恒河猴静脉内皮细胞衬里ePTFE人工血管的实验研究

按原位获取法恒河猴表浅静脉内皮细胞，在体外培养扩增，制备成内皮细胞悬液。用纤维蛋白胶和纤维连接蛋白联合预衬各ｅＰＴＦＥ人工血管腔，将内皮细胞灌入此人工血管，结果内皮细胞的贴壁率明显提高；内皮细胞高密度种植人工血管后２ｈ，扫描电下见人工血管腔表面已形成完整的内皮细胞单层；孵育９ｄ后，透射电镜见内皮细胞骨架已分化成熟，表明此时人工血管腔内皮细胞具有良好的抗切应能力。     

新型人源细胞混合型生物人工肝的安全性研究

摘要 背景：目前原位肝移植是惟一有效治疗急性肝衰竭的方法,但其存在供体匮乏的问题。人工肝可作为肝移植过渡支持手段。 目的：观察新型人源细胞混合型生物人工肝的安全性。 方法: 在全接触灌流型生物反应器接种微载体微重力中国人肝细胞系1细胞,结合血浆灌流对D-氨基半乳糖诱发急性肝功能衰竭模型食蟹猴进行治疗,治疗过程中观察循环管路的密闭性、不良反应及监测动物的生命体征变化,治疗结束后取灌流型生物反应器中的中国人肝细胞系1细胞,把细胞碎片与细胞分别接种至裸鼠的颈部、后背部皮下进行比较。 结果与结论：对急性肝功能衰竭食蟹猴模型的治疗过程中未发现循环管路中有液体渗漏,未发生出血、过敏、高热及其他严重的不良反应,生命体征平稳。接种后4周时,细胞碎片接种裸鼠未见接种部位出现种植瘤,细胞接种裸鼠共有10个接种部位出现肿瘤,致瘤率为100%。说明新型人源细胞混合型生物人工肝是安全可靠的,可进一步探讨其有效性,有望用于各种动物实验研究及各期临床实验研究。 关键词：人肝细胞;人工器官;混合型;肝;安全性;食蟹猴 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.12.010     

受体骨髓间充质干细胞同期输注对肝移植大鼠免疫状态的影响

目的:观察受体骨髓间充质干细胞(MSCs)术中经门静脉输注对肝移植大鼠肝脏微环境免疫状态的影响。方法:经改良双袖套法建立DA-Lewis大鼠原位肝移植急性排斥反应模型。实验分3组,A组行原位肝移植术;B组行原位肝移植术+术中门静脉输注MSCs;C组行原位肝移植术+肌注环孢素A。术前密度梯度离心法分离与贴壁法富集受体MSCs。观察受鼠术后生存时间和一般情况,于1、7、14d和1个月取受鼠肝组织Luminex检测特异性细胞因子(IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ),同时测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)及总胆红素(TBil)。结果:A组受体12～16d死亡。B、C组大鼠1个月后活动增多,体重增加,B组较A、C组生存时间延长(P<0.05)。术后1、7d各组IL-2、IL-4、IL-10、IFN-"均升高,但B、C组低于A组(P<0.05),术后14d、1个月B组IL-4、IL-10浓度高于C组,IFN-"浓度低于C组。术后7d各组ALT、TBil值均升高,B组明显低于A、C组(P<0.05),术后14d和1个月B组ALT、TBil值明显低于C组(P<0.05〉。结论:术中输注受体MSCs可改善肝功能,延长...     

新型免疫状态定量监测皮肤移植模型小鼠的特异性*☆

背景：器官移植后如何监测受者的免疫状态,并预测排斥反应的发生,从而调整免疫抑制剂的用量是当前面临的重要问题。 目的：探索新型免疫状态定量监测方法在小鼠皮肤移植模型中是否有抗原特异性。 方法：建立 C57→BALB/c皮肤移植排斥模型,分别输注 C57/BALB/c 混合脾细胞悬液及第三者对照DBA/BALB/c混合脾细胞,在细胞输注后检测2种混合细胞悬液比例变化及供体细胞杀伤率,同时设置 BALB/c→BALB/c 同系皮肤移植对照组,免疫低下裸鼠对照组及免疫抑制剂对照组与之对比。 结果与结论：C57/BALB/c悬液-移植排斥模型组和C57/BALB/c悬液-移植排斥模型免疫抑制剂组小鼠对供体 C57 脾细胞有强烈的特异性杀伤作用,其中C57/BALB/c悬液-移植排斥模型免疫抑制剂组特异性杀伤作用稍弱,而输注第三者对照DBA/BALB/c混合脾细胞的小鼠细胞注射2~4 h内没有明显特异杀伤作用,但免疫低下的裸鼠始终未表现出特异性杀伤。说明实验建立的抗原特异性免疫状态检测方法能够快速地检测出皮肤移植受体的免疫状态。     

一种适合肝细胞生长的无血清培养基*

背景：寻找一种既能适合细胞生长又避免添加血清的培养基迫在眉睫,无血清培养应运而生。 目的：探索一种适用于C3A细胞生长的无血清培养基,为肝细胞用于临床治疗以及生物人工肝走入临床奠定基础。 方法：分别用无血清培养基、完全培养基和基础培养基培养C3A细胞,观察细胞的生长状态,绘制细胞生长曲线和活力曲线,全自动生化分析仪测定上清中谷丙转氨酶漏出量、尿素含量,放射免疫分析法检测白蛋白分泌量,实时荧光定量PCR检测基因水平的变化情况。 结果与结论：3种培养基培养的细胞生长良好,无血清培养基组与完全培养基组细胞密度在培养周期内,除第7天以外差异无显著性意义(P > 0.05)。培养第4~7天,其他两组明显高于基础培养基组(P < 0.05);无血清培养基尿素合成水平>完全培养基>基础培养基(P < 0.05)。Real-time qPCR显示,无血清培养基组相对于完全培养基组仅CK18、CK19和HNF4α基因表达量下降(P < 0.05)。说明实验研制了一种适合于肝细胞(C3A)生长的无血清培养基,与传统血清培养能达到同样的效果。 关键词：培养基;无血清培养;C3A细胞;肝细胞;生物人工肝;PCR检测 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.11.015      

38例Mirizzi综合征的临床诊治分析

目的探讨Mirizzi综合征的病理特点、诊断和治疗方法,提高该病的诊治水平。方法对38例Mirizzi综合征患者的临床资料进行回顾分析。结果38例Mirizzi综合征患者10例（20.31%）术前诊断明确,本组无手术后死亡病例;1例I型患者胆囊切除术后出现胆漏;1例胆囊切除＋瘘口修补＋T管引流术后10个月再次出现胆总管狭窄;1例IV型患者行胆囊切除＋胆肠Roux-en-Y吻合术后5年再发肝内胆管结石并感染;38例中12例行腹腔镜下胆囊切除术（LC）,4例由于腹腔镜手术中解剖困难、出血中转开腹。结论手术前诊断及术中注意Mirizzi综合征的存在能降低手术胆道损伤率。