血管紧张素-(1-7)/Mas受体轴通过调控NF-κB通路保护心肌细胞对抗高糖诱导的损伤

目的:探讨血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]/Mas受体轴能否通过抑制核因子-κB(NF-κB)通路对抗高糖(HG)引起的心肌细胞损伤。方法:应用细胞计数检测试剂盒(CCK-8)检测心肌细胞存活率;双氯荧光素(DCFH-DA)染色荧光显微镜照相法检测胞内活性氧(ROS)水平;Hoechst 33258核染色荧光显微镜照相测定凋亡细胞的形态及数量的变化;JC-1染色法测定线粒体膜电位(MMP);应用免疫蛋白印迹法测定NF-κB p65和cleaved caspase-3蛋白的表达水平。结果:应用35 mmol/L葡萄糖分别处理H9c2心肌细胞30、60、90、120和150 min均能明显增加磷酸化(p)NF-κB p65的水平,其中60 min时,表达水平增加最明显;1μmol/L Ang-(1-7)与HG共同处理心肌细胞60 min能抑制HG对p-NF-κB p65表达的上调作用;0.1~30μmol/L的Ang-(1-7)与HG分别共处理心肌细胞24 h均能抑制HG的细胞毒性,使细胞存活率增多;另一方面,1μmol/L Ang-(1-7)能抑制HG引起的细胞凋亡、氧化应激、线粒体损伤等,使凋亡细胞数量、cleaved caspase-3表达、ROS生成水平及MMP丢失减少;但是10μmol/L Ang-(1-7)/Mas受体拮抗剂A-779能明显阻断上述的Ang-(1-7)的心肌细胞保护作用;与Ang-(1-7)的作用相似,100μmol/L PDTC(NF-κB抑制剂)与HG共处理心肌细胞24 h也能显著抑制上述的HG损伤作用。结论:Ang-(1-7)/Mas受体轴可通过抑制NF-κB通路对抗HG诱导的心肌细胞损伤。     

胰岛素样生长因子1对结肠癌细胞凋亡的影响及其机制研究

目的研究胰岛素样生长因子1(IGF-I)通过磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI-3K/Akt)信号通路对结肠癌细胞株SW480凋亡率的影响及凋亡抑制蛋白survivin表达水平的变化。方法在培养结肠癌SW480细胞株时,采用不同浓度的IGF-I不同时间作用于SW480细胞,然后采用Western blot检测凋亡抑制蛋白survivin表达变化。100 ng/mL IGF-I作用于SW480细胞2 h内,Westernblot检测Akt的磷酸化表达变化;Akt特异性抑制剂LY294002处理前后,利用Western blot检测Akt磷酸化表达的变化,Western blot及细胞免疫荧光检测survivin表达的变化,流式细胞术检测细胞凋亡率的改变。结果IGF-I能上调SW480细胞的survivin表达,且其表达水平与IGF-I的作用时间、浓度呈依赖性(IGF-I作用SW480细胞不同时间后,survivin蛋白表达显著升高,并在12 h时达到峰值,所有实验组survivin蛋白的表达均显著高于对照组;IGF-I浓度为100 ng/mL时,survivin蛋白的表达达到顶峰);IGF-I快速激活SW480细胞中PI-3K/Akt信号通路(IGF-I作用SW480细胞15,30 min后,p-Akt蛋白的表达达到高峰);IGF-I能通过PI-3K/Akt信号通路上调SW480细胞survivin的表达;IGF-I能通过PI-3K/Akt信号通路抑制SW480细胞凋亡[利用流式细胞术检测空白组、刺激组、阻断组各组SW480细胞的凋亡率,分别为(5.18±0.415)%,(0.85±0.052)%,(3.15±0.411)%,各组之间差异有统计学意义(P0.05)]。结论IGF-I可通过PI-3K/Akt通路诱导survivin表达,从而抑制结肠癌细胞SW480的凋亡。     

硫化氢对PC12细胞存活素表达的影响及其神经保护作用

目的 探讨硫化氢(H2s)对PC12细胞存活素表达的影响及其神经保护作用.方法 应用Western blot检测不同浓度(50～800 μmol/L)的H2S供体硫氢化钠(NaHS)处理PC12细胞不同时间(0～180min)诱导PC12细胞存活素表达的量效和时效关系;细胞计数Kit-8(CCK-8)比色法检测细胞的存活率.结果应用不同浓度NaHS处理PC12细胞30 min后.在50～200 μmol/L浓度范围内呈浓度依赖性地促进存活素表达:但随着NaHS浓度的增加,存活素表达逐渐下降,当NaHS 浓度达800 μmol/L时存活素表达低于正常.应用400 μmo/L NariS处理PC12细胞不同时间,在0～60min时间范围内呈时间依赖性地促进PC12细胞存活素的表达,但随着处理时间的继续延长,存活索的表达逐渐下降.另一方面.400 μmo/L NariS预处理还能增强氯化钴(COCl2)对存活素表达的促进作用.并可显著减轻CoCl2对PC12细胞的损伤作用,使细胞存活率增加.结论 在一定浓度和时间范围内H2S可上调存活素的表达,此作用可能与其保护PC12细胞对抗化学性缺氧损伤有关.     

拱手面罩在无痛胃镜检查中的应用经验

异丙酚起效快、恢复时间短且无蓄积,已广泛应用于内镜检查术.但由于其镇静作用强,对循环系统和呼吸系统均有明显的抑制作用,通常采用面罩给氧等方式[1].但由此可能影响胃镜操作流畅性、牙垫滑脱累及器械安全,甚或错过胃镜操作的最佳时机,给临床工作带来不便.因此,我们充分调动人的手灵活可塑、易于融合之特性,依照面罩原理.试探性将"拱手面罩"应用于无痛胃镜检查,疗效满意,现介绍如下.     

拱手面罩在无痛胃镜检查中的应用经验

异丙酚起效快、恢复时间短且无蓄积,已广泛应用于内镜检查术.但由于其镇静作用强,对循环系统和呼吸系统均有明显的抑制作用,通常采用面罩给氧等方式[1].但由此可能影响胃镜操作流畅性、牙垫滑脱累及器械安全,甚或错过胃镜操作的最佳时机,给临床工作带来不便.因此,我们充分调动人的手灵活可塑、易于融合之特性,依照面罩原理.试探性将"拱手面罩"应用于无痛胃镜检查,疗效满意,现介绍如下.     

病理学教案编写的实践和体会

病理学是医学基础课,也是基础和临床之间的桥梁课.本教研室在国家精品课程的建设中,坚持对病理学教案进行规范化要求,现以生殖系统为例,浅谈一些实践和体会.     

急性脑梗死患者血清D-二聚体、HCY、UA水平与分级的相关性研究

急性脑梗死是脑梗死最常见的类型, 急性脑梗死患者人数约占我国脑梗死人数的70％, 其致残率高达37％, 病死率达到9％ [1].急性脑梗死的发病机制较为复杂, 是由于血管、血液、血液动力学的异常造成大脑动脉的狭窄和堵塞, 对患者及其家属的生活造成严重的影响[2].高血压、糖尿病、高脂血症、冠心病等均为急性脑梗死的主要危...     

银针肌肉刺激疗法治疗脊椎僵硬症临床观察

目的:探讨银针肌肉刺激疗法治疗脊椎僵硬症的临床疗效。方法:将60例脊椎僵硬症患者随机分为两组。肌肉刺激组30例,采用密集银针强度刺激肌肉易触痛性运动点治疗;传统针灸组30例,采用传统原则循证取穴治疗。对比两组近期(首次治疗后2个月)、远期(随访1～1.5年后)的临床疗效。结果:肌肉刺激组的近期、远期临床疗效均优于传统针灸组,差异有统计学意义(χ2=9.482 1,P=0.002 1;χ2=8.124 0,P=0.004 4)。结论:银针肌肉刺激疗法治疗脊椎僵硬症疗效显著,较传统针灸治疗具有明显的优势。     

川芎嗪对家兔肠系膜细动脉血管血管运动的抑制作用

在全身动脉血压控制下应用显微录像静画步进和二点光电法同步测定了川芎嗪对话体家兔肠系膜细动脉的内径、血流速度和血管运动的影响及其相互间的关系。结果发现川芎嗪有浓度依赖性的降压作用。给药后３０ｓ血压开始下降并持续１ｍｉｎ。８ｍｇ／ｋｇ比４ｍｇ／ｋｇ给药组降压作用大，２ｍｇ／ｋｇ组效果不明显。伴随血压下降８ｍｇ／ｋｇ给药组细动脉血流速度减慢，但内径无变化，４ｍｇ／ｋｇ和２ｍｇ／ｋｇ组效果不明显。又在活体显微镜下在３０～５０μｍ细动脉水平直接证明了川芎嗪有抑制局部投予去甲肾上腺素引起的血管运动的作用。并发现１６ｍｇ／ｋｇ比８ｍｇ／ｋｇ给药组抑制作用时间长。即使全身血压不变，细动脉血流也随血管运动周期变化，细动脉舒张血流量增加。将给去甲肾上腺素前与给川芎嗪后的内径对比变化不明显。提示ＴＭＰ的作用本质是抑制去甲肾上腺素引起的血管运动而不是扩张血管。     

黄芪与山莨菪碱对失血性休克兔肺缺血再灌注损伤保护作用的比较

目的　比较黄芪与山莨菪碱对失血性休克兔肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法　新西兰大白兔 2 4只。随机分为三组 ,H组 (n =8) :10g/kg黄芪注射液治疗组 ;S组 (n =8) :2 5mg/kg山莨菪碱注射液治疗组 ;C组 (n =8) :生理盐水对照组。复制失血性休克模型 ,观察肺湿干重比 (W/D)、肺组织损伤评分 ,测定血浆超氧化物歧化酶和丙二醛。结果　光学显微镜下可以观察到 ,C组肺脏呈重度或极重度损伤 ;H组和S组肺脏呈轻度或中度损伤。C组D/W值及肺损伤评分明显大于H、S组 (P <0 0 1) ,H、S两组间比较差异无显著性 (P >0 0 5 )。C组血浆超氧化物歧化酶明显低于其它两组 ,丙二醛明显高于其它两组 (P <0 0 1或P <0 0 5 ) ;H组血浆超氧化物歧化酶明显高于其它两组 ,丙二醛明显低于其它两组 (P <0 0 1或P <0 0 5 1)。结论　对于失血性休克兔肺组织中 ,黄芪比山莨菪碱具有更强的清除氧自由基作用 ,但两者对肺缺血再灌注损伤有相似的保护作用。