rHSG/pExpress-1重组质粒载体的构建及序列分析

目的构建大鼠增殖抑制基因（rat hyperplasia suppressor gene,rHSG）的真核表达载体rHSG/pExpress-1并鉴定,为进一步构建腺病毒载体及恶性胶质瘤的基因治疗提供物质基础。方法抽提SD大鼠心肌基因组RNA后逆转录,用PCR方法扩增大鼠增殖抑制基因（rHSG）段的基因片段;扩增产物经纯化后克隆至pExpress-1质粒载体,挑取重组质粒阳性克隆进行双酶切鉴定和测序。结果成功构建了真核表达载体rHSG/pExpress-1;重组质粒经测序后与预期序列一致。结论成功构建了大鼠增殖抑制基因真核表达载体rHSG/pExpress-1,为深入研究rHSG功能和rHSG基因治疗恶性胶质瘤奠定了基础。     

大鼠蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛和rHSG表达相关性的实验研究

目的 探讨大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后迟发性脑血管痉挛(DCV)和大鼠增殖抑制基因(rHSG)表达之间的关系.方法 SD大鼠156只,随机分为SAH组(A组)、生理盐水组(B组)和正常对照组(C组).A组采用枕大池二次注血法诱发;B组同法注射等量生理盐水.A、B组分别在4、7、10、13、16、20d取基底动脉(BA)行HE染色后测量其内径周长、血管壁厚度,观察血管结构改变;免疫组化检测BA rHSG蛋白;RT-PCR法检测BA中rHSG mRNA.结果 B、C组BA血管结构正常,无DCV发生;A组第4天出现DCV,第7天达到高峰,高峰期持续至第10天.后逐渐缓解,20d趋于正常.A组除20d外,各时相BA有不同程度的内膜增厚皱折、平滑肌层增厚等增殖性改变.与B组及C组相比,A组4～16d rHSG蛋白及rHSG mRNA表达均降低(P<0.05),第7天显著降低(P<0.05).结论 SAH后DCV的发生和严重程度与血管壁增生程度及rHSG低表达密切相关.     

上海市静安区疾病负担研究

目的 在上海市静安区人群的健康研究中首次引入伤残调整寿命年(disability adjusted life year,DALY)指标,对静安区疾病负担进行综合性测量,确定区域主要卫生问题.方法 以DALY为疾病负担测量单位,采用直接法计算早逝寿命损失年( years of life lost,YLL),采用间接法计算失能寿命损失年(years lost due to disability,YLD).结果 在静安区疾病负担中非传染性疾病占比重最大.循环系统疾病、恶性肿瘤、神经精神类疾病位于静安区疾病负担的前3位.结论 静安区居民健康水平较高,传染性疾病、损伤和中毒控制在较低水平,但非传染性疾病疾病负担很高,居前3位的循环系统疾病、恶性肿瘤、神经精神类疾病应作为今后防控工作的重点.     

艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染二例的病理特点

目的了解艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染的临床表现及组织病理学特点，探讨马尔尼菲青霉菌病的诊断及鉴别诊断。方法对2例活检标本进行常规苏木精一伊红染色及过碘酸一希夫染色、Gomori六胺银特殊染色，观察马尔尼菲青霉菌在组织中的形态特点，并结合文献进行讨论。结果在组织内可见酵母状真菌，过碘酸一希夫染色、Gomori六胺银真菌染色阳性，可见呈腊肠样结构并具有横隔。结论组织病理学检查，马尔尼菲青霉菌具有较典型的形态结构。     

肝移植术后肝组织中HBV cccDNA的表达及临床意义

目的探讨肝移植术后患者肝组织内乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)的表达及其临床意义。方法应用原位聚合酶链反应及免疫组织化学法检测2004年4月至2007年4月在北京地坛医院肝移植术后出现HBV再感染的25例患者及10例肝移植术后未出现HBV再感染者肝组织中HBV cccDNA及乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎核心抗原(HBcAg)、前-S1的表达。结果在35例标本中检测到cccDNA阳性的有22例(62.9%),阳性信号为紫蓝色呈块状或颗粒状,定位于细胞核。25例术后出现HBV再感染的患者其HBV cccDNA阳性率显著高于未出现HBV再感染者(84%对10%,P<0.01)。HBV cccDNA和HBcAg均为阳性的有20例,有2例患者肝组织中HBcAg阴性,但HBV cccDNA检测为阳性。肝组织中HBV cccDNA的表达阳性率与HBcAg具有高度一致性(Kappa=0.755,P<0.01)。结论肝移植患者肝组织中HBV cccDNA阳性表达可能与乙型肝炎再感染具有密切关系。     

165例前置胎盘的临床分析与护理

前置胎盘是胎盘种植异常而引起的高危妊娠,是妊娠晚期出血最常见的原因之一,是妊娠期的严重并发症,处理不当,可危及母婴生命安全.自1995年1月至2000年12月在我院分娩20 057例,其中前置胎盘165例,发病率为1∶122(0.82 %),现将分析及护理体会报告如下.     

165例前置胎盘的临床分析与护理

前置胎盘是胎盘种植异常而引起的高危妊娠,是妊娠晚期出血最常见的原因之一,是妊娠期的严重并发症,处理不当,可危及母婴生命安全。自1995年1月至2 0 0 0年12月在我院分娩2 0 0 5 7例,其中前置胎盘16 5例,发病率为1∶12 2(0 .82 % ) ,现将分析及护理体会报告如下。1　临床资料1.1　孕妇年龄　本组年龄平均为(2 8.30±5 .6 0 )岁。范围为2 1岁～4 3岁。1.2　孕龄及孕产史　16 5例中,37周以前分娩者5 8例,占35 .15 % ,37周～4 0周分娩者96例,占5 8.18% ,4 0周～4 2周分娩者11例,占6 .6 7%。有流产史者98例,占前置胎盘发病的5 9.39% ;有宫腔操作…     

rHSG基因转染对蛛网膜下腔自体血注入模型大鼠基底动脉形态学的影响

目的利用腺病毒载体介导外源性rHSG转染至蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠的基底动脉(BA),观察SAH后各时相BA形态学变化规律。方法 SD大鼠60只随机分为四组:SAH组(A组,18只)、SAH+Adv-GFP组(B组,18只)、SAH+Adv-rHSG-GFP组(C组,18只)和正常对照组(D组,6只)。建立大鼠蛛网膜下腔2次出血模型,将重组腺病毒Adv-rHSG-GFP及空载腺病毒Adv-GFP分别转染至BA。设立4、7、10d3个观测点,HE染色BA后测量其内径周长及血管壁厚度,观察血管结构改变。结果 A、B组各时相BA均有不同程度的痉挛、缩窄的表现;主要为血管内径明显变小,管壁增厚,弹力纤维皱缩,向血管腔内隆起。C组各时间点血管腔及管壁变化不明显,无痉挛发生。不同时间点纵向比较采用单因素方差分析,C组与A、B组相应时间点比较差异有统计学意义(P<0.05);A、B组各时间点横向比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 rHSG的过表达可以缓解SAH后血管壁痉挛的发生。     

肝细胞DNA损伤诱导蛋白DDI2的单克隆抗体制备及鉴定

目的制备鼠抗DDI2蛋白单克隆抗体,并对其在细胞和组织中的定位进行初步研究。方法利用体外原核表达的DDI2蛋白,免疫BLAB/c小鼠,制备单克隆抗体。利用免疫组织化学技术明确该蛋白在组织中的定位。结果利用杂交瘤细胞技术,成功制备了两株DDI2单克隆抗体细胞系2H3、2B2。表达纯化的单克隆抗体具有较高的免疫活性。与正常对照组相比,肝损伤组织中该蛋白表达增强,且高表达于门脉周围肝实质细胞,并主要表达于细胞核。结论 DDI2的表达与四氯化碳诱导的肝损伤有关,损伤肝细胞主要表达于肝实质细胞的细胞核。     

重组穿梭质粒pAdTrack-cmv-rHSG载体的构建及鉴定

目的构建大鼠增殖抑制基因(rat hyperplasia suppressor gene,rHSG)腺病毒穿梭质粒,为进一步研究体内诱导rHSG在恶性胶质瘤的特异性表达奠定基础。方法提取SD大鼠心肌总RNA,利用RT-PCR方法扩增大鼠增殖抑制基因(rHSG)的全开放读码框区片段,将其亚克隆入T载体,双酶切后与经同样处理的腺病毒穿梭质粒pAdTrack-cmv相连,用酶切和测序进行鉴定。结果扩增rHSG克隆出rHSG基因并成功重组于入腺病毒基因并成功的穿梭质粒。结论构建成功重组大鼠增殖抑制基因腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack-cmv-rHSG。