不同组别脑胶质瘤CD133/PCNA和Nestin/PCNA双染共表达及其临床意义

目的 探讨脑胶质瘤组织中 CD133 阳性细胞及 Nestin 阳性细胞增殖指数的共表达情况及其临床意义.方法 免疫组织化学双染色方法检测 CD133/增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及Nestin/PCNA在不同级别脑胶质瘤中共表达情况,并对它们之间的关...     

shRNA Notch2对人脑胶质瘤细胞株U251生长及凋亡的影响

目的:探讨稳定转染基因Notch2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)对胶质瘤细胞株U251生长、增殖和凋亡的影响。方法:采用脂质体法将构建插入Notch2-shRNA和无意义shRNA(Negative-shRNA)的重组表达质粒分别转染人脑胶质瘤U251细胞,建立稳定长效转染的细胞株;应用RT-PCR和蛋白质印迹法检测Notch2-shRNA对U251细胞中Notch2表达的影响及相关蛋白表达的变化;MTT法检测其细胞增殖的影响;FCM法检测细胞凋亡率和细胞周期。结果:稳定转染Notch2-shRNA后,U215细胞中Notch2 mRNA和蛋白的表达明显受到抑制;干扰组细胞从第5天开始增殖明显降低(P<0.05);干扰组细胞的凋亡率为(15.14±4.26)%,明显高于Negative-shRNA组的(2.70±1.45)%和未转染组的(2.10±1.72)%(P<0.05);Notch2-shRNA干扰组细胞S期细胞所占百分比为(23.1±3.4)%,明显低于转染Negative-shRNA组的(41.2±6.9)%和未转染组的(53.2±7.8)%(P<0.01),而干扰组G1期细胞所占百分率为(51.8±3.9)%,显著高于转染Negative-shRNA组的(38.9±9.7)%和未转染组的(25.2±7.7)%(P<0.05);与转染Negative-shRNA组和未转染组相比,干扰组细胞中p21和p27蛋白表达量上调,而细胞周期蛋白cyclinD1和微型染色体维持蛋白2(minichromosome maintenance 2 protein,MCM2)的表达量下调。结论:Notch2shRNA能有效抑制U251细胞中Notch2的表达和细胞的增殖,为脑胶质瘤基因治疗提供了新的靶点。     

急性颅脑损伤患者血清中C-反应蛋白的动态变化及临床意义

目的分析急性颅脑损伤患者血清中超敏C-反应蛋白（CRP）的动态变化与疾病严重程度及预后的相关性。方法急性颅脑损伤患者60例为试验组,按GCS评分分为轻型10例,中型35例,重型15例。分别于发病后24h以内,3d,7d,14d抽取空腹外周静脉血,免疫比浊法检测其CRP的血清浓度。结果各试验组均与对照组CRP水平差异有统计学意义（P〈0.01）,各试验组间CRP水平差异有统计学意义（P〈0.01）,即中型组CRP水平明显高于轻型组（P〈0.01）,重型组CRP水平明显高于轻、中型组（P〈0.01）。结论急性颅脑损伤后对CRP升高幅度和持续时间的动态观察可敏感地反映伤情的严重程度及预后。     

脑胶质瘤中p33ING1蛋白表达及其与细胞凋亡和增殖关系的研究

目的检测p33 ING1蛋白在脑胶质瘤中的表达,探讨其与肿瘤细胞增殖、凋亡及肿瘤恶性程度的关系。方法应用免疫组化S-P法分别检测p33 ING1和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达,并用TUNEL法做原位细胞凋亡检测,实验数据进行统计分析。结果50例脑胶质瘤中p33ING1蛋白表达的总阳性率为90%（28/50）,随着胶质瘤恶性度的增高其表达水平下降,而且表达水平与细胞凋亡指数（AI）呈正相关与细胞增殖指数（PI）呈负相关（P〈0.01）。结论胶质瘤细胞中抑癌基因p33ING1的表达可促进细胞凋亡,抑制细胞过度增殖,与胶质瘤恶性程度密切相关。检测其表达水平的变化对胶质瘤的诊断、治疗及判断预后均有重要指导意义。     

p16基因与脑胶质瘤

肿瘤的发生和发展是一个十分复杂的过程.现已肯定地认为,肿瘤是一种基因病变,癌基因的激活和抑癌基因的失活是正常机体癌变的主要机理.p16基因是继P53抑癌基因之后又一引人注目的新型肿瘤抑制基因,也是人们发现的第一个直接作用于细胞周期抑制细胞分裂的抑癌基因,其编码产物为CDK4抑制因子.由于CDK4在细胞增殖和恶性转化过程中发挥重要作用,所以该基因一经发现即成为肿瘤生物学、分子遗传学等领域研究的热点.     

重组人5型腺病毒术中瘤腔内注射治疗脑胶质瘤的安全性研究

目的观察脑胶质瘤切除术后瘤腔注射重组人5型腺病毒注射液（安柯瑞）的安全性。方法按入选标准筛选脑胶质瘤患者21例，给予手术切除后瘤腔内注射安柯瑞。治疗前对患者进行全面体检，治疗期间密切观察患者的生命体征和不良反应，并于术后第7天、4周进行血常规、血液生化、尿常规检查。结果21例患者对安柯瑞术后瘤腔内注射耐受性良好，未见严重不良反应，主要不良反应是发热。结论安柯瑞应用于脑胶质瘤瘤腔内注射有良好的安全性。     

白细胞介素-18与C6细胞裂解物修饰的树突状细胞疫苗对脑胶质瘤的免疫治疗作用

目的观察经白细胞介素-18(IL-18)和C6细胞裂解物修饰的树突状细胞(DC)疫苗对大鼠脑胶质瘤的免疫治疗作用.方法用立体定向方法制作大鼠脑胶质瘤模型.通过白细胞介素-18和大鼠脑胶质瘤细胞(C6)裂解物修饰大鼠树突状细胞,制成DC疫苗.在大鼠皮下接种DC疫苗,检测大鼠体内特异性杀伤T细胞(CTL)活性,检测各组血清中细胞因子IL-18、干扰素(IFN-γ)的浓度,并研究了其对大鼠脑胶质瘤的免疫治疗作用.结果DC-IL18-C6组中IL-18与IFN-γ的浓度与其余各组比较有统计学意义(P＜0 01),与注射DC组比较有统计学意义(P＜0 01).DC-IL18-C6组接种C6细胞后56 d均未见移植肿瘤形成,与其余各组比较有统计学意义(P＜0.01).对C6胶质瘤细胞的细胞毒作用以DC-IL18-C6组最强,DC-C6裂解物组次之,DC-Ⅱ-18组较弱,其余两组则缺乏(P＜0.01).DC-IL18-C6组的荷瘤鼠生存期比其他各组明显延长,且肿瘤的大小比其他各组明显缩小.结论白细胞介素-18与C6细胞裂解物修饰的树突状细胞疫苗对大鼠脑胶质瘤有明显的免疫治疗作用.     

树突状细胞瘤苗抗脑胶质细胞瘤作用体外实验研究

目的通过体外实验探讨应用树突状细胞制备的肿瘤疫苗抗脑胶质瘤的作用机制.方法培养大鼠树突状细胞,冻融法制备胶质瘤抗原,以肿瘤抗原致敏树突状细胞而制备胶质瘤疫苗.将实验动物分为4组,分别将胶质瘤疫苗、树突状细胞、生理盐水注入正常大鼠体内,到达预定时间取出大鼠脾脏,四噻唑蓝(MTT)法检测大鼠淋巴细胞活性.结果一次输入胶质瘤疫苗的正常大鼠的淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤活性明显低于3次输入胶质瘤疫苗的正常大鼠;比较输入培养8 d的树突状细胞和输入生理盐水的大鼠,其淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤活性无统计学差异.结论应用树突状细胞制备胶质瘤疫苗可明显激活体内抗肿瘤免疫反应.     

水通道蛋白、血管内皮生长因子在人脑胶质瘤中的表达及意义

背景与目的：人脑胶质瘤几乎都伴有瘤周水肿，本研究检测水通道蛋白（aquapofins，AQP 1、4）和血管内皮生长因子（vast、ular enclothelial growth fotor，VEGF）在人脑胶质瘤的肿瘤组织、瘤周水肿组织及正常脑组织中的表达，初步探讨其与人脑胶质瘤水肿的关系。方法：应用免疫组织化学和原位杂交技术检测VEGF、AQPI和AQP4的蛋白质和mRNA的表达；测定并计算水肿指数。结果：VEGF、AQPI和AQP4的蛋白质和mRNA程度不同地表达于人脑胶质瘤肿瘤组织、瘤周水肿组织及正常组织中。结论：在人脑胶质瘤肿瘤及其瘤周水肿组织巾．VEGF、AQP1、AQP4表达增强。VEGF与肿瘤的病理级别及血管性水肿相关；AQP4广泛分布和高表达．是基础性水通道；AQP1较窄分布和低表达，在某些位置和细胞毒性水肿中起重要作用。瘤周水肿的程度与肿瘤的恶性程度密切相关。AQP1、AQP4、VEGF等多细胞因子表达发生变化，从而引起人脑胶质瘤瘤周细胞毒性和血管源性水肿。