Survivin反义寡核苷酸对k562细胞周期及c-myc的影响

目的探讨凋亡抑制基因survivin的反义寡核苷酸对白血病细胞k562细胞周期及cmyc的影响。方法实验分反义组、无义组、脂质体组、空白组,转染后24、48小时流式细胞仪检测细胞周期;免疫组织化学方法检测survivin、cmyc蛋白水平。结果反义寡核苷酸作用后,k562细胞被阻滞在G0/G1期,G0G1期细胞明显增多,S期及G2M期细胞明显减少,细胞周期进程受到明显阻滞,而无义组、脂质体组、空白组细胞周期进程无明显变化(P<0.05);反义寡核苷酸作用24小时后细胞内survivin及cmyc的表达水平下降,但与无义组、脂质体组、空白组比较无显著性差异(P>0.05),而48小时后survivin及cmyc表达水平进一步降低,与各对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论survivin反义寡核苷酸能阻滞K562细胞于G0/G1期、并下调cmyc蛋白的表达。     

survivin反义寡核苷酸对K562细胞增殖的抑制作用

目的:采用反义寡核苷酸技术研究凋亡抑制基因survivin对白血病细胞增殖的影响.方法:1.细胞抑制率实验分5组:111nmol/L反义寡核苷酸组、333nmol/L反义寡核苷酸组、555nmol/L反义寡核苷酸组、777nmol/L反义寡核苷酸组、空白组.转染后24、48、72h收集细胞进行检测:用台盼蓝染色进行活细胞计数,计算细胞抑制率.2.细胞周期及survivin蛋白表达实验分4组:555 nmol/L寡核苷酸组、544nmol/L无义组、脂质体组、空白组,转染后24、48h流式细胞仪检测细胞周期;免疫组织化学方法检测survivin蛋白水平.结果:不同浓度的反义寡核苷酸对K562细胞的细胞抑制率均高于空白组(P<0.05),并随反义寡核苷酸的浓度增大抑制率增加;随作用时间延长,抑制作用越明显,抑制率与浓度及时间呈正相关;555nmol/L反义寡核苷酸作用后,K562细胞被阻滞在G0/G1期,细胞周期进程受到明显阻滞,而无义、脂质体、空白组细胞周期进程无明显变化(P<0.05);反义寡核苷酸作用48h后survivin蛋白表达水平明显降低,与各对照组比较有显著性差异(P<0.05).结论:survivin反义寡核苷酸能抑制K562细胞的增殖.     

两例AMN基因突变的Imerslund-Grasbeck综合征

<正>病例资料病例1:女,4岁7个月时因“贫血1年余,加重1个月”第1次住院。除贫血外,伴生长发育迟缓、反复上呼吸道感染,有茶色尿。无咳嗽、呕吐、腹痛、腹泻,无骨关节疼痛及浮肿,无皮肤黏膜出血、黑便、血尿。院外血常规检测提示血红蛋白波动在54～101g/L,骨髓细胞学提示增生性贫血,无输血史。系G5P3,不挑食。父母近亲婚配,同胞中G1P1,4岁时因贫血去世(具体原因不详),G2P2及G6P4均体健,G7P5为病例2,     

重组腺病毒Adeasy-HA117载体的构建及其在K562细胞的表达

目的:构建携带耐药相关基因HA117的高滴度重组腺病毒,转染K562细胞,检测其在K562细胞中的表达情况.方法:用基因工程技术将ATRA相关耐药新基因HA117的cDNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,然后在细菌内与pAdeasy同源重组,后将重组腺病毒Adeasy-HA117经脂质体转染包装细胞HEK293,并收获原代的重组腺病毒Adeasy-HA117,经乒乓交互感染的方法扩增原代腺病毒,应用RT-PCR、荧光显微镜及流式细胞仪鉴定和检测重组腺病毒感染K562细胞后HA117的表达情况.结果:酶切罄定及PCR结果证明ATRA相关耐药新基因HA117重组腺病毒载体构建成功.携带新基因HA117重组腺病毒载体的效价达8.3×1011pfu/mL.RT-PCR检测到转染后K562细胞内HA117的表达.结论:成功获得携带新基因HA117的重组腺病毒,并能使其在K562细胞巾高表达.     

巯嘌呤治疗儿童急性淋巴细胞白血病相关毒副作用及其与TPMT基因多态性关系的研究

目的:观察CCLG-08方案中含有巯嘌呤的巩固和维持阶段急性淋巴细胞白血病(Acute lymphoblastic leukemia,ALL)简称急淋。患儿毒副作用的发生情况,检测急淋患儿巯嘌呤甲基转移酶(Thiopurine S-methyltransferase,TPMT)基因多态性,研究其与巯嘌呤相关药物毒副作用的关系。方法:观察急淋患儿巩固和维持阶段发生的以外周血白细胞显著减少、肝脏损害为主的毒副作用;采用等位基因特异性聚合酶链反应、限制性片断长度多态性和时间飞行质谱技术检测TPMT基因G238C、G460A、A719G多态性。结果:急淋患儿巩固化疗阶段外周血白细胞显著减少的血液系统毒副作用发生率是19.35%(n=24);维持治疗1个月以上,外周血白细胞显著减少的血液系统毒副作用发生率是13.82%(n=13),肝脏损害的发生率是10.64%(n=10);维持治疗Ⅰ和Ⅱ组急淋患儿的血液系统毒副作用和肝损害发生率没有显著的统计学差异。没有发现急淋患儿TPMT基因型与其巯嘌呤相关毒副作用间的相关性。结论:研究显示急淋患儿可以良好耐受CCLG-08方案中的巩固和维持治疗;汉族急淋患儿TPMT基因G238C...     

培门冬酶在儿童急性淋巴细胞白血病临床应用中的安全性评估

目的评估培门冬酶在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)临床应用中的安全性。方法本研究中所有ALL患儿都使用CCLG 2008方案规范诊治;接受培门冬酶治疗的条件是:(1)左旋门冬酰胺酶(L-Asp)皮试阳性;(2)L-Asp使用后出现不良反应。先后共有32例患儿由于对大肠杆菌L-Asp过敏而使用培门冬酶替代化疗共46次。使用培门冬酶治疗前和治疗后1周检查肝肾功能、凝血功能、淀粉酶、心肌酶谱、心电图和腹部B超,临床观察和检测使用培门冬酶后脏器功能和不良反应发生的情况。结果 46例次中无一例发生致死性不良反应。8例(17%)有转氨酶异常;总胆红素增高4例,以直接胆红素升高为主;血清总蛋白降低5例。8例(17%)有血浆纤维蛋白原浓度异常,7例降低,临床无凝血功能障碍和血栓等表现。7例(15%)有心血管系统受累,包括血压升高(1例)、心率减慢(2例)、CK-MB增高(5例)、肌钙蛋白增高(1例)、心电图异常(4例)。7例(15%)出现肾功能异常,以尿素氮增高(6例)为主,临床未发现肾功能不全的表现。3例(7%)发生高血糖症,无急性胰腺炎的病例发生。46例次培门冬酶治疗中,仅1例(2%)发生了典型的过敏反应,以明显的风团样皮疹伴瘙痒为主要表现,有一过性喉头异物感,经吸氧、镇静等处理后很快缓解。结论培门冬酶在很大程度上克服了L-Asp过敏反应致使用受限的弱点;培门冬酶的不良反应发生率低,发生不良反应的程度轻,安全性较高。推荐培门冬酶作为对L-Asp过敏的ALL患儿的替代治疗。其疗效有待进一步观察。     

误诊为急性早幼粒细胞白血病2例报道

急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia , APL）是一种特殊类型的急性髓细胞白血病（acute myeloid leukemia ,AML）,t（15;17）（q22;q21）易位形成的PML／RARα基因是APL的特征性分子生物学标记［1］。目前认为有t（15;17）（q22;q21）和（或）PML／RARα基因表达,即使细胞形态学和免疫表型不符合经典的APL也可诊断本病［2］,但其他疾病或其他类型的白血病仍有可能与A PL相混淆。为减少误诊误治,现将本院收治的2例误诊为A PL的患儿资料进行分析,现报道如下。     

新生儿期纤维蛋白原降低研究进展

鉴于FIB在凝血过程中具有重要作用,临床工作中常规将其下降水平与出血发生风险相联系,并给予预防性的干预措施。然而对于新生儿期FIB正常参考水平、FIB降低的原因以及FIB 降低后出血发生的风险、临床干预措施,均缺乏统一认识。现就以上内容对新生儿期FIB降低的研究进展作一综述.     

基于流式细胞术的可测量残留病对儿童急性髓系白血病预后意义的前瞻性研究

目的 通过分析以可测量残留病（measurable residual disease,MRD）为导向的风险分层治疗,评估MRD在儿童急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）治疗过程中的预后价值。 方法 前瞻性纳入93例AML患儿,按照初诊时遗传学异常、诱导治疗Ⅰ后MRD及骨髓细胞学决定的风险分层完成2015-AML-03方案化疗。以多参数流式细胞术动态监测MRD,分析MRD对3年累积复发（cumulative recurrence,CIR）率、无事件生存（event-free survival,EFS）率、总生存（overall survival,OS）率的影响。 结果 93例AML患儿中,3年CIR率为48%±6%,中位复发时间是11（范围：2~32）个月,3年OS率为65%±6%,3年EFS率为50%±5%。诱导治疗Ⅰ和强化治疗Ⅰ后MRD阳性患儿的3年CIR率均高于MRD阴性患儿,3年EFS率、OS率均低于MRD阴性患儿（P<0.05）。初诊时低危的MRD阳性患儿调整化疗强度后的3年CIR率、EFS率、OS率与MRD阴性患儿相比,差异无统计学意义（P>0.05）。多因素分析表明,强化治疗Ⅰ后MRD阳性是AML患儿3年OS率的危险因素（P<0.05）。 结论 MRD对儿童AML预后有预测价值;利用基于MRD的风险导向治疗,合理应用化疗可能改善儿童AML患儿的整体预后。 引用格式:     

miR-19b在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及临床意义

目的研究miR-19b在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达及其与ALL临床特征和PTEN mRNA表达的相关性。方法采用实时定量PCR的方法检测67例儿童ALL(初诊组38例、完全缓解组20例、难治复发组9例)骨髓单个核细胞(BMMNC)中miR-19b的表达,分析其表达与临床特征及PTEN mRNA表达水平的关系。以15例原发性免疫性血小板减少症(ITP)患儿作为对照组。结果 miR-19b在初诊组和难治复发组的表达量显著高于完全缓解组和对照组(P<0.01)。动态观察6例ALL患儿发现完全缓解后miR-19b表达量较初诊时显著降低(P<0.05)。miR-19b高表达与外周血高WBC计数(≥50×109/L)、危险度分型(中、高危)、脾肿大、BCR-ABL融合基因阳性有相关性(P<0.05),与发病年龄、性别、免疫分型、形态学分型、MLL-AF4融合基因、肝及淋巴结肿大、早期泼尼松反应等因素无相关性(P>0.05)。miR-19b与PTEN mRNA表达量无相关性(r=0.107,P>0.05)。结论 miR-19b可能在儿童ALL发生、发展及不良预后中发挥一定作用,未发现miR-19b表达量同PTEN mRNA的表达量存在相关性。