。1993年国际癌症研究中心将赭曲霉毒素A列为可能的人类致癌物。一些国家已报道了从人全血、血清及人奶中检出赭曲霉毒素。研究表明，粮食污染是人类赭曲霉毒素A暴露的主要途径。目前，国外文献中已有不少粮食赭曲霉毒素污染情况的分析检测报道，不少国家和国际组织还根据赭曲霉毒素的污染情况制定了每周容许摄入量限制标准。迄今为止，国内有关粮食中赭曲霉毒素A的污染情况报道较少。     

伏马菌素B1对人外周血单个核细胞表面HLA-Ⅰ分子表达的影响

目的:探讨伏马菌素B1(FB1)对体外培养的人外周血单个核细胞表面(HPBMc) HLA-Ⅰ分子表达的影响.方法:采用流式细胞术(FCM)、Western blot及半定量RT-PCR方法,研究不同浓度FB1(10和50 μmol/L)处理后人外周血单个核细胞表面HLA-Ⅰ分子表达的变化.结果:FCM定量分析结果表明,经FB1处理24 h后,两组FB1处理细胞HLA-Ⅰ的平均荧光强度均较对照组降低(P＜0.05),但是在两个处理组之间无统计学意义.Western blot也证实了上述结果.在mRNA水平上,分别检测了HLA-Ⅰ分子3个等位基因HLA-A,HLA-B,HLA-C的表达情况.结果显示,FB1处理后,HLA-A、HLA-B mRNA的表达均没有明显影响,仅HLA-C mRNA的表达较对照组降低.结论:10和50 μmol/L FB1处理24 h可抑制人外周血单个核细胞表面HLA-Ⅰ分子的表达.     

反义RNA抑制Ezrin表达对乳腺癌细胞侵袭能力的影响

目的 观察特异性阻断Ezrin的表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7的增殖和侵袭能力的影响.方法 将anti-pCR3.1-Ezrin质粒经脂质体介导,转染人人乳腺癌细胞MDA-MB-231 6、12和24 h,应用Western blot和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Ezrin的表达变化情况;转染质粒24h后,噻唑蓝(MTT)比色法检测抑制Ezrin对MDA-MB-231和MCF-7细胞体外增殖能力的影响,Boyden小室法检测抑制Ezrin对MDA-MB-231和MCF-7细胞体外侵袭能力的影响.结果 转染anti-pCR3.1-Ezrin后,对MDA-MB-231细胞中的Ezrin表达抑制在24 h时达高峰.MTT法比色实验结果显示,MDA-MB-231和MCF-7细胞中转染anti-pCR3.1-Ezrin组、转染空质粒组和对照组的A值分别为0.410±0.018、0.765±0.058、0.795±0.061和0.480±0.021、0.632±0.052、0.648±0.059.转染anti-pCR3.1-Ezrin组细胞的增殖受到明显抑制,抑制率分别为(47.9±3.1)%和(32.0±2.8)%(P<0.05).Boyden小室法检测结果显示,MDA-MB-231和MCF-7细胞中转染anti-pCR3.1-Ezrin组细胞的侵袭能力分别为对照组的(50.5±3.2)%和(74.8±4.6)%(P<0.05).结论 Ezrin在乳腺癌的生长和侵袭过程中发挥重要作用.     

黄曲霉毒素G_1对原代培养人食管鳞状上皮细胞HLA-Ⅰ分子表达影响的研究

目的探讨黄曲霉毒素G1(AFG1)对体外培养的人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子表达的影响。方法采用原代培养、免疫印迹(Western blot)和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析方法研究不同浓度AFG1(50、100、1000和2000μg/L)处理后人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子表达的变化。结果免疫印迹结果表明,经不同浓度AFG1(50、100、1000、2000μg/L)处理细胞24h后,100、1000、2000μg/L AFG1处理组HLA-ABC的蛋白表达均明显低于溶剂对照组(P<0.05),而且在100～2000μg/L浓度范围内,人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子的表达逐渐降低,两者呈明显的负相关关系(r=-0.921,n=3,P<0.01)。RT-PCR检测在mRNA水平进一步证实了AFG1对HLA-ABC表达的影响。其中100、1000、2000μg/L AFG1处理细胞后,HLA-A mRNA的表达明显低于溶剂对照组(P<0.05);2000μg/L处理组HLA-B mRNA的表达较溶剂对照组降低(P<0.05);而各AFG1处理组HLA-C mRNA的表达没有明显影响。结论 AFG1处理可以抑制人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子的表达。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇对人食管上皮细胞TAP-1和LMP-2表达的影响

目的:探讨不同浓度脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)处理,体外原代培养的人正常食管上皮细胞TAP-1、LMP-2表达的变化。方法:采用Western blot和RT-PCR技术从蛋白水平和mRNA水平上分析不同浓度的DON处理24小时,体外培养的人正常食管上皮细胞TAP-1、LMP-2分子表达的变化规律及其量-效关系。结果:不同浓度(50、100、1 000、2 000μg/L)DON处理人食管上皮细胞24小时后,DON各处理组食管上皮细胞TAP-1蛋白的Western blot半定量检测结果分别为0.47±0.22、0.28±0.16、0.24±0.18和0.21±0.19,统计分析表明DON 100、1 000、2 000μg/L处理组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。相关分析表明,在0~2000μg/L浓度范围内,随DON处理浓度增高,食管上皮细胞TAP-1蛋白的表达量逐渐降低(r=-0.595,n=4,P<0.01)。RT-PCR结果发现,经不同浓度DON处理食管上皮细胞TAP-1mRNA的相对表达量虽然呈现先升高后降低的趋势,但与对照组相比无统计学差异。DON各处理组LMP-2蛋白的Western blot半定量检测结果分别为2.25±1.03、3.31±1.35、1.90±1.19和2.12±0.22均高于空白对照组(0.91±0.21),其中100μg/L处理组相对表达量最高,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果,DON 100μg/L处理组的LMP-2 mRNA的相对表达量最高为2.23±0.56,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。其余处理组差异无统计学意义。结论:DON可剂量依赖地抑制体外培养的人正常食管上皮细胞的TAP-1蛋白的表达,但对TAP-1的mRNA未见显著影响。DON(100μg/L)可以促进食管上皮细胞LMP-2蛋白和mRNA表达,其余各浓度未见明显影响。     

新辅助化疗对乳腺癌组织MasPin蛋白表达的影响

目的:探讨CAF联合化疗方案的新辅助化疗对乳腺癌组织Maspin蛋白表达的影响.方法:采用免疫组化SP染色法分别检测38例行CAF联合方案新辅助化疗患者(化疗组)和同期173例未行新辅助化疗患者(对照组)手术切除的乳腺癌组织Maspin蛋白表达.同时对化疗组化疗疗效进行病理形态学评价,并分析Maspin蛋白表达与病理形态学变化的关系.结果:化疗组总有效率为81.6%.两组病例癌细胞胞浆的Maspin蛋白阳性表达率无明显差异(93.6%,97.4%).化疗组胞核Maspin蛋白高表达率明显高于对照组(50.0%,40.5%,P<0.05),其中,化疗组强阳性表达率7.9%,而对照组仅为0.6%(P<0.05).化疗后部分缓解(Ⅱ级)病例细胞核Maspin蛋白表达水平明显高于无效者(Ⅲ级)(P<0.01).结论:采用CAF方案新辅助化疗近期疗效明显,可部分恢复乳腺癌细胞核Maspin蛋白的表达.     

真菌霉素诱发的小鼠肺腺癌组织发生的研究

目的　探讨真菌毒素诱发的NIH小鼠肺腺癌组织学来源及其可能致癌机理。方法　采用34例长期灌胃黄曲霉毒素G1(AFG1)和杂色曲霉素(ST)诱发的NIH小鼠实验性肺腺癌组织作为研究对象,同时以12例正常肺组织作为对照。采用免疫组化染色方法以肺Ⅱ型肺泡上皮细胞特异分化标志物SP C和Clara细胞特定分化标志物CC 10的表达情况确定肺腺癌的组织来源。同时以免疫组化方法分析本组实验性肺腺癌P5 3、Ras和PCNA的表达情况。结果　全部34例肺腺癌癌细胞均可见肺Ⅱ型肺泡上皮细胞特异分化标志物SP C蛋白的阳性表达,阳性表达率为10 .0 % ,而Clara细胞特定分化标志物CC 10均为阴性表达(P <0 .0 1)。肺腺癌细胞PCNA平均阳性标记指数为73 .32 % ,明显高于对照组2 2 . 4 3% (P <0 . 0 1) ,但肺腺癌细胞未见突变型抑癌基因P5 3和癌基因RasP2 1在蛋白水平上的表达。结论　真菌毒素诱发的实验动物肺腺癌组织来源于Ⅱ型肺泡上皮细胞,具有较高的增殖活性,但未见突变型P5 3和RasP2 1在蛋白水平的表达。     

PREVENTIVE DETECTION OF FUNGI AND MYCOTOXINS IN CORN FROM HIGH RISKAREA OF ESOPHAGEAL CANCER IN CIXIAN COUNTY

ＰＲＥＶＥＮＴＩＶＥＤＥＴＥＣＴＩＯＮＯＦＦＵＮＧＩＡＮＤＭＹＣＯＴＯＸＩＮＳＩＮＣＯＲＮＦＲＯＭＨＩＧＨＲＩＳＫＡＲＥＡＯＦＥＳＯＰＨＡＧＥＡＬＣＡＮＣＥＲＩＮＣＩＸＩＡＮＣＯＵＮＴＹＺｈａｎｇＸｉａｎｇｈｏｎｇ；张祥宏；ＸｉｅＴｏｎｇｘｉｎ；谢同...     

RhoA信号转导通路对乳腺癌细胞Ezrin表达的影响

背景与目的：目前研究证实,RhoA在肿瘤发生发展和浸润转移过程中起重要作用,但其具体作用机制尚不完全清楚。Ezrin已经被证实参与了乳腺癌等多种恶性肿瘤的浸润转移过程。本研究初步探讨RhoA信号转导通路对Ezrin表达的调节作用。方法：给予表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF）作用MDA-MB-231细胞不同时间后,应用Westernblot方法检测细胞内RhoA、RhoA磷酸化形式及Ezrin蛋白表达的变化情况：给予RhoA激酶特异性抑制剂fasudil预处理后,应用Westernblot方法在RhoA磷酸化和Ezrin蛋白的表达高峰时间检Nz．者的表达情况。结果：给予EGF刺激后,p-RhoA水平逐渐升高,于30min时达高峰：RhoA蛋白的表达无明显变化;Ezrin蛋白水平逐渐升高,于24h时达高峰。用fasudil预处理细胞后,EGF诱导的RhoA磷酸化水平受到明显抑制,抑制率为72．73％;同时Ezrin蛋白的表达水平亦受到明显抑制,抑制率为51．28％。结论：RhoA可能作为Ezrin的上游信号转导途径参与调控乳腺癌细胞的浸润转移。