肝癌特异性γ—谷氨酰转肽酶相关抗原的提纯及其免疫检测的初步临床应用

本文介绍一种简便的肝癌特异性γ-谷氨酰转肽酶相关抗原(GGT-ⅡAg)的免疫定量检测方法,正常参考值为2.7±2.1mg/dl,肝癌组显著升高(12.2±10.7mg/dl),阳性率为11/15(73.3％)。7例AFP阴性肝癌中有4例GGTⅡAg阳性。本文提示GGTⅡAg可作为肝癌的一种较实用的新的检测指标。     

CagA 阳性Hp培养滤液诱导转化的胃上皮细胞表达泛素活化酶E1基因

目的 研究CagA阳性Hp培养滤对人胃粘膜上皮细胞（GES－1）作用的机制。方法 将CagA阳性Hp培养滤液诱导恶性转化的GES－1细胞与CagA阴性Hp培养滤液处理的GES-1细胞进行mRNA差异显示，以寻找Hp致胃癌发病的相关基因。结果 mRNA差异显示片断之一命名为PFN1，仅在Hp(CagA^ )培养滤液处理的GES－1细胞中表达，斑点杂交结果与之一致。与Gene Bank资料序列同源性比较分析提示PFN1与泛素活化酶E1同源性99％，即为人类泛素活化酶E1基因的一部分。结论 泛素－蛋白水解酶复合体通路中的泛素活化E1在与了Hp的CagA诱导的胃上皮细胞恶化转化过程。     

血清单胺氧化酶同功酶对肝病诊断价值的初步探讨

本文报告105例肝病患者和49名正常对照血清单胺氧化酶同功酶(MAOi)的检测结果.将血清MAOi分成3带,发现慢性肝病时血清MAOiⅢ%增高,肝硬化较明显.通过与血清ChE、MAO、ADA及各肝病组间的阳性率比较,提示血清MAOi检测可提高肝硬化早期诊断的敏感性,并有助于其病情判断     

血清α-L-岩藻糖苷酶检测法诊断肝癌的初步探讨

在Troost和Levvy的基础上经过综合改良建立了血清α-L-岩藻糖苷酶(AFu)的检测方法,并就有关方法学问题进行了探讨,正常参考值为2～5U,≥10.5U提示肝细胞肝癌(HCC)。初步临床应用的结果证明,AFu对HCC的诊断阳性率为78.8％,特异性90.9％,AFP(-)者AFu的检出率亦达81.8％。     

中国人IκBα基因的克隆和序列分析

目的 克隆中国人IκBα基因，了解其与欧美人种有无不同，为进一步的研究工作打下基础。方法 从中国人外周血中分离单个核细胞，刺激细胞贴壁30min后提取总RNA。应用RT－PCR法扩增目的基因，胶回收法纯化。将其连接到pGEM-T质粒载体，进行测序并与已知IκBα序列进行同源性分析。结果 中国人IκBα基因与genebank中发表的人IκBα基因序列仅2个碱基不同且所编码氨基酸无改变。结论 我们已成功克隆了中国人IκBα基因。同源性分析表明，其与genebank中所报道的基因序列基本一致。     

NF-κB超抑制物IκBαM重组腺病毒的构建

目的 在克隆IκBα基因并构建IκBαM的基础上，构建重组腺病毒AdIκBαM。方法 将IκBαM克隆至穿梭质粒，线性化后与骨架质粒共同转染BJ5183菌，构建重组腺病毒质粒。酶切及PCR法鉴定；将其线性化后转染293细胞，观察绿色荧光以确定转染结果，以Western blot法检测目的基因表达。结果 凝胶电泳及行酶切鉴定表明同源重组成功；一PCR产物测序证明确为lxBaM；以重组腺病毒质粒转染293细胞，见绿色荧光；感染293细胞得到大量病毒。结论 成功构建了IκBαM重组腺病毒，为进一步研究奠定了基础。     

应用巢式PCR法克隆N端部分缺失的IкBα基因

目的克隆中国人N端部分缺失的IкBα基因,为进一步应用其进行抗肿瘤基因治疗研究打下基础.方法从中国人外周血中分离单核细胞,采用多聚赖氨酸贴壁刺激0.5h后提取总RNA.应用逆转录PCR法,以自行设计的引物扩增全序IкBα基因,应用巢式PCR法扩增N端部分缺失的IкBα基因,用TA克隆技术将目的基因连接到pGEM-T质粒载体中,进行测序并与已知IcBa序列进行同源性分析.结果测序结果表明我们所克隆的目的基因,其基因序列与CenBank中人IкBa基因序列仅有5个碱基不同但所编码氨基酸仅1个发生改变.结论已成功克隆了中国人N端部分缺失的IкBα基因,为进一步应用N端部分缺失的IкBα基因进行抗肿瘤基因治疗研究打下了基础.