Heparanase antisense oligodeoxynucleotide inhibits angiogenesis and metastasis of human mammary carcinoma cell xenografts in nude mice

Objective： To evaluate the inhibitory effect of heparanase antisense oligodeoxynucleotide （AS-ODN） on the angiogenesis and metastasis of human mammary carcinoma cell xenografts in nude mice. Methods： The AS-ODN complementary to the start codon region of heparanase mRNA and its control, scrambled nonsense oligodeoxynucleotide （NS-ODN） were designed and synthesized. A subcutaneous growth model and an acute hematogenous metastasis model of human mammary carcinoma were established in nude mice and were treated with ODNs. The heparanase expression in tumor was evaluated by RT-PCR and Western blot. The microvessel density （MVD） was measured by immunohistochemistry for factor VS. The tumor volume was calculated and lung metastatic nodules were counted. Results ： The heparanase expression, MVD, tumor volume and lung metastatic nodules in AS-ODN treated group were significantly decreased compared with that in NS-ODN treated group and that in PBS group （P〈0.01）. Conclusion ： Heparanase AS-ODN has significant inhibitory effect on the angiogenesis and metastasis of human mammary carcinoma cell xenografts in nude mice.     

血浆(1-3)-β-D-葡聚糖对侵袭性真菌感染诊断价值的荟萃分析

目的采用荟萃分析评价血浆(1,3)-β-D-葡聚糖检测对侵袭性真菌感染的诊断价值。方法采用STATA11软件分析纳入研究项目血浆(1,3)-β-D-葡聚糖浓度诊断侵袭性真菌感染总的灵敏度、特异度,阳性似然比和阴性似然比。结果纳入的31组研究数据分析显示总的灵敏度,特异度,阳性似然比和阴性似然比分别为0.79(95%CI,0.73～0.85),0.86(95%CI,0.80～0.90),5.64(95%CI,3.818～8.352),和0.242(95%CI,0.179～0.326)。结论荟萃分析显示血浆(1,3)-β-D-葡聚糖检测对于诊断IFI有较高的临床价值。     

多学科合作模式下PICC导管体内断裂漂移入心脏的急救护理与原因分析

总结1例淋巴瘤病人经外周静脉置入中心静脉导管后41 d体内断管漂移入心脏的护理。护理要点包括断管后的紧急处理、病情观察、心理护理、健康宣教等。通过多学科合作急救和护理,导管断端顺利取出,病人安全出院。     

实时定量PCR应用中的问题及优化方案

实时定量PCR是利用PCR反应过程中所产生的荧光强度进行实时检测的定量PCR反应。目前，该方法已在生命科学领域得到了广泛的应用，本文对其应用过程中存在的主要问题加以分析，探讨优化实验方法。     

乳腺癌klk6基因表达的实时荧光定量法的建立及初步应用

目的建立人乳腺癌相关基因组织型激肽释放酶基因家族成员Kallikrein6(klk6)mRNA荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQPCR)检测方法,以检测正常乳腺和乳腺癌组织中klk6基因表达水平。方法以GAPDH作参照,用SYBRGreenI荧光定量技术,建立检测klk6mRNA的FQPCR方法;并检测32份正常乳腺和乳腺癌组织标本的循环阈值(Ct),然后,通过REST软件分析klk6mRNA的表达水平。结果FQPCR方法对GAPDH和klk6mRNA的扩增效率分别为0.90和0.95,批内变异系数(CV)分别为1.0%～2.1%和0.8%～1.2%,批间CV分别为3.2%和3.9%。正常乳腺和乳腺癌组织的klk6对GAPDH的相对表达量分别为0.017±0.009和0.040±0.017。用REST软件分析,提示乳腺癌组织klk6表达水平上调。结论建立的klk6mRNAFQPCR检测方法简便,特异,重复性好,可信度高,可用于klk6基因表达水平与肿瘤相关性研究。     

汗孔角化症20例临床病理分析

汗孔角化症是一种遗传性皮肤病,临床上分为斑块型、浅在播散型、播散性浅在性光化型(DSAP),线状型及点状型5种.     

可诱导共刺激分子和小鼠免疫球蛋白融合基因的分泌表达及生物学活性

目的：为获得重组可诱导共刺激分子胞外段与小鼠免疫球蛋白的融合蛋白（ICOS-Ig）并研究其生物学活性，以探讨它作为免疫拮抗剂阻断ICOS／B7RP-1共刺激通路的作用。方法：克隆编码人可诱导共刺激分子（ICOS）胞外片段，与编码小鼠免疫球蛋白IgG恒定片段（Ig）的基因融合，构建ICOS-Ig融合基因及其分泌型真核表达载体pSecTag2／Hygro A-ICOS-Ig；构建融合蛋白的稳定真核表达细胞株，用Western blot和ELISA法检测其表达、流式细胞仪（FACS）检测其配体结合活性、混合淋巴细胞反应（MLR）及细胞因子检测测定其生物学活性。结果：核苷酸序列测定显示克隆基因的核苷酸与Genebank序列一致：ELISA和Western blot检测表明转染细胞有分泌型重组蛋白的表达，其含量可达5～25μg／ml；该重组蛋白有配体结合活性，可体外抑制淋巴细胞增殖、减少IL-2、IFN-γ的分泌。结论：重组ICOS-Ig融合基因及其真核表达载体的构建完成并获得高效表达，该重组蛋白具有配体结合活性，可在体外通过抑制ICOS／B7RP-1共刺激通路抑制淋巴细胞增殖及细胞因子分泌。     

霉酚酸酯治疗儿童Ⅳ型狼疮性肾炎疗效观察

目的观察霉酚酸酯对儿童Ⅳ型狼疮性肾炎的临床疗效.方法 16例儿童狼疮性肾炎,临床类型均为肾病综合征,经肾活检诊断为Ⅳ型狼疮性肾炎.其中11例初始即采用霉酚酸酯联合激素治疗,另5例为环磷酰胺冲击疗法加泼尼松治疗6个月未能明显改善者,改为霉酚酸酯联合激素治疗.霉酚酸酯剂量为每日600mg/m2(最大1～1.5 g),加用泼尼松龙口服每日1～2mg/kg,疗程＞6个月(6.5～18月).结果随访6个月时16例中缓解10例,部分缓解6例;随访12个月时缓解达13例,部分缓解3例;未发生明显副反应.结论霉酚酸酯联合肾上腺皮质激素治疗儿童Ⅳ型狼疮性肾炎,有较好疗效.     

上海市中小学生尿液筛查的探索

目的探讨上海市中小学生血尿(隐血)和/或蛋白尿的检出率并评价筛查的方法和意义。方法2003～2005年,分别采用单一尿液试纸目测法(A)或尿液试纸机测法联合尿沉渣镜检/磺基水杨酸法(B)检测上海市46171名中小学生晨尿标本中的血尿(隐血)和蛋白尿。部分(27796例)一次尿检阳性者于10～14d后留尿复检。观察结果分三组(单纯血尿、单纯蛋白尿、血尿合并蛋白尿)随访。结果①46171名学生一次尿液标本阳性检出率>5.00%;27796名学生中二次尿液标本检测均阳性者占1.00%。不同筛查方法的阳性检出率不同。留尿一次检测,B方法较A方法阳性率低,特异度高;不论何种方法,留尿二次的阳性率均较留尿一次显著降低,特异度增高。②留尿一次,A、B方法的直接成本各约1.70元/人、2.90元/人;阳性者再次留尿检测的直接成本分别不超过1.90元/人、3.00元/人。A方法较B方法简便经济。A方法 留尿二次检测是既经济简便又有效提高特异度、降低假阳性率的筛查方法。③徐汇区初中生阳性检出率较小学生显著升高(P<0.05),12岁年龄组阳性检出率较其他各年龄组高;静安、杨浦区中小学生间差异无统计学意义。④10个月以上不完全随访确诊IgA肾病2例。结论中小学生尿液筛查是早期发现泌尿系统疾病的简便方法,阳性检出率需引起重视;选择最佳筛查年龄段优化成本效益值得进一步探讨;提倡多单位合作以建立尿液筛查全市网络。     

乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人乳腺癌细胞株侵袭力的抑制作用

目的　探讨乙酰肝素酶 (HPSE)反义寡脱氧核苷酸 (AS ODN )对人乳腺癌细胞株侵袭力的抑制活性。方法　设计合成分别互补于HPSEmRNA 5 '未翻译区和起始密码区的AS ODN1、AS ODN2及相应对照NS ODN1、NS ODN 2 ,在脂质体介导下以 2 5 0nmol/L终浓度转染人乳腺癌MDA43 5细胞 ,以RT PCR和Westernblot分别检测HPSEmRNA和蛋白表达 ,以基质凝胶侵袭实验检测细胞侵袭力。结果　AS ODN 2组的HPSEmRNA相对表达量、蛋白表达量和侵袭细胞数(0 .62± 0 .0 4、12 .70± 1.70、61.0 0± 9.0 0 )与脂质体对照组 (1.60± 0 .0 4、3 6.2 0± 2 .10、178.0 0±17.0 0 )和NS ODN2组 (1.48± 0 .0 3、3 5 .5 0± 2 .3 0、174.0 0± 2 0 .0 0 )相比较均显著降低 (P <0 .0 1) ;而AS ODN 1组与脂质体对照组和NS ODN1组相比较差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　互补于起始密码区的HPSEAS ODN可通过下调HPSE表达显著抑制人乳腺癌细胞株MDA43 5的侵袭力。