Ames波动试验和GADD45a-GFP GreenScreen两种快速筛选方法评价大黄素和芫花素的遗传毒性

目的 使用Ames波动试验和GADD45a-GFP GreenScreen两种快速筛选方法,对有毒中药芫花和了哥王的主要单体成分大黄素和芫花素的遗传毒性进行评价。方法 （1）Ames波动试验：在非代谢活化（-S9）和代谢活化（+S9）条件下使用鼠伤寒沙门菌TA100开展基于96孔液态培养法的细菌回复性突变试验,大黄素和芫花素（终质量浓度范围均为0.1~10 μg/mL）与菌液充分混合后在37℃下培养72 h。（2）GADD45a GreenScreen高通量筛选试验：在非代谢活化（-S9）和代谢活化条件下（+S9）将表达GADD45a基因的TK细胞（GenM-T01和GenM-C01）与大黄素（0.13~32.0 μg/mL）和芫花素（0.07~16.0 μg/mL）分别作用48 h（-S9）和3 h（+S9）,之后通过酶标仪和流式细胞仪检测绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein,EGFP）的荧光强度。结果 有无代谢活化条件下,10 μg/mL大黄素均可诱导TA100的回复性突变率显著性升高（P<0.05、P<0.001）;代谢活化条件下,10 μg/mL芫花素可诱导TA100的回复性突变率显著性升高（P<0.001）,16.0 μg/mL芫花素诱导TK6细胞表达的GADD45a-EGFP荧光强度也超过了遗传毒性阈值（1.3倍）。结论 当前研究提示大黄素和芫花素为可疑遗传毒性,需要开展深入研究明确其遗传毒性及机制。Ames波动试验和GADD45a GreenScreen是良好的高通量筛选备选试验,可极大优化浩繁的药物的毒性筛选工作,尤其适宜诸如中药等成分和配伍复杂的药物。     

急性重症胰腺炎的护理

急性重症胰腺炎是临床中一种非常常见的急症,患者常常突然间发病,而且急症发展速度很快,会对人身体器官造成伤害,严重者还会触及到生命[1]。因此,对急性重症胰腺炎患者采用精细化的护理方法,有助于患者尽快恢复身体健康。1资料与方法1.1一般资料选取本院2012年9月～2013年12月期间所收治的120例急性重症胰腺炎患者,其中男89例,女31例,     

脂联素在骨代谢中的研究进展

脂联素是由脂肪组织分泌的一种内源性细胞因子,与受体结合后,参与机体的代谢调节.因此脂联素及脂联素受体也成为治疗代谢性疾病的重要分子靶标.脂联素信号传导的研究对指导临床上骨代谢相关疾病的治疗有着积极的作用.本文就脂联素的生物学特性及其信号传导、脂联素对骨代谢的影响作一综述,为脂联素在骨代谢疾病中的治疗提供参考.     

上消化道大出血的护理

在临床中,上消化道大出血是一种非常常见的病症,如果没有得到及时的治疗,那么很可能会危及到患者的生命。及早发现身体肠道变化,进行有针对性的治疗,是治疗上消化道大出血的重要措施。本次临床研究选取了本院在2013年10月收治的60例上消化道大出血患者,根据患者患病情况,给予患者进行及时的治疗,并采取了科学的护理方法 ,在临床中取得了很好的效果,     

A型肉毒毒素治疗急性共同性内斜视的疗效与安全评估

目的 本研究旨在考察A型肉毒毒素注射治疗急性共同性内斜视的临床疗效和安全性。方法 对在2015年10月—2020年10月在医院接受BTXA治疗的AACE患儿数据进行了回顾性研究。经内直肌附着处1～2mm的球结膜微小切口暴露内直肌止端,后进行BTXA注射治疗,行鼻下Parks结膜切口,约2 mm,于肌肉附着点处约15 mm缓慢注入A型肉毒毒素至肌腹。注射后分别于1周、1个月及3个月时进行复查,观察正位率及并发症情况。结果 注射前平均斜视度为（33.6±8.3）~△,注射后1周平均斜视度（9.5±2.4）~△（P=0.000 24）;注射后1个月平均斜视度（7.7±0.6）~△（P=0.000 06）;注射后3个月斜视度（7.3±1.4）~△（P=0.000 02）。治疗3个月后,BTXA注射组斜视度减少量为（26.8±1.4）~△,23例AACE患儿在3个月后达到三棱镜检查斜视度正位±10 PD的治愈标准,正位率达82.14%(23/28)。结论BTXA注射治疗小至中度数的AACE具备安全性和有效性,对于恐惧和拒绝手术的儿童患儿,BTXA注射治疗可考虑作为首选治疗方案。     

学龄前患儿全麻眼科手术后早期进食的可行性

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2型糖尿病对小鼠下颌骨骨再生及辅助性T细胞17、调节性T细胞相关因子表达的影响

目的观察2型糖尿病对小鼠下颌骨骨再生以及辅助性T细胞17 (Th17)、调节性T细胞(Treg)相关因子表达的影响。方法将36只6周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常对照(NC)组和2型糖尿病(T2DM)组,小鼠下颌骨缺损建模当天(0 d)和术后7、14、28 d检测空腹血糖。于两组小鼠下颌骨缺损建模后7、14、28 d,通过苏木素-伊红(HE)染色观察下颌骨缺损愈合情况,通过免疫组织化学染色的方法观察下颌骨缺损内碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2 (RUNX2)、叉头框蛋白P3 (Foxp3)、维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)和蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型2 (PTPN2)的表达情况。结果 HE染色结果显示:T2DM组小鼠的下颌骨缺损范围内新生骨的数量明显少于NC组。免疫组织化学染色结果显示:成骨相关蛋白ALP和RUNX2的表达在T2DM组的骨缺损内明显降低;另外,2型糖尿病小鼠下颌骨缺损范围内的RORγt阳性细胞数量增加,Foxp3阳性细胞数量减少,PTPN2的表达明显降低。结论 2型糖尿病可以显著地抑制小鼠下颌骨骨再生过程,PTPN2的下降以及Treg-Th17向偏...     

基于毒理学软件和细菌回复突变试验的大黄素型蒽醌基因突变风险评价

目的 使用毒理学软件和细菌回复突变（Ames）试验评价大黄素型蒽醌类化合物的致突变风险，分析不同取代基及所在位置对大黄素型蒽醌致突变风险的影响。方法 使用Toxtree、Derek Nexus和Sarah Nexus毒性预测软件对大黄素、羟基大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚、大黄酸、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、芦荟大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-1-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷的致突变风险进行预测，并使用鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535和TA1537及大肠杆菌WP2 uvrA开展基于6孔板的Ames试验，评价10种大黄素型蒽醌的致突变性。结果 基于蒽醌母核结构，Toxtree、Derek Nexus和Sarah Nexus毒性预测软件提示所有大黄素型蒽醌均存在致突变风险。在非S9代谢活化状态下，芦荟大黄素导致TA98和WP2 uvrA Ames菌落数增加，大黄酚、大黄酸导致WP2 uvrA Ames菌落数增加。在大鼠肝S9代谢活化状态下，大黄素和大黄酸导致TA98和TA1537 Ames菌落数增加，羟基大黄素导致TA97、TA98、TA1537和WP2 uvrA Ames菌落数增加，芦荟大黄素导致TA98、TA1537和WP2 uvrA Ames菌落数增加，大黄素甲醚导致TA1537 Ames菌落数增加，大黄酚导致TA1537和WP2 uvrA回复菌落突变数增加，大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷可引起TA1537回复突变菌落数增加。结论 大黄素型蒽醌类化合物在大黄素母核的基础引入羟基后其诱变能力显著升高，较大葡萄糖苷基团的引入反而使受试物诱变能力降低。