苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶表达的影响

目的观察苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达的影响。方法以终质量浓度为0.1、0.2、0.4、0.6 mg/mL的苦参碱作用肺腺癌A549细胞48 h后,通过台盼蓝拒染法计数细胞的生长抑制率;以终质量浓度为0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞48、72、96 h后,经透射电镜和DNA Ladder实验了解到细胞凋亡的发生,PCR-TRAP法检测端粒酶活性,实时RT-PCR检测hTERT的mRNA表达水平。结果各种质量浓度的苦参碱作用A549细胞48 h后,均显著抑制细胞的增殖且呈浓度依赖性;0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞不同时间后,经透射电镜形态学检测和DNA Ladder实验,均显示A549细胞发生了凋亡改变;0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞48 h后,端粒酶活性明显受抑,hTERT mRNA表达显著降低。结论苦参碱能抑制肺腺癌A549细胞的生长并诱导其凋亡,其机制可能与下调hTERT基因表达,抑制端粒酶活性,破坏端粒稳定性有关。     

不同方法检测HBeAg低值血清的效果评价

目的 通过检测HBeAg低值血清,评价ELISA方法和时间分辨免疫荧光法（IrMA）的检测效果.方法 对2014年1月至6月我院HBeAg阳性结果进行回顾性分析,同时收集门诊和住院受检人群化学发光法（CMIA）检测HBeAg结果为1.00～29.99 S/CO区间内的低值血清样本81份,采用ELISA和IFMA法进行复孔检测.结果 HBsAg阳性人群的HBeAg检测结果与HBsAg呈正相关（r=0.680,P＜0.01）.HBeAg阳性样本占HBsAg阳性样本的32.69％,HBeAg低值样本占HBeAg阳性样本的39.35％,均主要分布于青中年人群.HBeAg阳性率随HBsAg阳性人群的年龄增高而降低（x2=386.041,P＜0.01）.ELISA和IFMA法检测HBeAg低值样本的阳性率分别为60.49％和45.68％,两者比较差异无统计学意义（x2=3.569,P＞0.05）.两种方法在检测1.00～4.99S/CO、5.00～29.99 S/CO水平的阳性率分别为25.64％、92.86％（ELISA）和10.26％、78.57％（IFMA）.相关性分析中,ELISA和IFMA法检测HBeAg低值样本的结果与CMIA方法检测结果均呈明显正相关（r=0.868和0.858,P＜0.01）.结论 由于方法灵敏度方面的原因,ELISA和IFMA法在检测HBeAg低值样本时存在较高比例的漏检情况,因此上述两种方法不适用于检测HBeAg低值样本以评估受检者感染HBV的疾病状况.     

钛镍丝固定矫正器矫治成人牙颌畸形

成人牙颌畸形临床多见,它不仅妨碍口腔的功能及美观,而且对牙体、牙周组织的健康也有影响。以往多使用可摘性矫治器,多带环矫治器及Begg矫正器等方法矫治。我科近两年来对42名成人牙颌畸形患者采用钛镍丝固定矫正器治疗,取得了满意效果。 1、临床资料:本组共42例,其中前牙开(牙合)4例、前牙反(牙合)5例、上颌前突12例(伴牙列拥挤4例)、牙列拥挤21例。年龄18岁至35岁,平均年龄21岁,其中男性13例、女性29例。疗程最短4个月,最长14个月。 2、矫治方法:①前牙反(牙合):上颌在反(牙合)牙上粘结     

脑血管病合并癫痫78例临床分析

l临床资料11一般资料本组病例共兀例,既往无癫病史,并排除其它致癫因素。全部病例均经头颅gy或头颅MRI确诊,其中脑出血42例,脑梗死刀例,蛛网膜下腔出血6例,（除头颅O检查外,还做腰穿证实）。男性46人,女性32入,年龄在％岁一月岁,平均年龄65岁。1．2癫闻发作时间以癫痛为收发症状者对例,脑血管病后Zwk内发作者34例,Zwk－la内发作者15例,8例发生在脑血管病后la－Za之间。1．3发作类型根据国际抗癫病联盟1981年癫痛分类法进行分类：表现为全面性发作者30例,其中脑出血19例,脑梗死6例,蛛网膜下腔出血5例;表现为单纯部分性发…     

PML-RARα融合基因相关蛋白原核表达载体的构建、表达和纯化

目的 构建PML-RAR o[融合基因相关重组表达质粒,在大肠埃希菌中表达可溶性蛋白并进行纯化.方法 利用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)以PML-RAR α全长质粒为模板分别扩增出长度均为1 200 bp的PML和RAR o[序列,并将它们分别插入PET32a(+)质粒中,构建重组表达质粒,化学法转化大肠埃希菌DH5α进行克隆,菌落PCR筛选阳性转化子,双酶切和测序鉴定重组质粒的正确性.正确重组的表达质粒分别命名为PML-Flag-PET32a(+)和Flag-RARα-PET32a(+).将正确重组的表达质粒转化感受态大肠埃希菌BL21(DE3),经异丙基β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,利用表达蛋白的组氨酸“标签”(His-tag)进行Ni2+-树脂柱亲和层析纯化,SDS-PAGE和Western blotting鉴定纯化蛋白质.结果 PCR扩增获得目的基因,重组表达质粒经EcoRI/HindⅢ双酶切和测序鉴定证明构建正确.转化感受态BL21(DE3)并经诱导后得到高效表达,SDS-PAGE和Western blotting显示纯化蛋白为目的蛋白.结论 成功构建重组表达质粒,并经诱导表达后可纯化出目的蛋白,为进一步的抗体制备等实验奠定了基础.     

丙肝患者血清 HCV RNA拷贝数与HCV Ab定量和肝脏功能损伤程度的关系

目的 对丙型肝炎患者丙肝病毒RNA（HCV RNA）、丙肝病毒抗体（HCV Ab）和肝功能指标定量结果进行统计分析,并探讨HCV RNA与HCV Ab和肝功能指标间的关系,为丙肝患者诊断和治疗提供参考依据。方法 收集342例丙肝患者血清,采用实时荧光定量PCR技术检测HCV RNA拷贝数,采用化学发光技术检测HCV Ab浓度,分别采用速率法、免疫比浊法、溴甲酚紫法和重氮盐法检测血清ALT、AST,PA,ALB和TBIL、DBIL的活性或浓度。结果 342例研究对象中,HCV RNA拷贝数以N×10⁶ IU/mL为主,占48.7%;而N×10³ IU/mL和N×10⁴ IU/mL最少,分别占4.3%和7.4%。在HCV RNA拷贝数小于1×10³ IU/mL组中,HCV Ab浓度较其他组低,而HCV RNA拷贝数在N×（10³~10⁷）IU/mL组间时,HCV Ab浓度差异无统计学意义（P>0.05）;当HCV Ab浓度大于10 S/CO时,HCV RNA阳性率升高,可达88.7%。与HCV RNA拷贝数小于N×10³ IU/mL相比,大于N×10⁴ IU/mL的丙肝患者血清ALT、AST、ALB和PA异常率增加（P<0.05）,而血清DBIL和IBIL差异无统计学意义（P>0.05）。结论 丙肝病毒主要损伤肝细胞及其合成功能,联合检测HCV Ab和HCV RNA拷贝数对丙型肝炎的诊断和治疗具有重要的意义。     

腹部手术后切口感染22例探析

目的探讨腹部手术后切口感染的原因,总结临床防治经验。方法对本院2006年10月至2012年10月所行的243例腹部手术患者的临床资料进行回顾性分析。结果共发生切口感染22例,切口感染率9.05%。结论抗生素使用、营养状况、缝合技术、电刀使用、手术时间、引流管放置等与切口感染有关。合理使用抗生素、改善营养状况、注重术中细节、规范操作等是预防腹部手术后切口感染、降低切口感染率的关键。