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51.
培养液是细胞培养的基本要素,选择适当的培养液是人杂交瘤技术成功的重要因素之一。我们分析比较了三种商品化培养液RPMI1640、DMEM、IMDM对分泌人单抗杂交瘤细胞的培养效应,包括对维持细胞的活力、增殖、克隆效率及抗体分泌等参数的观察比较,发现RPMI1640对人-(人×鼠)杂交瘤细胞“87-3”与人-鼠杂交瘤“87-3”培养效应最佳,为首选培养液。 相似文献
52.
抗Ig融合蛋白Fc段单克隆抗体的制备、鉴定与应用研究 总被引:7,自引:9,他引:7
目的:制备并鉴定抗Ig融合蛋白Fc段的单克隆抗体(mAb),建立用于检测Ig融合蛋白的夹心ELISA法和纯化Fc融合蛋白的亲和层析法。方法:以hBCMA—Ig融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合制备抗Fc段mAb,用ELISA等方法鉴定mAb的Ig亚类、表位以及种属特异性,建立用于检测Ig融合蛋白的夹心ELISA法;Western blot检测mAb对变性Ig融合蛋白的反应性。将mAb与Sepharose4B交联,制备亲和层析柱,对LAIR1-Ig融合蛋白进行纯化。结果:获得7株稳定分泌抗Fc段mAb的杂交瘤(FMUFcl-FMUFc7)。利用FMUFc4作为包被mAb,FMUFc5作为酶标记mAb,成功地建立了检测Ig融合蛋白的ELISA法,敏感度达到2μg/L;在7株mAb中,FMUFc6可用于Ig融合蛋白的western blot检测。用FMUFc 6mAb制备的亲和层析柱,可有效地纯化LAIRl—Ig融合蛋白。结论:成功地制备了抗Ig融合蛋白Fc段的mAb,建立了可用于Ig融合蛋白检测和纯化的方法,为Ig融合蛋白的应用提供了有力手段。 相似文献
53.
目的研究趋化性细胞因子受体在体外长期培养的人Te1和Tc2细胞系中的表达。方法将新鲜分离的PBMC在特定细胞因子及细胞因子抗体存在条件下,定向诱导为Ⅰ型和Ⅱ型T细胞系,用免疫荧光染色结合流式细胞术分析鉴定,并以膜表面及胞内三色流式细胞术检测趋化性细胞因子受体在不同T细胞亚群的表达。结果①在Ⅰ型和Ⅱ型T细胞整体水平上,CXCR4的表达水平接近,CXCR3和CCR5的表达在Ⅰ型T细胞明显高于Ⅱ型T细胞,CCR3在2种T细胞系的表达水平均较低,但在Ⅱ型T细胞的表达略高于Ⅰ型T细胞;②趋化性细胞因子受体在Tc1和Tc2亚群细胞的表达与上述结果类似,即CXCR的表达水平接近,CXCR3和CCR5的表达在Tc1高于Tc2,CCR3的表达水平较低,但在Tc2则略高于Tc1。结论趋化性细胞因子受体在Tc1和Tc2亚群的表达具有差异性。 相似文献
54.
9.1C3分子是一种参与NK、巨噬细胞及LAK细胞杀伤过程的重要细胞表面分子,主要表达于外周血单个核细胞表面。本文运用分子生物学技术,从分泌9.1C3MCAb的杂交瘤细胞中提取总RNA,经反转录、PCR分另11分离了9.1C3McAb轻链可变区(VL)基因及重链可变区(VH)基因,并用全自动荧光DNA序列分析仪对9.1C3VH、VL基因序列进行了分析。结果表明:9.1C3VH基因为351bP,编码117aa残基,9.13VL为324bP,编码108aa残基;从推导出的氨基酸序列分析证实9.1C3VH、VL序列均符合小鼠lg可变区的氨基酸序列特征;根据Kabbat分类体系,9.1C3VH隶属Ig重链第Ⅱ(C)亚组,9.1C3VL隶属小鼠IgK链第Ⅴ亚组。9.1C3VH、VL基因的克隆成功为其单链抗体的构建、表达奠定了良好的物质基础。 相似文献
55.
目的:LAIR-1/LAIR-2(CD305/306)与配体结合亲和力的比较。方法:应用不同浓度混合的LAIR-1和LAIR-2融合蛋白,同时或先后与配体表达细胞孵育后,用特异性LAIR-1或LAIR-2单克隆抗体(mAb)进行免疫荧光染色和流式细胞术(FCM)分析,比较LAIR-1和LAIR-2融合蛋白与细胞结合的百分率的变化及相互竞争情况。结果:LAIR-1和LAIR-2膜型配体的分布较广泛,人和小鼠LAIR受体与配体的结合具有相互交叉的特点。LAIR-2能够明显阻断LAIR-1与其膜型配体的结合,而LAIR-1对LAIR-2与其配体的结合无影响。结论:LAIR-1和LAIR-2可能结合相同的膜型配体,但LAIR-2结合配体的亲和力明显高于LAIR-1结合的亲和力。此结果为深入探讨LAIR家族免疫调节的分子机制提供重要的实验依据。 相似文献
56.
金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》2006,22(5):692-692,F0003
国际人类细胞分化分子(HCDM)执行委员会会议于2006年5月下旬在加拿大魁北克市举行。同时在国际第23届分析细胞学学会(ISAC)期间召开了HCDM专题讨论会。笔者参加了这两个会议,现将有关人类CD命名和研究的新动念简介如下。 相似文献
57.
一种高度敏感的改良的IL—1检测方法 总被引:5,自引:0,他引:5
采用CTLL-2检测IL-1诱导小鼠胸腺瘤细胞系EL_4产生IL-2活性,建立了一种间接检测IL-1的方法。通过对多种影响因素进行探讨,选择了较适的诱导血清浓度,细胞浓度,诱导时间和转移诱导上清稀释度,从而使检测IL-1的敏感性达10~(-3)~10~(-4)U/ml(2.5~25×10~(-4)Pg/ml,约为小鼠胸腺细胞检测方法的10~2~10~3倍),整个检测流程可在40小时内完成。若用CTLL-2和EL_4细胞同时培养的一步法检测,敏感性约为10~(-1)U/ml,但30小时内可完成检测。此法不受高浓度rHuTNF-α、rHuTNF-β、rHuIL-6干扰,IL-2、ConA、PHA、LPS和SEB对检测系统只有较弱的影响,但A23187可明显地干扰检测系统。因此,本方法可用于基础和临床研究过程中不同来源的IL-1生物学活性检测。 相似文献
58.
吾文泉 《南通大学学报(哲学社会科学版)》2001,17(1):73-76
19世纪末的文学忧郁和悲观等病症对20世纪现代派文学的影响是深远的,现代派文学经历了从以丑为美到迷惘、异化、荒诞和虚无的文学创作轨迹,显示了从19世纪末传染到的综合症状以及作家们改革和拓荒的勇气.现代派文学对心灵的解剖是深刻的,语言形式的反叛也是彻底的. 相似文献
59.
目的 观察黄芩素、苦参碱对弥漫大B淋巴瘤OCI-LY10细胞株增殖、凋亡的影响。方法 CCK8检测增殖情况,Western Blot检测凋亡相关蛋白表达。结果 黄芩素能促进OCI-LY10细胞株的增殖,而苦参碱能明显抑制OCI-LY10细胞株增殖,随时间以及浓度的增加而增加,IC50在1.53~2.25mg/mL。苦参碱单药组明显降低Bcl-2蛋白的表达,对Bax轻度降低,下调Bcl-2/Bax蛋白比值。结论 黄芩素体外能促进OCI-LY10细胞株的增殖;苦参碱能明显抑制OCI-LY10细胞的增殖,并且能促进细胞凋亡。 相似文献
60.