pIRES2-EGFP-BCL11B真核表达载体体外表达的动态分析

目的: 研究真核表达载体pIRES2-EGFP-BCL11B(B细胞白血病/淋巴瘤11B基因)在K293(人胚肾细胞株)和Raji(人Burkitt 淋巴瘤细胞株)细胞中的表达情况。方法: 分别利用脂质体和核转染技术将真核表达载体pIRES2-EGFP-BCL11B(pBCL11B)转染至K293和Raji细胞中,并设立空质粒组(pI2)和空转染组(MOCK)作为对照。通过荧光显微镜和流式细胞仪检测转染后48 h各组EGFP的表达,确定转染效率。通过荧光实时定量PCR(Taqman)技术检测转染后24 h各组BCL11B mRNA的表达情况,通过Western blotting技术检测转染后48 h各组BCL11B蛋白的表达情况。高分辨率活细胞成像系统动态观察转染后36-72 h重组质粒在Raji细胞增殖过程中的表达。结果: K293细胞pBCL11B、pI2和MOCK组的转染效率分别为(71.23±4.62)%、(70.45±3.58)%和(0.30±0.10)%,而Raji细胞各组的转染效率分别为(23.12±5.94)%、(22.48±6.25)%和(0.30±0.10)%。实时定量PCR和Western blotting结果显示转染后pBCL11B组在mRNA和蛋白水平均能检测到 BCL11B 基因的有效表达,BCL11B的表达量均明显高于pI2组和MOCK组(P<0.05)。活细胞追踪显示转染后36-72 h重组质粒在细胞中可稳定表达且转染后的细胞可以正常分裂增殖。结论: 系统分析了真核表达载体pIRES2-EGFP-BCL11B转染至K293和Raji细胞的表达变化特点,转染后可以检测到该基因的有效上调,研究结果为下一步转染正常人T细胞奠定了基础。     

2型糖尿病患者转换德谷门冬双胰岛素和门冬胰岛素30的安全性比较：一项倾向性评分匹配研究

目的 研究由其他胰岛素治疗转换为每日2次德谷门冬双胰岛素(IDegAsp)或门冬胰岛素30(IAsp30)在2型糖尿病患者中的安全性及血糖控制效果。方法 采用回顾性队列研究方法,选择本院2021年1月1日至6月30日期间由其他胰岛素转换为IDegAsp(IDegAsp组)或IAsp30(IAsp30组)治疗的2型糖尿病住院患者资料,胰岛素剂量调整使早餐前和晚餐前血糖达4.4～7.2 mmol·L^-1。收集胰岛素转换前(基线)和转换12周后(终点)胰岛素剂量、血糖及低血糖发生数据。采用倾向性评分匹配(PSM),根据2组患者的基线资料进行1 1匹配,并统计PSM后胰岛素剂量、血糖及低血糖发生情况。结果 PSM前IDegAsp组患者48例,IAsp30组103例,2组年龄、体重指数、胰岛素剂量比较有显著差异(P <0.05)。PSM后2组患者各43例,基线资料比较无显著差异(P> 0.05)。PSM后,观察终点IDegAsp组餐前胰岛素、总胰岛素剂量均显著低于IAsp30组(P <0.05);2组均无严重低血糖事件发生,虽IDegAsp组非严重低血糖事...     

干扰素α治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎应答不佳的优化疗效研究

目的 观察干扰素α（IFNα）联合阿德福韦酯（ADV）和替比夫定（LdT）序贯治疗对IFNα治疗应答不佳的HBeAg阳性慢性乙型肝炎（CHB）的临床疗效.方法 选择2010年2月至2013年4月浙江省绍兴市第六人民医院收治的接受IFNα治疗24周后应答不佳的HBeAg阳性CHB患者86例.根据患者意愿分为继续单用IFNα治疗组21例,IFNα联合ADV治疗组30例,改用LdT序贯治疗组35例.采用x2检验比较三组患者治疗48周时的ALT复常率、HBV DNA低于检测值下限（500拷贝/mL）的比例、HBeAg及HBsAg血清学转换率.结果 治疗48周时,继续单用IFNα治疗组的ALT复常率为52.6％ （10/19）,低于IFNα联合ADV治疗组（86.7％,26/30）和LdT序贯治疗组（84.8％,28/33）,差异有统计学意义（x2=6.913和6.361,P＜0.05）;继续单用IFNα治疗组的HBV DNA低于检测值下限（500拷贝/mL）的比例为26.3％（5/19）,低于IFNα联合ADV治疗组（60.0％,18/30）和LdT序贯治疗组（54.5％,18/33）,差异有统计学意义（x2=11.33和3.895,P＜0.05）;继续单用IFNα治疗组没有HBeAg转阴或血清学转换,而IFNα联合ADV组和LdT序贯治疗组分别有6例（20.0％,6/30）和7例（21.2％,7/33）发生HBeAg转阴或血清学转换（x2=4.330和4.657,P ＜0.05）.三组患者均未发生HBsAg转阴或血清学转换.IFNα联合ADV治疗组与LdT序贯治疗组之间的ALT复常率、HBV DNA低于检测值下限率和HBeAg转阴或血清学转换率比较差异无统计学意义（x2=0.042,0.019和0.064,P ＞0.05）.结论 对于IFNα治疗应答不佳的HBeAg阳性CHB患者,IFNα联合ADV治疗或LdT序贯治疗可明显改善患者的肝功能和病毒学应答,两种治疗方案疗效相近.     

多西他赛注射液的制备及质量控制

目的制备一种稳定的多西他赛注射液,并对其进行相应质量控制和稳定性考察。方法通过对多西他赛注射液的处方工艺的系统研究,制备一种稳定的多西他赛注射液,参照注射用多西他赛的国家试行标准和安万特的多西他赛注射液(泰索帝)的内控标准,制定相应标准并对其质量进行控制和稳定性考察。结果以酒石酸为pH调节剂,当溶液的pH为3.5左右时,注射液稳定性最好。通过12个月的稳定性考察,注射液的各项指标均符合要求。结论制备工艺比较简单,制成的多西他赛注射液稳定性好,质量符合标准要求。     

克罗恩病的外科诊治

目的探讨克罗恩病的临床表现、手术适应证和手术方法。方法收集2000～2007年两家医院外科手术治疗12例克罗恩病患者的临床资料。结果12例患者入院时临床表现为肠梗阻、消化道出血、弥漫性腹膜炎、胃肠穿孔或肠瘘。术前诊断仅3例,误诊率极高。全组均经手术治疗,行肠切除术、肠造瘘术、腹腔引流术。术后复发2例,再手术1例。结论克罗恩病为慢性非特异性肠道疾病,临床表现多种多样,手术是治疗克罗恩病并发症的主要手段,术后预防复发很重要。     

共载多西他赛和IR820的化疗/光热/光动纳米粒的抗肿瘤增殖及转移作用考察

本课题采用改进的乳化溶剂蒸发法制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)-聚乙烯亚胺(PEI)纳米粒,并通过亲疏水作用力和电性吸附原理分别将多西他赛(1)和光敏剂IR820共同装载于PLGA内核和PEI阳离子亲水外壳中。为使纳米粒具有长循环功能,选用负电性肝素(heparin,H)修饰在纳米粒表面使电荷翻转,得到共载药纳米粒(1@IR820/H NPs),从而实现将化疗/光热/光动3种肿瘤治疗相结合,达到理想的抗乳腺癌细胞增殖和转移的治疗效果。制备并表征了所得纳米粒的物理化学性质,并考察了其在体外经近红外光(808 nm)照射处理后对乳腺癌细胞4T1增殖和转移的影响。结果显示,所得的1@IR820/H NPs的粒径为(192.7±4.1)nm,ζ电位为(-22.6±1.9)mV。细胞摄取试验表明,与1@IR820/HNPs共孵育的4T1细胞经近红外光照射处理后,明显增强了摄取能力。体外活性氧试验表明,细胞摄取的增强可提高光动治疗效果。另外,共载药纳米粒的细胞毒性明显高于游离药物。抗肿瘤转移试验表明IR820及共载药纳米粒可抑制肿瘤细胞转移,并且Western Blot技术表征显示抗转移作用...     

老年医学科开展个体音乐治疗模式初探

目的 探索个体音乐治疗在老年医学科的应用及开展模式.方法 运用"筛选-评估-转介-制定计划-讨论-实施治疗-反馈-总结"的模式为住院患者进行个体音乐治疗;记录入选患者的临床特征、音乐治疗情况并进行分析.结果 30位患者共进行音乐治疗43次,80岁及以上占80％,共病指数4(2.5,7.5)分,1年预后指数4(1,9)分...     

国产冻干人凝血酶原复合物质量标准的研究

目的通过对国产人凝血酶原复合物 (PCC)质量的研究 ,建立与国际接规的质量标准。方法用人凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ (FⅡ、FⅦ、FⅨ、FⅩ )浓制剂国家标准品 ,采用一期法测定国内用不同原料制备的PCC中FⅡ、FⅦ、FⅨ、FⅩ的效价 ;用正常人血浆作标准 ,用凝固法检测PCC的总效价及PCC中的肝素。结果用血浆作原料提纯制备的PCC ,FⅣ的效价能达到 1 0IU/ml以上 ,FⅦ效价最低 ;用组分Ⅲ作原料 ,FⅣ活性损失很大 ,只有 2 / 7批次能达到 1 0IU/ml;而FⅦ效价最高。无论用何种原料 ,FⅡ和FⅩ活性均能保持在一定水平。结论从血浆中直接提纯制备PCC ,能有效地保持FⅣ活性 ,各项指标易达到国外同品种的质量标准     

甲磺酸多沙唑嗪控释片的制备及体外释放度考察

目的：制备甲磺酸多沙唑嗪控释片,并对其体外释放度进行考察。方法：以乙基纤维素-聚乙二醇复合材料作为控释衣膜,制备双层渗透泵控释片。以自制片与市售参比制剂体外释放度的相似因子f2为评价指标,采用正交试验设计优化甲磺酸多沙唑嗪双层渗透泵控释片的处方;同时,采用扫描电镜考察了释药过程中复合衣膜表面微孔的形成情况。结果：优化处方呈现良好的零级释药特征（r=0．9996）,在不同释放介质的释药行为基本一致。结论：甲磺酸多沙唑嗪控释片的体外释放特征与市售参比制剂相比具有良好的相似性（f2=76．75）。     

C型臂X线机用于造影取石术的配合

对40例行胆总管探查切开取石手术的患者在C臂机造影下行术中胆道造影术，实施准确、熟练、默契的手术配合。结果手术过程均顺利，手术时间60～120min，平均90．0min。术后2周行T管造影，未发现结石残留，拔除T管，患者恢复良好，均痊愈出院。术后随访1～4个月，平均2．0个月，无复发。对胆总管探查切开取石患者应用C臂机可以减少组织损伤，缩短手术时间，而适时的护理配合是其保障。