核酸疫苗免疫对帕金森病小鼠的治疗作用

目的探讨α-突触核蛋白（α-synuclein,α-syn）核酸疫苗免疫对MPTP慢性帕金森病（PD）小鼠的治疗效果。方法将该实验室成功构建的α-syn核酸疫苗-pVAX1-hα-Syn84-140用Qiagen试剂盒大量制备α-syn质粒;24只MPTP慢性PD小鼠随机分为3组：疫苗组、空质粒对照组和PBS对照组,各组小鼠分别肌注pVAX1-hα-Syn84-140重组质粒,pVAX1空质粒和PBS各100μl,共免疫3次,每次间隔3w,末次免疫后2w,观察小鼠行为学变化及中脑黑质α-syn表达和多巴胺能神经元数目变化。结果pVAX1-hα-Syn84-140核酸疫苗免疫组小鼠的类PD样症状与空质粒和PBS对照组相比显著减轻（P〈0.01）;小鼠中脑黑质α-syn表达较对照组减少约30%（P〈0.01）,且多巴胺能神经元数目较空质粒和PBS对照组增多了31%～39%（P〈0.01）。结论pVAX1-hα-Syn84-140核酸疫苗具有较强的免疫原性,能对帕金森病小鼠产生较好的免疫治疗作用。     

重庆市巴南区成人居民血浆同型半胱氨酸水平分布情况

目的通过分析重庆市巴南区不同性别及不同年龄层次人群血浆同型半胱氨酸含量,了解成人居民血清同型半胱氨酸水平分布特点。方法 2011年1月1日至2012年12月31日在重庆巴南区采用整群分层抽样方法随机纳入1 600人,年龄在18～95岁之间。按年龄分为:18～39岁组、40～59岁组、60～79岁组、≥80岁组;同时按性别分为:男性组和女性组;按居住地分为城区组和非城区组。对所有调查对象测定血浆同型半胱氨酸水平。结果非城区居住人群血浆同型半胱氨酸异常比例较城区居住人群低(12.79%比20.06%,P<0.01);男性血浆同型半胱氨酸异常比例明显多于女性(25.75%比9.38%,P<0.01);各年龄段间血浆同型半胱氨酸异常比例差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且随年龄增加,异常比例随之增加。结论不同居住地点,不同性别及年龄对巴南区成人居民的血浆同型半胱氨酸水平有明显影响。     

急性脑出血患者白细胞计数与肌钙蛋白Ⅰ及心律失常的相关性

目的观察急性脑出血（acute cerebral hemorrhage,ACH）患者急性期血白细胞计数与心律失常的相互关系,探讨白细胞计数对ACH患者心律失常发生的预测价值。方法观察未行手术治疗的115例ACH患者,根据血白细胞计数分为3组：A1组（〈10.0×10^9/L）35例,A2组（10.0×10^9～15.0×10^9/L）43例,A3组（〉15.0×10^9/L）37例,测定各组患者心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I,cTnI）、肌酸激酶MB型同工酶（creatine kinase-MB,CK-MB）水平,统计各组患者心律失常的发生率,分析相关性。结果 3组患者cTnI及CK-MB水平、心律失常的发生率比较,差异有统计学意义（P〈0.01）,A2、A3组显著高于A1（P〈0.01）。血白细胞计数与心律失常发生率呈正相关（r=0.869,P〈0.01）。结论 ACH患者血白细胞计数越高,肌钙蛋白含量越高,心律失常特别是恶性心律失常的发生率越高。     

疏血通注射液治疗短暂性脑缺血临床观察

目的研究疏血通注射液对短暂性脑缺血临床疗效及作用机理。方法 72例短暂性脑缺血患者随机分为观察组和对照组,观察组在常规抗血小板聚集基础上加用疏血通注射液,对照组常规抗血小板聚集治疗,并观测临床疗效及治疗前后血液流变学和血流动力学参数。结果观察组速控或基本痊愈,血液流变学和血流动力学参数均较治疗前明显改善,且均优于对照组。结论疏血通注射液对短暂性脑缺血治疗效果显著,是一种安全、有效的药物。     

疏血通注射液治疗缺血性脑卒中的疗效观察

目的:观察疏血通注射液治疗缺血性脑卒中的疗效。方法:将182例缺血性脑卒中患者随机分为两组,治疗组94例,对照组88例。两组患者同时给予基础药物治疗,治疗组患者加用疏血通注射液6ml,qd,静脉滴注。两组患者疗程均为21d。所有患者分别于治疗前,治疗第7、14、21天进行神经功能缺损评分和日常生活活动能力检查、运动功能评定和脑血流图检测等。结果:治疗后两组患者的神经功能缺损情况、日常生活能力和运动功能均有所好转,脑血流量显著增加,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05),且治疗组显著优于对照组(P<0.05)。结论:疏血通注射液能改善缺血性脑卒中患者神经功能缺损,提高患者的运动功能及日常生活能力。     

hα-syn蛋白核酸疫苗pVAX1-hαS1-140的构建及其表达

目的 构建含人α-突触核蛋白(human α-synuclein,hα-syn)编码基因的真核重组载体,并在COS-7细胞中表达,为帕金森病的核酸疫苗开发奠定基础.方法 通过PCR方法扩增hα-syn基因的CDS全长片段,舍酶切位点KpnⅠ、XbaⅠ和Kozak序列.扩增产物和真核表达载体pVAX1经双酶切、纯化、连接,转化感受态细胞E.coli TOP10,筛选含目的基因的重组载体pVAX1-hαS1-140,并在COS-7细胞中表达,用RT-PCR法和western blot法检测其表达产物.结果 经单、双酶切证实插入的基因片段大小一致,基因测序证实其序列和方向完全正确.用RT-PCR法和Westem blot法检测表明,重组质粒pVAx1-hαS1-140在COS-7细胞中能表迭目的蛋白,而且具有生物活性.结论 成功构建了核酸疫苗pVAX1-hαS1-140,并在COS-7细胞中表达,为帕金森病的核酸疫苗治疗研究奠定了良好的基础.     

帕金森病患者脑脊液疾病特异蛋白的初步筛选及鉴定

目的:通过比较帕金森病与特发性震颤、头痛患者脑脊液蛋白质谱,筛选和鉴定与帕金森病密切相关的疾病特异性蛋白（disease-specific proteins, DSPs）,寻找帕金森病的生物学标志物。方法:以固相pH梯度等电聚焦(IPG-IEF)为第一向,垂直平板十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)为第二向进行脑脊液蛋白质分离;用图像分析软件PDQuest8.0 分析电泳图谱,寻找有意义的差异蛋白点;运用MALDI-TOF-MS质谱鉴定,并对其中差异显著蛋白采用酶联免疫吸附实验（ELISA）进行鉴定。结果:帕金森病与特发性震颤患者及头痛对照组患者脑脊液蛋白质谱的比较,发现3个有意义的差异蛋白质点,其中载脂蛋白E (apolipoprotein E,Apo E)差异显著。ELISA鉴定结果表明,与特发性震颤\[(3.59±1.07) mg/L\]、头痛患者\[(3.67±0.71) mg/L\]相比,PD组患者脑脊液Apo E水平\[(2.47±1.27) mg/L\]明显下调,差异有统计学意义（P＜0.05)。结论:帕金森病患者与特发性震颤患者、头痛对照组患者脑脊液蛋白表达存在差异,这些差异蛋白可能是帕金森病的DSPs,并有可能成为帕金森病诊断的分子标志物。     

利维爱治疗绝经早期神经症的相关研究

目的评价利维爱治疗鲍经早期神经症的临床疗效。方法将67例绝经早期神经症患者分为治疗组和对照组,均给予对症治疗,治疗组加用利雏爱2．5mg,1次／d,持续3个月。治疗前后分别检测并比较血中雌二醇（E2）与卵泡刺激素（FSH）浓度,填写焦虑自评量表（SAS）与抑郁自评量表（SDS）,开对患者治疗前后的全身不适症状进行调查与比较,观察症状改善情况。结果3个月后,治疗组血中E2水平升高、FSH水平下降（P〈0．05）,SDS及SAS标准分下降（P〈0．05）,症状较对照组有明显改善（P〈0．05）。结论利维爱可以显著缓解鲍经早期患者的神经症,改善其心理健康状态。     

核酸疫苗免疫帕金森病小鼠的治疗作用

目的 探讨α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)核酸疫苗免疫对MPTP慢性帕金森病(PD)小鼠的治疗效果.方法 将该实验室成功构建的α-syn核酸疫苗-pVAX1-hα-Syn84-140用Qiagen试剂盒大量制备α-syn质粒;24只MPTP慢性PD小鼠随机分为3组:疫苗组、空质粒对照组和PBS对照组,各组小鼠分别肌注pVAX1-hα-Syn84-140重组质粒,pVAX1空质粒和PBS各100 μl,共免疫3次,每次间隔3 w,末次免疫后2 w,观察小鼠行为学变化及中脑黑质α-syn表达和多巴胺能神经元数目变化.结果 pVAX1-hα-Syn84-140核酸疫苗免疫组小鼠的类PD样症状与空质粒和PBS对照组相比显著减轻(P＜0.01);小鼠中脑黑质α-syn表达较对照组减少约30%(P＜0.01) ,且多巴胺能神经元数目较空质粒和PBS对照组增多了31%～39%(P＜0.01).结论 pVAX1-hα-Syn84-140核酸疫苗具有较强的免疫原性,能对帕金森病小鼠产生较好的免疫治疗作用.