S-1联合DDP腹腔循环热灌注治疗老年胃癌合并腹水临床疗效观察

目的:观察替吉奥联合顺铂腹腔恒温循环热灌注治疗老年胃癌合并腹水的疗效和安全性.方法:47例患者口服替吉奥40-60mg/次,每天2次,d1-14,停药7d;顺铂90mg d1,60mg d8,均21d为1周期,2周期后行疗效评价,按照WHO标准评价客观疗效和不良反应.结果:47例患者均可进行客观疗效及安全性评价,CR 3例,PR 27例,NC 10例,PD 7例,腹水有效控制率(CR+ PR)为63.8％(30/47).mPFS为6.2个月,mOS为10.7个月.临床受益反应为80.9％ (38/47).不良反应主要为血液学毒性、胃肠道反应.Ⅲ-Ⅳ度贫血、白细胞减少、呕吐发生率分别为13例(27.7％)、10例(21.3％)、9例(19.1％).结论:替吉奥联合DDP腹腔循环热灌注方法治疗老年胃癌合并腹水近期疗效较好,不良反应可以耐受,值得进一步研究应用.     

顺铂腹腔热灌注化疗联合替吉奥治疗晚期胃癌伴腹腔积液疗效观察

目的评价口服替吉奥（S-1）联合腹腔热灌注化疗治疗晚期胃癌合并有腹腔积液-临床疗效、生活质量及其毒副作用。方法56例晚期胃癌患者分为实验组和对照组,试验组28例,予替吉奥40mg／m2,口服第1—14天;同时予腹腔热灌注化疗l先放出腹腔积液,后向腹腔内注入生理盐水1500～2500mL＋顺铂50mg／m2,腹腔持续热循环1h,结束前腹腔内注射速尿80mg,地塞米松10mg,第1,5天,3周为1周期,2周期后评定疗效。对照组28例,予替吉奥40mg／m2,口服第1—14天;同时予腹腔化疗：先放出腹腔积液,后向腹腔内注入生理盐水500mL＋顺铂50mg／m2,速尿80mg,地塞米松10mg,第1,5天,3周为1周期,2周期后评定疗效。结果试验组PR18例,有效率为64％,对照组PR13例,有效率为46％,2组比较有显著性差异（P〈0．05）;实验组生活质量Karnofsky评分高于对照组,2组比较有显著性差异（P〈0．05）;实验组血液毒副反应、胃肠道反应与对照组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论口服替吉奥（S-1）联合顺铂腹腔热灌注化疗治疗晚期胃癌合并腹腔积液疗效好,安全性高,可作为晚期胃癌合并腹腔积液较好的治疗方法。     

米非司酮用于药物流产术后蜕膜残留保守治疗40例的效果观察

目的评价米非司酮在药物流产术后蜕膜残留保守治疗中的临床疗效。方法选取医院2010年7月至2012年7月收治的药物流产术后蜕膜残留患者80例,随机分为观察组与对照组,各40例。对照组患者使用妇产科常规药物流产术后蜕膜残留手术清宫法,观察组患者使用米非司酮进行保守治疗。观察两组患者的治疗效果、治疗后感染发生率、患者负面情绪评分等。结果与对照组比较,观察组临床疗效明显较优(P<0.05),治疗后的感染发生率明显降低(P<0.01),疼痛评分、抑郁评分、焦虑评分均明显降低(P<0.05)。结论对于药物流产后蜕膜残留患者,使用米非司酮保守治疗可有效提高治疗效果,降低感染发生率,减轻患者负面情绪。     

基于α-病毒复制酶的基因疫苗对人黑色素瘤的免疫作用

目的研究基于α-病毒复制酶的人黑色素瘤基因疫苗免疫学作用.方法建立及鉴定人/鼠嵌合模型(trimera),将基于α-病毒复制酶的mage-3基因疫苗免疫动物,检测动物体内特异抗体滴度;用标准4 h51Cr释放实验检测动物体内特异CTL活性.结果FACS分析显示,trimera小鼠腹腔细胞中人白细胞占总细胞的88.84%,脾脏细胞中人白细胞的比例占57%,同国外文献报道一致.基于α-病毒复制酶的重组基因疫苗mage-3/pSMART2a对trimera小鼠免疫后,小鼠腹腔细胞的CTL在效靶比为100:l时杀伤率达到70%左右,此时的对照组mage-3/pCI-neo组最大杀伤率为40%左右.ELISA结果显示,重组基因疫苗mage-3/pSMART2a组产生的mage-3抗原特异性抗体效价达到1:512,mage-3/pCI-neo组为1:256.结论成功建立了人/鼠嵌合模型,并在动物体内激发出针对人黑色素瘤基因疫苗的初次免疫应答.     

放射诱导正反馈基因环路调控Wt-p53表达对肺腺癌移植瘤的抑制作用

目的:探讨放射控导的wt-p53蛋白正反馈基因环路对肺腺癌细胞裸鼠移植瘤放射增敏作用及机制。方法:将治疗组pE6R4-p53-EGFP/H1299细胞和对照组pE6-p53-EGFP/H1299、pR4-p53-EGFP/H1299、H1299(p53-/-)细胞分别注射于裸鼠背部皮下,建立裸鼠移植瘤模型;X线照射后,绘制肿瘤生长曲线;计算各组抑瘤率;免疫组化法检测瘤组织wt-p53表达;计算TCD50及放射增敏比(SER)。结果:pE6R4-p53-EGFP/H1299+IR组移植瘤生长明显受抑制,抑瘤率(86.41%)明显高于对照组pE6-p53-EGFP/H1299+IR组(70.76%)、pR4-p53-EGFP/H1299+IR组(35.53%)和H1299+IR组(12.58%)。免疫组化提示pE6R4-p53-EGFP/H1299组比pR4-p53-EGFP/H1299、pE6-p53-EGFP/H1299组wt-p53蛋白表达量明显增高。pE6R4-p53-EGFP/H1299组和对照组pE6-p53-EGFP/H1299和H1299(p53-/-)荷瘤鼠TCD50分别为12.1Gy、15.2Gy和19.4Gy,SER分别为1.6和1.28。结论:放射控导的wt-p53蛋白正反馈基因环路能在体内正常激活并发挥抗肿瘤生物学效应,且显著增加了瘤组织对放射的敏感性。     

PD-L1 mAb的制备、鉴定及其特性的研究

目的制备抗程序化死亡配体-1(Programmed Death-Ligand 1,PD-L1)的mAb杂交瘤细胞系并对其分泌的抗体特性进行研究。方法用我室纯化的PD-L1／IgG4 Fc融合蛋白免疫Balb／c小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2／0进行融合,经筛选和克隆化后,建立杂交瘤细胞系。以Western-blot等方法研究抗体特性。结果得到3株能够稳定分泌抗体,效价高的杂交瘤细胞系2D10、1C3和1A6,Western-blot显示2D10、1C3和1A6能与PD-L1(Mr为5800)结合。结论得到杂交瘤细胞系稳定分泌的mAb,在抗病毒免疫、抗肿瘤反应和自身免疫性疾病的免疫诊断和／或治疗方面可能有广阔的应用前景。     

替吉奥联合顺铂腹腔热灌注化疗治疗晚期结直肠癌合并腹腔积液48例疗效观察

结直肠癌是最常见恶性肿瘤之一,每年新发病例约100万（占新发肿瘤的9．4％）,男女之比为1．2∶1。我国结直肠癌患者每年新发约15万人,死亡率超过7／10万,且病死率仍有逐年上升趋势［1］。手术治疗是其首选治疗方案,文献［2］报道,有25％的结直肠癌患者就诊时已为中晚期,超过25％的患者第1次根治术后将复发和转移。腹膜转移、腹腔积液也是晚期结直肠癌常见并发症,严重影响着患者的生活质量,尽快控制腹水显得尤为重要。既往常规治疗方法为放腹水后直接向腹腔内注入化疗药物,疗效一般。我科于2009年6月至2013年9月对48例患者采取口服替吉奥（S-1）联合顺铂腹腔热灌注化疗治疗晚期结直肠癌伴腹水,取得较好疗效。现报告如下。     

胃癌区域淋巴结中CD4~+CD25~+Foxp3~+T水平与细胞因子相关性分析

目的观察胃癌区域淋巴结中CD4~+CD25~+Foxp3~+T细胞(Treg细胞)分布及与外周血白介素(IL)-10和转化生长因子(TGF)-β_1的关系。方法采用流式细胞术检测48例胃癌患者(淋巴结转移26例,无转移22例)区域引流淋巴结中Treg细胞频数;ELISA方法检测外周血血清TGF-β_1和IL-10水平。分析Treg细胞与TGF-β_1、IL-10相关性。结果 Treg细胞在淋巴结转移患者阳性淋巴结中水平为(18.16±2.51)%,显著高于阴性淋巴结[(13.51±2.48)%],差异有统计学意义(P0.05),且阴性淋巴结Treg细胞比例显著高于无转移患者淋巴结[(9.27±2.16)%],差异有统计学意义(P0.05)。ELISA结果提示淋巴结转移患者外周血TGF-β_1和IL-10水平显著高于无转移患者,差异有统计学意义(P0.05)。胃癌患者引流区淋巴结Treg细胞分布比例与外周血血清TGF-β_1(r=0.73,P0.01)和IL-10水平(r=0.81,P0.01)呈明显正相关。结论胃癌患者区域引流淋巴结中Treg细胞分布与淋巴结转移密切相关,Treg细胞可能通过分泌TGF-β_1和IL-10导致胃癌淋巴结微环境发生免疫抑制,是胃癌发生淋巴结转移的重要因素之一。     

放射控导正反馈基因环路对肺癌wt-p53基因靶向性表达的研究

目的 构建pE6R4/p53/GFP重组质粒并检测其在人非小细胞肺癌H1299(p53-/-)细胞的辐射诱导表达.方法 用嵌合型增强子E6R4取代pci-neo质粒的CMV增强子,将wt-p53cDNA全长序列、IRES2-EGFP报告基因片段构建于嵌合型增强子E6R4下游,获得pE6R4/p53/GFP重组质粒,采用脂质体法将重组质粒转染人非小细胞肺癌H1299(p53-/-)细胞;采用RT-PCR方法鉴定wt-p53基因整合情况;Western-blot方法检测不同辐射剂量8mV X线照射后,被转染细胞中wt-p53蛋白表达水平和持续时间.结果 酶切和测序鉴定pE6R4/p53/GFP重组质粒构建正确;不同剂量8mV X线照射后,4Gy照射剂量时wt-p53基因表达最强,且持续时间延长.结论 成功将辐射反应元件和正反馈基因环路技术相结合,实现了wt-p53基因的表达调控,为进一步研究非小细胞肺癌的放射-基因联合治疗奠定了基础.     

中和性马抗体对SARS-CoV感染的防治作用

目的探讨马抗SARSCoV中和性抗体是否对SARSCoV感染有防治作用。方法用SARSCoV(BJ01株)免疫马匹,从免疫马血清中制备IgGs及其F(ab’)2片段。通过细胞病变法(CPE)、MTT法和空斑形成实验(PFU)等方法,在体外培养的VeroE6细胞中检测F(ab’)2片段对SARSCoV感染的预防性和治疗性作用。再在Balb/c小鼠体内模型中,用CPE法和定量RTPCR方法检测该抗体的保护性效应。结果CPE、MTT和PFU三种方法证实来自三匹马的血清F(ab’)2的中和滴度均达到1∶1600以上。体内实验证实,50μg的F(ab’)2片段可以完全中和1×104TCID50SARSCoV。结论马抗SARSCoV抗体在体内外均能有效地中和SARSCoV和预防其感染宿主细胞,为马抗体将来在大的灵长类动物或人体内进行实验提供实验依据。