钙激活中性蛋白酶在肝癌细胞迁移能力中的作用

目的:观察不同转移能力肝癌细胞中钙激活中性蛋白酶(calpain)的表达情况,利用抑制剂抑制calpain活性,评价calpain对肝癌细胞迁移能力的影响.方法:用蛋白质印迹(Western blotting)检测不同转移能力肝癌细胞或肝细胞中calpain-1、calpain-2和Src的表达和酶解情况;用划痕法观察...     

均匀设计法联合Excel优选九分巴布剂的基质配比

目的: 优选九分巴布剂的基质配比并考察其体外释放过程。 方法: 以巴布剂的黏性及释放速率常数为指标,采用均匀设计法考察卡波姆、聚丙烯酸钠、聚乙烯醇、羧甲基纤维素钠及甘油用量对九分巴布剂质量的影响,联合Excel软件对试验数据进行多元回归分析,优化九分巴布剂基质配比,测定九分巴布剂的体外释放度。采用HPLC测定马钱子碱含量,色谱条件为Hypersil BDS C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相甲醇-水-三乙胺-冰醋酸(20:280:0.3:2.4,pH 4.5),流速1 mL·min^-1,检测波长254 nm。 结果: 九分巴布剂的最佳基质配比为卡波姆-聚丙烯酸钠-聚乙烯醇-羧甲基纤维素钠-甘油(1:1:1:1.75:20)。体外释放试验表明九分巴布剂的体外释药过程符合Higuchi方程(R2=0.902 4)。 结论: 九分巴布剂基质成型好,体外释药能维持24 h释药。将Excel软件与均匀设计联合的方法简便可行。     

β-环糊精、羟丙基-β-环糊精对马钱子碱的增溶作用及热力学研究

目的研究β-环糊精(β-CD)、羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)对马钱子碱的增溶作用,采用热力学方法考察温度、pH对包合反应的影响。方法采用相溶解度法测定在不同温度、pH条件下β-CD、HP-β-CD对马钱子碱溶解度、包合常数和热力学性质的影响。结果马钱子碱的溶解度随β-CD、HP-β-CD浓度的增加呈线性增加,其相溶解度曲线均为AL型,可形成摩尔比为1∶1的稳定包合物。β-CD在中性条件下其包合常数及增溶作用较大,而HP-β-CD在酸性条件下包合常数及增溶解作用较大。结论β-CD、HP-β-CD均对马钱子碱有较好的增溶作用,HP-β-CD的包合作用要优于β-CD。     

胰岛素改善拟AD模型大鼠学习记忆能力和对海马CAl区Aβ1-40表达的影响

目的研究胰岛素对拟AD模型大鼠学习记忆能力和海马CA1区β-淀粉样蛋白(Aβ1-40)表达的影响。方法设对照组、拟AD模型组和胰岛素组。采用冈田酸(OA)进行海马CA1区微量注射建立拟AD大鼠模型,合成人胰岛素侧脑室微量注射,制模2周做水迷宫行为学试验检测3组大鼠学习记忆能力,免疫组化方法观察大鼠海马CA1区A1β-40。的表达。结果定向航行试验的第2天开始,胰岛素组与拟AD模型组比较,定向航行试验平均逃避潜伏期明显缩短,P<0.05或P<0.01;空间探索试验原站台象限活动时间明显延长,P<0.01。胰岛素组大鼠海马CA1区A1β-40表达明显减少或消失,与拟AD模型组比较,P<0.01。结论胰岛素减少海马CA1区Aβ1-40的表达,减轻OA对大鼠海马的病理损害,有显著改善拟AD模型大鼠学习记忆能力的作用。     

论桂枝汤的双向调节作用

从中医理论出发,结合现代药理动物实验,分析桂枝汤对体温,汗液4及胃肠功能的双向调节作用的物质基础,以便进一步研究方剂对机体的双向调节作用,更好地为临床服务。     

两种除杂工艺对九分散水提液除杂效果的比较

目的:考察两种除杂方法对九分散水提液除杂效果的影响,确定最佳除杂工艺.方法:以处方中有效成分马钱子碱、士的宁碱含量及总生物碱含量、干膏收率为指标,对乙醇沉淀法和高速离心法进行了除杂效果的比较.结果:高速离心法对有效成分含量有较好的保留率,并能明显降低干膏收率,确定优化的除杂工艺为:以转速10 000 rpm离心10 min.结论:该工艺路线稳定、可行,适用于生产.     

穴位埋线对血管性痴呆大鼠学习记忆及海马胆碱乙酰转移酶表达的影响

目的探讨穴位埋线对血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆的影响及其机制。方法改良Pulsinelli′s 4血管阻断法建立VD大鼠模型;造模后给予穴位埋线治疗;采用Morris水迷宫检测学习记忆能力及免疫组化检测胆碱乙酰转移酶（ChAT）表达。结果穴位埋线VD大鼠学习记忆能力提高;海马齿状回ChAT表达增强。结论穴位埋线可提高VD大鼠学习记忆能力,可能与它增强海马ChAT表达、保护胆碱能神经元有关。     

细胞培养密度对MCF7乳腺癌细胞integrin β4水解的影响

目的:研究细胞培养密度对MCF7乳腺癌细胞integrinβ4水解机制。方法:常规培养高密度和低密度MCF7乳腺癌细胞,分别给予钙离子螯合剂和肝素处理,用Western blot检测不同培养密度MCF7细胞integrinβ4的水解情况;用Fluo-3 AM作为钙离子荧光探针,激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内钙离子的分布。结果:Western blot检测结果显示,在低密度和高密度培养的MCF7细胞中,integrinβ4的水解模式不同;在高浓度培养的细胞中,200 k D integrinβ4片段产生增多;激光共聚焦扫描显微镜观察发现,低密度培养MCF7细胞中,钙离子的绿色荧光主要成团或颗粒状分布,而且与红色荧光有较多的重合,部分钙离子分布于细胞核内;在高密度培养的细胞中,钙离子在细胞质膜和细胞核中的定位较少;钙离子螯合剂BAPTA-AM处理可使200 k D integrinβ4明显减少;10-6mol/L的肝素能够减少MCF7细胞200 k D水解片段的增多,随着肝素浓度的增高,抑制效果有所增强;相对于BAPTA-AM,10-4mol/L肝素的抑制效应减弱。结论:高密度培养的MCF7细胞中,钙离子从钙库中释放,细胞外内流增多,激活calpain 2,导致200 k D integrinβ4水解片段增多。     

耳针对拟阿尔茨海默病模型大鼠海马神经原纤维缠结的影响

目的：研究耳针对拟阿尔茨海默病（Alzheimer’s Disease,AD）模型大鼠海马神经原纤维缠结（NFT）的影响。方法：采用冈田酸（Okadaic Acid,OA）海马CA1区微量多次注射建立拟AD大鼠模型,针刺肾、脑耳穴,观察大鼠行为学变化,Bielschowsky染色观察海马神经原纤维缠结（neurobrillary tangles,NFT）。结果：与模型组比较,耳针组大鼠平均逃避潜伏期明显缩短（P〈0.01）,第Ⅲ象限活动时间明显延长（P〈0.01）,穿越站台次数明显增多（P〈0.01）,海马CA1区NFT数量明显减少（P〈0.01）。结论：耳针可显著改善拟AD模型大鼠学习记忆能力,抑制NFT的形成。     

天麻素对血管性痴呆大鼠学习记忆能力和海马p53表达的影响

目的：探讨天麻素对血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆能力和海马p53表达的影响。方法：将大鼠随机分成模型组、对照组、治疗组（高剂量天麻素组和低剂量天麻素组）,采用改良Pulsinelli四血管闭塞法（4-VO）建立VD大鼠模型,天麻素高剂量组模型大鼠用天麻素80 mg.kg^-1.d^-1灌胃,天麻素低剂量组模型大鼠用天麻素40 mg.kg^-1.d^-1灌胃,连续4周。水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,免疫组织化学检测大鼠海马p53免疫反应阳性细胞表达。结果：与VD模型组比较,天麻素治疗后VD大鼠学习记忆能力明显提高,海马p53免疫阳性神经元明显减少（P〈0.01）,以高剂量天麻素组效果更显著。结论：天麻素可改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与下调p53表达、抑制缺血海马神经细胞的凋亡有关。