落实《处方管理办法》的实践与思考

为贯彻落实中华人民共和国卫生部53号令《处方管理办法》,结合实际工作,从医院全面宣传、进药渠道、调剂及药物咨询等环节严格执行“一品两规”;通过处方审核等落实“四查十对”,并在实践中积累了一些执行《处方管理办法》的经验和体会.     

前愈汤剂体外抗菌实验研究

[目的]探讨前愈汤剂体外抗菌效果.[方法]通过液体两倍稀释法分析前愈汤剂对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、木糖葡萄球菌和克雷伯杆菌的抗菌作用,并以前列泰片和前列康作实验对照.[结果]前愈汤剂对以上菌种的最低抑菌浓度(MIC)值分别为62.5、125、125、500g/L.最低杀菌浓度(MBC)值分别为250、125、125、500g/L.[结论]前愈汤剂对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、木糖葡萄球菌和克雷伯杆菌都有明显的抑制和杀灭作用.     

基于双荧光素酶报告基因系统的人源SREBP1基因启动子的活性研究

目的 构建固醇调节元件结合蛋白 1（SREBP1）启动子双荧光素酶报告基因表达载体,为研究针对 SREBP1靶点的天然活性抑制剂筛选奠定基础。方法 利用生物信息学软件,对SREBP1基因5′端上游5 000 bp序 列进行启动子预测与分析。应用 Gibson Assembly 方法构建启动子双荧光素酶载体,并将构建成功的 pGL3- SREBP1-pro重组质粒和内参质粒pRL-SV40共转染肝癌HepG2细胞并给予天然抑制剂大黄素,检测SREBP1转录活 性的抑制效果。结果 SREBP1基因5′端上游2 000 bp区域内有启动子特征序列,存在转录因子结合位点;重组质粒 经酶切及测序鉴定证实为阳性克隆,瞬时转染肝癌HepG2细胞后经双荧光素酶报告基因系统检测,所克隆的片段序 列具有启动子活性,该活性可被大黄素所抑制。结论 成功构建了pGL3-SREBP1-pro双荧光素酶报告基因表达载 体,并证实其活性,可为进一步用于针对SREBP1靶点的天然活性抑制剂筛选奠定     

三磷酸肌醇与川芎嗪通过钙通道影响肝癌耐药细胞内药物蓄积

目的探讨三磷酸肌醇与川芎嗪对人肝癌多药耐药细胞BEL 7402/ADM中多柔比星蓄积的影响,推测钙通道参与的机制。方法将人肝癌多药耐药细胞BEL 7402/ADM分成4组：对照组、维拉帕米组、川芎嗪组和三磷酸肌醇组,噻唑蓝（MTT）法测定4组细胞经不同浓度多柔比星作用后增殖被抑制情况,计算半数抑制浓度（IC50）。荧光显微镜观察4组细胞多柔比星蓄积程度。结果①川芎嗪组多柔比星的IC50值为对照组的（65.35±0.24）% （P＜0.05）,维拉帕米组为对照组的（64.89±0.18）%（P＜0.05）,三磷酸肌醇组为对照组的（337.60±0.12）%（P＜0.05）;②川芎嗪组、维拉帕米组荧光强度明显高于对照组,三磷酸肌醇组荧光强度明显低于对照组。结论三磷酸肌醇可降低人肝癌多药耐药细胞内多柔比星蓄积,增加多柔比星对人肝癌多药耐药细胞BEL 7402/ADM的IC50值,川芎嗪具有相反作用。推测三磷酸肌醇可能通过诱导人肝癌多药耐药细胞内钙激活P糖蛋白多药耐药,川芎嗪可逆转该过程。     

川芎嗪对人肝癌耐药细胞BEL-7402/ADM中P-gp表达的影响

目的观察川芎嗪（TMP）对人肝癌耐药细胞BEL-7402/ADM中P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）表达的影响,研究TMP对人肝癌多药耐药细胞BEL-7402/ADM的逆转机制。方法将人肝癌细胞耐药株BEL-7402/ADM及其亲本细胞BEL-7402分为：亲本组、耐药组、逆转组（耐药＋TMP）、阳性对照组（耐药＋维拉帕米）、二抗阴性对照组,用免疫组化SABC法和流式细胞术对照观察TMP对BEL-7402/ADM中P-gp表达的影响。结果流式细胞术结果显示耐药组显著高于亲本组（P〈0.01）;耐药＋TMP组和耐药＋维拉帕米组均显著低于耐药组和亲本组（P〈0.01）。免疫组化SABC法显示耐药组P-gp阳性表达率显著高于亲本组（P〈0.01）;TMP组、维拉帕米组的P-gp阳性表达率显著低于耐药组（P〈0.01）。结论 TMP能显著降低人肝癌多药耐药细胞BEL-7402/ADM细胞表面P-gp的表达,增加阿霉素等化疗药物对BEL-7402/ADM的细胞毒性作用,从而增加对肿瘤细胞的抑制率,提高化疗疗效。     

补肾化瘀浸膏对去势大鼠骨密度与骨组织形态的影响

［摘要］目的观察补肾化瘀浸膏对实验性去势大鼠骨密度及骨组织形态的影响,探讨其对骨质疏松症的治疗作用。方法选用健康雌性SD大鼠48只,称质量后随机分为空白组,模型组,尼尔雌醇阳性对照组,补肾化瘀浸膏大、中、小剂量组,共6组,各8只,观察补肾化瘀浸膏对实验性骨质疏松症大鼠治疗作用。结果与模型组比较,补肾化瘀浸膏大、中剂量组大鼠骨密度显著增高（P＜0.05）,成骨细胞数目显著增多（P＜0.05）,破骨细胞数目显著减少（P＜0.05）; 形态学观察显示,补肾化瘀浸膏各剂量组与模型组比较,骨小梁的宽度增大,间距变小,数量增多,排列较规则,结构整齐,骨髓腔变小。结论补肾化瘀浸膏对去势所致高转换型骨质疏松大鼠有较好的治疗作用,具有较高的临床应用和开发价值。     

微小RNA-134-5p靶向作用于EGFR对卵巢癌SKOV3和A2780细胞生长的影响

目的 探讨微小RNA-134-5p(miR-134-5p)靶向作用于表皮生长因子受体(EGFR)基因对卵巢癌细胞生长的影响.方法 以卵巢癌细胞系SKOV3和A2780为研究对象,根据处理方法分为对照组(转染miR-NC)和实验组(转染miR-134-5p).采用qRT-PCR和Western blot检测EGFR基因及下游靶蛋白的表达量;流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡情况;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和集落形成实验检测卵巢癌细胞增殖能力.结果 实验组EGFR基因及下游靶蛋白表达显著下调,其中SKOV3细胞中EGFR mRNA下调至48％(P＜0.05),A2780细胞中EGFR mRNA下调至47％(P＜0.05).实验组细胞的细胞周期明显受到抑制(P＜0.05),miR-134-5p通过EGFR靶蛋白诱导细胞凋亡(P＜0.05).实验组细胞的增殖活性和集落形成能力明显受到抑制(P＜0.05).结论 miR-134-5p可通过靶向抑制EGFR基因,促进细胞周期停滞和细胞凋亡,降低卵巢癌细胞的增殖能力.     

奶母果水提物对免疫低下小鼠胸腺和脾脏系数的影响

目的观察奶母果对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法 120只昆明种小鼠,雌雄各半,随机分为6组：正常对照组、模型对照组、奶母果高中低剂量组和阳性对照组,采用腹腔注射环磷酰胺法制作免疫功能低下小鼠模型,奶母果低中高三个剂量组分别给予1.517 g/（kg.d）、3.033 g/（kg.d）、6.066 g/（kg.d）奶母果提取物,阳性对照组给予1.820g/（kg.d）淫羊藿提取物,给药10 d,测定胸腺、脾脏系数。结果模型对照组小鼠的胸腺系数、脾脏系数显著低于正常对照组,奶母果3个剂量组及阳性对照组对模型小鼠下降的胸腺、脾脏系数均有升高作用,奶母果中剂量组的作用优于低剂量组和高剂量组。结论奶母果水提取物可升高免疫低下小鼠的胸腺和脾脏系数,从而增强机体免疫功能。     

中药毒理研究进展

中药毒理研究对于明确毒性作用、阐明减毒机制、确保临床安全用药非常重要。随着现代技术的不断发展，新技术和新方法已广泛应用于中药毒理研究中，并在该领域飞速发展。近十年来，中药毒理研究在中药的主要毒性作用、毒代动力学、减毒方法等方面取得重要进展，多组学、网络毒理学、体内外新模型等方法也在中药毒理研究中得到应用。同时，关于新技术与新方法在中药毒理研究中的应用前景的展望，可以为相关领域的研究者提供有价值的参考。