一种新的灵长类IL-4基因表达产物纯化方法

目的研究一种能保持重组蛋白活性的新的蛋白纯化方法。方法 IPTG诱导表达重组质粒pET-30a（＋）-IL-4,取可溶性部分进行Ni-NTA agarose非变性方法纯化,随后逆向利用Biologic Duoflow Chromatography系统阴离子交换柱进一步分纯,并用Western Blot鉴定所得纯化蛋白。结果重组质粒pET-30a（＋）-IL-4有部分可溶性表达,经Ni-NTA agarose非变性的方法纯化后仍有部分杂蛋白的存在,利用Biologic Duoflow Chromatography系统阴离子交换柱进一步分纯后得到高度纯化的重组蛋白并经Western Blot鉴定为目的蛋白。结论利用创新方法经两个纯化步骤得到了有活性的目的蛋白。     

放射读片集锦(二十二)

病历摘要患者女性,20岁。入院三个月前因行走时感右膝关节疼痛不适、局部肿胀,在当地医院拟诊为“关节炎”接受中药、理疗及针灸等治疗无效,而转入我院就诊。检查:一般情况好,胸腹部检查无异常。右膝关节轻度肿胀,右股骨下端偏内侧、胫骨上端偏外侧触痛。右膝关节较左侧增粗,局部皮温略高。ESR、AKP、血磷、血钙均正常。 X线所见:右股骨远端见-6×9cm大小之骨质破坏区,骨皮质受累变薄,呈囊性膨胀性改变;右胫骨平台外侧亦见—3.5×4.5cm大小的囊状骨密度减低区,呈偏心性生长。以上病变区境界清楚,周围无     

先天性肝内胆管囊状扩张四例

先天性肝内胆管囊状扩张又称Caroli病,是一临床少见的先天性胆道疾病,易误诊和漏诊。为引起广大临床工作者重视,现将我院收治4例报告之。　　[例1]　患者女,32岁。主诉不规则发热25天伴畏寒,体温39℃,无寒战及腹痛、黄疸。体检:一般情况良好。发现肝肋下2.5cm,脾肋下5.0cm,质地     

不同浓度重组登革病毒1型病毒样颗粒免疫效果的评价

目的评价毕赤酵母表达的登革病毒1型(DENV-1)病毒样颗粒(VLPs)不同浓度条件下的免疫效果,为登革多价疫苗的研究奠定基础。方法采用毕赤酵母系统构建两种DENV-1 VLPs(即DENV-1 prME-VLPs和DENV-1CprME-VLPs),鉴定、纯化后比较其表达量,选择表达量高的VLPs以不同剂量免疫BALB/c小鼠(试验组分别注射经弗氏佐剂乳化的VLPs 10、25、50μg;对照组分别注射PBS和弗氏佐剂)。通过间接ELISA及中和试验测定免疫小鼠血清特异性抗体效价和中和抗体效价;用VLPs体外刺激免疫小鼠的脾淋巴细胞,MTT法测定其增殖指数;ELISPOT检测IL-4、IFN-γ及TNF-α的抗原特异性淋巴细胞数量。结果以电镜下观察到成功表达的直径约为30nm、形态无明显差异的两种VLPs。两种表达体系中,以DENV-1 prME-VLPs表达量较高。经较高表达量的VLPs免疫小鼠后发现,初次免疫后1周,即可检测到针对DENV-1的抗体,随着时间延长,抗体效价逐渐上升,5周达峰值;其中,VLPs 25μg剂量组与50μg剂量组特异性抗体效价及中和抗体效价均显著高于PBS组、佐剂对照组及VLPs 10μg剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。VLPs 25μg剂量组与50μg剂量组免疫后的小鼠淋巴细胞增殖指数及其分泌IL-4、IFN-γ及TNF-α抗原特异性淋巴细胞数目,均显著高于对照组及VLPs 10μg剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。结论毕赤酵母表达的DENV-1 VLPs免疫剂量为25μg时即可诱导高效价的中和抗体和显著的细胞免疫效应。