外伤性脾破裂诊治体会

脾破裂多由上腹直接或间接暴力致伤后引起，由于脾组织脆弱，血流丰富，伤后出血量大，抢救不及时易发生失血性休克而危及生命，它是腹部外伤中常见的损伤，在腹部外伤中约占20％-40％。笔者对我院1997～2008年收治的外伤性脾破裂22例进行回顾性分析，并将诊治体会报告如下：     

脂多糖诱发肝损伤机理的初步研究

目的:探讨LPS肝损伤的信号转导途径及LPS诱导肝细胞凋亡的规律。方法:Balb/c小鼠腹腔注射LPS建立内毒素血症模型,在不同时间点取其肝脏,HE染色观察病理改变,RT-PCR法检测肝组织TLR4的表达。TUNEL法检测肝细胞凋亡,免疫组化法检测bax、bcl-2、Fas、Fasl表达。结果:LPS注入腹腔后24h小鼠肝脏开始出现明显病理改变;3～6h肝细胞凋亡达高峰,12h后明显减少;肝脏TLR4在LPS注射3h后显著下调,6～12h明显受抑制,24h后则基本恢复;LPS刺激后3～6h肝脏bax、Fas表达达高峰,而bcl-2、Fasl表达在6～12h达到高峰,随后都逐渐下降。结论:LPS刺激肝脏后,肝损伤呈时间依从性,凋亡是其细胞死亡方式之一。LPS刺激后,肝脏TLR4表达呈时间依从性,TLR4表达下调可能是对LPS产生的耐受现象,是机体抗损伤的一种保护性的下调。LPS所致肝细胞凋亡是多因素作用的结果。     

新形势下妇幼卫生改革与发展的思考

妇幼卫生改革 ,关键是转变观念 ,要树立妇幼卫生服务新观念 ,市场服务新观念 ,服务效益新观念。同时 ,也要同医学模式转变相适应。妇幼卫生的改革与发展 ,应当把公共卫生服务作为工作重点 ,真正走进社区和家庭 ,拓展妇幼保健的内涵与外延 ,加强具有特色的保健与临床专科建设 ,重视人才培养和新技术的引进与应用 ,并要依法开展妇幼卫生工作 ,加大《母婴保健法》监督执法力度     

基于16S rDNA测序研究当归芍药散调控肠道菌群改善SAMP8小鼠认知能力的作用机制

目的 基于16S rDNA测序研究当归芍药散（DSS）对阿尔茨海默病（AD）模型小鼠SAMP8肠道菌群的影响。方法 按随机数字表法，将24只7月龄SAMP8小鼠分为DSS低、中、高剂量组（14.4、28.8、57.6 g·kg^-1·d^-1）及模型组，另取6只同月龄SAMR1小鼠，为正常组。连续给药8周后，采用16S rDNA高通量测序技术检测小鼠粪便肠道菌群的变化；Morris水迷宫实验评价小鼠定位航行与空间探索能力；尼氏染色观察海马CA1区神经元病理变化；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测海马β淀粉样蛋白（Aβ）和Tau蛋白过度磷酸化（p-Tau）蛋白含量。结果 与正常组比较，模型组小鼠肠道菌群α多样性降低、β多样性明显改变；逃避潜伏期延长（P<0.05），穿越平台象限次数和平台象限停留时间明显减少（P<0.05）；CA1区神经元尼氏小体数量明显减少（P<0.05）；Aβ和p-Tau蛋白水平明显升高（P<0.05）。DSS干预后，各组小鼠肠道菌群α多样性均增加，中、高剂量组β多样性与正常组相似、以中剂量组效果最佳；在门水平上，厚壁菌门丰度明显增加（P<0.05），拟杆菌门、变形菌门丰度明显降低（P<0.05）；在属水平上，乳酸杆菌等菌属丰度明显增加（P<0.05），拟杆菌、幽门螺杆菌、理研菌、副杆状菌、萨特氏菌、黏液性菌等菌属丰度明显降低（P<0.05）；小鼠逃避潜伏期明显缩短（P<0.05）、穿越平台象限次数和平台象限停留时间明显增加（P<0.05）；尼氏小体数量明显增加（P<0.05），Aβ和p-Tau蛋白水平明显降低（P<0.05）；Pearson相关性分析表明黏液性菌、拟杆菌和萨特氏菌菌属丰度与SAMP8小鼠认知能力呈负相关，乳酸杆菌和Butyricimonas菌属丰度与SAMP8小鼠认知能力呈正相关。结论 DSS可改善SAMP8小鼠认知能力，其作用机制可能与调节肠道菌群多样性、群落组成有关。     

LC-MS/MS测定人血浆中依折麦布和总依折麦布的含量及其应用

目的 建立人血浆中依折麦布(EZE)和总依折麦布(EZE-T)的LC-MS/MS测定方法,并用于依折麦布片人体生物等效性(bioequivalence,BE)研究。方法 分别采用直接沉淀法和酶解后沉淀法处理血浆样品。内标为依折麦布-d4(EZE-d4)。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC?BEH C18(2.1*50mm,1.7μm),流动相为0.1%乙酸-乙腈(A),0.1%乙酸-水(B),梯度洗脱,流速0.2 mL.min-1。在ESI源负离子模式下使用离子对m/z 408.2→271.0(EZE)和m/z 412.2→271.1(EZE-d4)进行MRM定量分析。对健康受试者口服相同剂量的受试制剂或参比制剂依折麦布片后的血药浓度进行定量分析。结果 血浆中内源性物质不干扰待测物定量,EZE、EZE-T及EZE-d4不存在相互干扰和/或相互转化。人血浆中EZE和EZE-T的定量范围分别为0.1～20,1～200 ng.mL-1,线性关系良好。待测物与内标提取回收率均在102.4%~109.8％之间;内标归一化基质效应因子均在98.5%~99.4%,CV均<5%;批内、批间准确度偏差均<15%,CV均<10%。用本法测定得到的EZE和EZE-T的浓度水平及获取的药代参数与文献报道一致,ISR复测值与原测值的偏差均<10%。结论 本法特异性强、灵敏、准确,重复性好,所需样本体积少,满足依折麦布片人体BE研究的定量分析需求。     

树突状细胞在老化中的作用

树突状细胞目前普遍被认为是最强有力的抗原提呈细胞，对体内静息T细胞的激活最有效率，因此，作为免疫系统的始动者，它们正在成为免疫学研究的核心，并被认为是免疫疗法中很有用的工具。它们也可能弥补缺陷T细胞的反应能力。除去树突状细胞在分子和细胞生物学的许多最新进展外，仅有少数文献提及树突状细胞与老化的课题。     

进口胶囊内镜在533例小肠临床检查中的结果分析

目的：对进口胶囊内镜在小肠临床检查中的结果进行分析。方法回顾性分析533例进口胶囊内镜检查的患者的临床资料及检查结果。结果胶囊内镜回盲瓣通过率为92．5％（493／533）,其中一代进口胶囊内镜完成全小肠检查率为82．7％（153／185）,而二代进口胶囊内镜完成全小肠检查率为97．7％（340／348）,2例（均为克罗恩病患者）胶囊滞留。消化道出血组小肠病因检出率65．6％（124／189）,明显高于其他各组（ P＜0．01）。其他各组小肠疾病检出率为腹泻组42．6％（23／54）、腹痛组18．9％（47／249）、腹胀组21．4％（3／14）。结论进口胶囊内镜安全、可靠,对不明原因消化道出血患者尤为适用,但需尽量排除肠梗阻,避免发生滞留风险,二代胶囊内镜较一代能更好地完成全小肠检查,小肠低张CT检查可作为胶囊内镜的前提。     

当归芍药散含药血清调控UPP途径对Aβ1-40损伤PC12细胞的保护作用及机制

目的 探讨当归芍药散（DSS）含药血清对β淀粉样蛋白（Aβ）_1-40损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞的保护作用及对泛素-蛋白酶体途径（UPP）的调控作用机制。方法 采用Aβ_1-40干预PC12细胞制备损伤模型。实验分为空白组、模型组、DSS含药血清高、中、低剂量组（10%、5%、2.5%）。细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞Aβ和磷酸化（p）-Tau蛋白含量,免疫荧光细胞化学（ICC）标记UPP重要靶点泛素（Ub）、泛素连接酶E3（E3）、26S蛋白酶体、泛素羧基端水解酶1（UCHL1）和UCHL3蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Ub、E3、26S、UCHL1、UCHL3 mRNA和蛋白的表达。结果 根据CCK-8实验结果,筛选5 μmol·L^-1、48 h为PC12细胞损伤最佳造模条件。与空白组比较,模型组细胞存活率降低（P<0.05）、凋亡率升高（P<0.05）,Aβ及p-Tau表达升高（P<0.05）,Ub蛋白及mRNA表达升高,26S、E3、UCHL1+3蛋白及mRNA表达降低（P<0.05）。与模型组比较,DSS中剂量组细胞存活率升高（P<0.05）;DSS各剂量组细胞凋亡率下降（P<0.05）;DSS各剂量组Aβ含量降低（P<0.05）,DSS高、中剂量组p-Tau 含量降低（P<0.05）;DSS各剂量组Ub mRNA表达降低（P<0.05）,DSS各剂量组26S mRNA表达升高（P<0.05）,DSS中剂量组UCHL1 mRNA表达升高（P<0.05）,DSS高、中剂量组E3和UCHL 3mRNA表达升高（P<0.05）;DSS各剂量组Ub蛋白表达降低,DSS高、中剂量组26S、E3、UCHL1+3蛋白表达升高,以DSS中剂量效果最佳。结论 DSS含药血清可提高细胞存活率、降低细胞凋亡率、清除Aβ和p-Tau蛋白沉积,对Aβ_1-40损伤PC12细胞有保护作用,其作用可能是通过调控UPP降低Ub表达及升高26S、E3、UCHL1及UCHL3表达来发挥。     

藿香正气系列制剂研究与开发的思考

藿香正气系列制剂是在传统藿香正气散处方和制法基础上研究和开发而得,以适应不断变化的剂型需要。但藿香正气系列制剂开发过程中存在处方组成差异、组方原则差异、同一药味提取工艺不同等三方面的问题,影响其制剂质量的安全性、有效性和稳定性,其科学性和合理性值得进一步的探讨和研究,并在此基础上,探索出一条符合中医药特色的中药名优制剂科研思路。     

HPLC法测定清利通胶囊中栀子苷的含量

目的:建立清利通胶囊中栀子苷的含量测定方法。方法:采用DiamonsilC18(4.6×150mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-水(32:78);流速为1.0mL.min-1;检测波长为238nm;柱温为25℃。结果:栀子苷浓度在0.0300～0.3025μg.mL-1(r=0.9996)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为100.14%,RSD值为2.02%,规定清利通胶囊中栀子苷含量不低于5.7mg.g-1。结论:该方法简便、可靠、灵敏,专属性强,重现性好,可用于清利通胶囊中栀子苷的含量测定。