丙型肝炎及其肝硬化组织中病毒核心蛋白及p53和Bcl-2的表达与相关性研究

目的：探讨丙型肝炎及其肝硬化组织中丙型肝炎病毒（HCV）核心蛋白、突变p53、Bcl-2的表达及其相关性，探讨HCV核心蛋白是否能促进p53突变和Bcl-2的表达。方法：收集HCV表达阳性的肝炎、肝硬化组织23份，采用免疫组化Envision法检测HCV核心蛋白、突变p53、Bcl-2的表达，并分析三者间的关系。结果：核心蛋白和突变p53的阳性表达主要定位于细胞核中，Bcl-2的阳性表达主要定位于细胞质中；在核心蛋白表达阳性的组织中，突变p53的阳性表达率为87．0％，Bcl-2的阳性表达率为95．7％，三组间阳性强度的差异无显著性意义（P=0．095）；HCV—C蛋白与突变p53、Bcl-2阳性强度两者间相关性检验的P值分别为0．011和0．012，相关系数r分别为0．69和0．72；突变p53与Bcl-2两者相关性检验P=0．007，r=0．72。结论：三种蛋白的表达有相关性；HCV核心蛋白可能促进野生p53突变；核心蛋白和突变p53都有可能促进Bcl-2蛋白的表达。     

前庭神经核内谷氨酸受体在帕金森病的变化

目的 探讨前庭神经核内离子型谷氨酸受体在帕金森病时的变化。方法 采用免疫组织化学染色技术检测小鼠前庭神经核内谷氨酸受体的表达。结果 在帕金森病时,前庭神经核内N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体增加,非NMDA受体减少。结论 非NMDA受体在帕金森病中起神经毒性作用,引起相应病理改变,推测其变化与临床运动障碍、平衡失调有一定关系。     

人骨髓间质干细胞库的初步建立

目的 探讨建立生物学性状稳定的人骨髓间质干细胞(human marrow mesenchymal stem cells，hMSCs)库的可行性，为组织工程种子细胞的来源作初步探索。方法对分离得到的hMSCs采用液氮低温冻存，并在一定时间复苏培养，以流式细胞仪检测其表面抗原，在诱导培养基中对其行成骨和成软骨诱导培养，光镜：电镜观察细胞的形态，采用组织化学、免疫组织化学及分子生物学的方法检测成骨和成软骨诱导的特异标志物：碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原及骨钙素，研究其生物学性状。结果从骨髓中分离得到了纯度达96％以上的hMSCs，复苏后的hMSCs形态和表面抗原保持不变，可继续扩增10代以上，倍增时间40h。复苏后第2、6、10代hMSCs均保持较强的向软骨细胞、成骨细胞的分化能力。结论初步建立了hMSCs库，可为骨及软骨组织工程提供较好的种子细胞。     

Notch通过抑制信号调节蛋白α(SIRPα)调控巨噬细胞M1型极化作用

目的 研究缺刻基因(Notch)信号通过信号调节蛋白α(SIRPα)调控巨噬细胞极化的作用.方法 将小鼠RAW264.7细胞分别给予脂多糖(LPS)与γ干扰素(IFN-γ)或者白细胞介素4(IL-4)刺激极化为M1/M2后,通过实时定量PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-12、IL-10、甘露糖受体(MR)及...     

不同类型无神经节细胞巨结肠乳鼠模型的建立与鉴定

目的 建立不同类型无神经节细胞巨结肠乳鼠实验动物模型,为进一步研究该病的发病机制及相关分子生物学机制提供可靠模型.方法 将6～8日龄SD大鼠4窝(每窝10只乳鼠)随机分为实验组(包括短段型组、常见型组、长段型组)及对照组.对照组乳鼠经肛门推注9 g/L盐水,实验组分别采用经肛门置入不同长度的导管,推注不同剂量、不同浓度苯扎氯铵(BAC)的方法进行处理.分别于处理后2、4、6、8周行大体观察,取全段结肠及直肠,固定、包埋、切片后行HE染色,通过免疫组织化学染色检测蛋白基因产物9.5(PGP9.5)的表达以鉴定模型建立成功与否,确定病变累及肠管的范围.通过免疫荧光技术观察狭窄肠段与相应部位正常肠段c-kit标记的Cajal间质细胞(ICC)的表达.结果 实验组大鼠处理后4周逐渐出现腹胀,粪便颗粒变小.8周处死后解剖发现肠管出现痉挛狭窄,狭窄近端粪便潴留;组织学检查可见处理段肠管肠神经节细胞基本消失,且不同的实验处理方法造成病变累及的肠段明显不同.对照组无上述改变.与对照组相比,实验组c-kit标志的ICC在狭窄段的表达明显减少.结论 经肛门灌注不同浓度、不同剂量BAC的方法成功建立了短段型、常见型、长段型3种类型无神经节细胞巨结肠的乳鼠实验模型,该方法建立的模型稳定、可重复性好,为深入研究先天性巨结肠的发病机制提供了一个可靠的模型基础.     

增强型绿色荧光蛋白在人软骨细胞中的表达及修复重建人软骨示踪方法的研究

目的：检测增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein，EGFP)基因在原代培养的人鼻中隔软骨细胞的转染效率及瞬时表达，建立原代培养的人鼻中隔软骨细胞的示踪方法，为用组织工程法修复重建人软骨寻求示踪方法提供依据。方法：在大肠杆菌中扩增pEGFP-N1质粒，通过Amaxa细胞核转染仪将pEGFP-N1质粒转入原代培养的人鼻中隔软骨细胞，应用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察其转染过程及瞬时表达情况，流式细胞仪检测其转染效率。结果：增强型绿色荧光蛋白在基因转染24h后得到了明显表达，48h后流式细胞仪检测其转化率为35．37％，且未影响软骨细胞的贴壁过程。结论：经pEGFP-N1质粒转染的原代培养的人软骨细胞仍能在体外存活，pEGFP-N1是转染原代培养的人软骨细胞较为理想的瞬时表达载体．也是组织工程化软骨形成过程的良好示踪剂。     

喂养行为评价量表研究进展

本文对国内外有关喂养行为量表的研制与应用情况进行综述。根据研究目的和侧重点的不同,对于国外量表主要从喂养行为、态度、观念评价和喂养方法、策略的评价等两个方面展开分析;对国内量表则按照时间顺序进行归纳。目前国内量表的研究较多集中于对国外量表的修订与应用,自主编制量表较少。通过对国内外喂养行为量表研究现状的分析与归纳,有助于认清国内与国外同类研究的不同和差距,为喂养行为评价工具的选择或开发提供参考依据。     

不同型别的功能性便秘患儿肛门直肠测压对照研究

目的探讨功能性便秘（FC）患儿与健康儿童肛门直肠动力学差异,为其临床分型诊断及治疗提供依据。方法采用功能性胃肠病罗马Ⅲ诊断标准,收集2008年1月至2009年1月在第四军医大学唐都医院儿科门诊及住院的FC患儿为FC组。选取同期无消化系统症状,平日排便正常的健康儿童为正常对照组。采用不透光X线硫酸钡条测定结肠传输指数（TI）,依据TI将FC组分为出口梗阻型（OOC）亚组、慢传输型（STC）亚组和混合型（MIX）亚组。通过肛门直肠测压法分析FC各亚组与正常对照组肛门直肠动力学差异。结果研究期间FC组纳入25例,其中STC亚组10例,OOC亚组15例,未发现MIX患儿;正常对照组纳入10名。FC组与正常对照组肛门括约肌静息压差异无统计学意义（P〉0.05）。STC亚组肛门括约肌最大收缩压与正常对照组差异无统计学意义（P〉0.05）,OOC亚组肛门括约肌最大收缩压显著高于正常对照组及STC亚组（P〈0.05）。FC组直肠最低敏感量及最大耐受量均显著高于正常对照组（P均〈0.05）。STC亚组与OOC亚组直肠最低敏感量及最大耐受量差异均无统计学意义（P均〉0.05）。结论FC患儿存在明显的肛门直肠动力和感觉异常;OOC和STC患儿的肛门直肠动力学存在差异。肛门直肠测压检查对协助诊断FC有一定价值。     

炎症性肠病小鼠不同进展时期肠道巨噬细胞的亚群变化

目的:建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠炎症性肠病(IBD)模型,分析不同时期肠道炎症改变及巨噬细胞亚群变化,为IBD的治疗寻找新靶点。方法:将30只6～8周雄性C57BL/6小鼠简单随机分为对照组、急性活跃期组、组织消退期组。后2组连续5 d饮用25 g/L DSS建立IBD模型,5 d后更换为滤过除菌水,分别在第...