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【目的】构建含蛋白转导域(protein transduction domain,PTD)与脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)融合基因的表达质粒,原核表达可溶性TATPTD-Ngb,并鉴定、纯化,检测TATPTD-Ngb对皮质神经元的跨膜转导功能。【方法】提取SD大鼠脑组织总RNA,通过RT-PCR法构建编码TATPTD-Ngb的融合基因,克隆入pET28b原核表达载体,转化入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE、Western-blot分析及可溶性鉴定,利用所表达的目的蛋白上的6个组蛋白用Ni-NTA琼脂进行亲和层析纯化,将不同浓度纯化的融合蛋白与原代培养皮质神经元共孵育2h,用Western-blot分析融合蛋白的跨膜转导。【结果】成功构建了含有TATPTD-Ngb的原核表达载体,插入片段500bp,成功表达并纯化了可溶性TATPTD-Ngb融合蛋白,相对分子质量约为20k,Westernblot鉴定显示表达蛋白具有抗原性,并具有转导入原代培养皮质神经元的功能,随给予蛋白浓度的增高进入神经元内的融合蛋白量增高。【结论】可溶性融合蛋白TATPTD-Ngb可转导入皮 质神经元,对进一步研究Ngb的功能及蛋白转导技术的应用奠定了基础。 相似文献
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目的 探讨鼻声反射和鼻阻力测量在鼻腔扩容手术治疗鼻腔结构异常致阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者鼻功能评估中的应用.方法 选择经多导睡眠监测(PSG)确诊且经视觉模拟量表(VAS)评估具有鼻塞、鼻内镜及鼻窦CT检查证实结构异常的成年OSAHS患者36例作为研究对象.根据检查结果实施个体化的鼻内镜下鼻腔扩容... 相似文献
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鼻咽结核31例临床分析衡阳医学院附属第一医院沈宝,熊洁萍鼻咽结核临床典型症状较少,易被忽视或误诊为鼻咽癌。现总结我院1978~1993年9月经病理切片确诊的鼻咽结核31例,报告如下。1临床资料1.1一般资料31例中男18例,女13例,男女之比1.4:... 相似文献
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【目的】构建含蛋白转导域(protein transduction domain,PTD)与脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)融合基因的表达质粒,原核表达可溶性TATPTD-Ngb,并鉴定、纯化,检测TATPTD-Ngb对皮质神经元的跨膜转导功能。【方法】提取SD大鼠脑组织总RNA,通过RT-PCR法构建编码TATPTD-Ngb的融合基因,克隆入pET28b原核表达载体,转化入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE、Western-blot分析及可溶性鉴定,利用所表达的目的蛋白上的6个组蛋白用Ni-NTA琼脂进行亲和层析纯化,将不同浓度纯化的融合蛋白与原代培养皮质神经元共孵育2h,用Western-blot分析融合蛋白的跨膜转导。【结果】成功构建了含有TATPTD-Ngb的原核表达载体,插入片段500bp,成功表达并纯化了可溶性TATPTD-Ngb融合蛋白,相对分子质量约为20k,Westernblot鉴定显示表达蛋白具有抗原性,并具有转导入原代培养皮质神经元的功能,随给予蛋白浓度的增高进入神经元内的融合蛋白量增高。【结论】可溶性融合蛋白TATPTD-Ngb可转导入皮 质神经元,对进一步研究Ngb的功能及蛋白转导技术的应用奠定了基础。 相似文献
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鼻咽癌不同方式放疗疗效分析 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 分析比较鼻咽癌不同放疗方式的疗效。方法 回顾性分析1997年1月~2002年1月220例鼻咽癌初治患者临床资料。分别采用常规外照射放疗、体外照射联合腔内放疗、三维适形放疗治疗。常规外照射放疗患者72例,接受70~78Gy的根治放疗;体外照射联合腔内放疗92例,外照射60~65Gy(咽旁间隙浸润者予以65~70Gy),腔内放疗总剂量为8~22Gy,分1~3次,于1~3周完成;三维适形放疗56例,外照射40Gy后加三维适形放疗,剂量30~40Cy。统计分析各组3年生存率、3年局部控制率及并发症发生率,并比较其差异。结果 常规放疗组3年生存率、3年局部控制率为81.9%、77.8%;体外照射联合腔内放疗组及三维适形放疗组分别为80.9%、84、0%及78.6%、80.4%,组间比较差异无统计学意义(P〉0.05);体外照射联合腔内放疗组及三维适形放疗组的各种并发症发生率明显低于常规放疗组(P〈0.05),而前两组间无明显差异(P〉0.05)。结论 三种方式放疗治疗鼻咽癌疗效无明显差异,但腔内放疗、三维适形放疗相对外照射剂量降低,减轻了正常组织器官的放射损伤,从而减少了放疗并发症的发生。 相似文献
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