三七皂甙对肝纤维化大鼠分泌型磷脂酶A2和肿瘤坏死因子表达的影响

用四氯化碳复制大鼠肝纤维化模型,探讨三七皂甙对细胞因子的影响,研究三七皂甙单体Rg_1、Rb_1抗纤维化的作用机制。 一、材料与方法1.材料:(1)肿瘤坏死因子α(TNFα)和前列腺素E2GE2)试剂盒分别购自第四军医大学免疫学教研室和苏州医     

失血性休克时肠上皮细胞线粒体形态与功能变化研究

目的：定量分析大鼠失血性休克肠上皮细胞线粒体形态与功能的改变，探讨失血性休克缺血缺氧时肠上皮细胞线粒体结构和功能的改变。方法：Wistar大鼠随机分为对照组、失血性休克2h和5h组，采用电镜观察、生物体视学测量线粒体形态，用Clark氧电极测线粒体呼吸功能。结果：失血性休克2h组线粒体平均截面周长、长径、平均直径及其面密度、体密度分别较对照组增加24％、27％、25％、26％、44％，失血性休克5h组则分别较对照组增加45％、45％、45％、47％、122％。休克5h组与对照组比较，平均截面积增加100％，比表面和数密度分别下降32％、24％，嵴和基质破坏明显。休克2h线粒体呼吸控制率(RCR)已下降，休克5h组线粒体呼吸控制率与对照组比较减少26．9％。P／O值三组无改变。结论：失血性休克时大鼠肠上皮细胞线粒体形态发生显著改变：表现为肿胀，嵴和基质破坏，数量减少。RCR值失血性休克2h开始降低。P／O值变化不明显。     

三七皂甙单体Rg_1、Rb_1对大鼠脑缺血再灌注损伤时分泌型磷脂酶A_2的影响

目的　探讨三七皂甙单体Rg1 、Rb1 (三七Rg1 、Rb1 )在脑损伤时对脑细胞凋亡和分泌型磷脂酶A2 (secretoryphospholipaseA2 ,sPLA2 )及其相关介质的影响。方法　用线栓法制成大脑中动脉缺血再灌注 (middlecerebralarteryischemia reperfusion ,MCA IR)模型 ,用原位末端标记 (TUNEL)法检测脑细胞凋亡 ,用免疫组织化学法检测sPLA2 在脑细胞中的表达 ,用3H标记大肠杆菌膜为底物的液闪方法和酶联免疫吸附测定 (ELISA)法 ,分别检测血清中sPLA2 活性和肿瘤坏死因子 α(TNF α)、前列腺素E2 (PGE2 )水平。结果　在大鼠MCA IR脑损伤时 ,三七Rg1 、Rb1 明显降低凋亡细胞数和血清中sPLA2 、TNF α、PGE2 水平及sPLA2 在脑细胞中的表达 ,与对照组相比 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。结论　三七Rg1 、Rb1 对MCA IR脑损伤有良好的保护作用 ,其机制在于抑制sPLA2 的激活、表达及其相关介质的水平。     

磷脂酶A2和溶血磷脂酸在卵巢癌诊断中的价值

目的探讨分泌性磷脂酶A2(sPLA2)和溶血磷脂酸(LPA)对卵巢癌诊断、病程监测和预后预测的价值.方法用 3H标记大肠杆菌膜为底物的液闪方法和比色法,分别对初发或复发卵巢癌和卵巢良性肿瘤患者各30例进行血液中sPLA2活性和LPA水平检测,并与乳腺癌患者作比较,同时对手术前后卵巢癌患者进行动态检测,以评价两项指标在卵巢癌检测中的敏感性和特异性.结果初发卵巢癌组与卵巢良性肿瘤组相比,sPLA2活性(24.47±5.64 U/L与4.94 ±1.86 U/L)和LPA水平(6.35 ±2.32与1.92 ±0.75 mmol/L)差异均具有统计学意义 (均P＜0.01).复发卵巢癌组与卵巢良性肿瘤组相比,sPLA2活性(26.53 ±6.05 U/L与4.94 ±1.86 U/L)和LPA水平(7.03 ±2.77 mmol/L与1.92 ±0.75 mmol/L)差异也均具有统计学意义(均P＜0.01).初发卵巢癌组手术前后sPLA2活性和LPA水平与时间变化相关(分别r=0.88,r=0.81,均P＜0.05).sPLA2活性和LPA水平的敏感性分别为100%和95%,特异性分别为73.3%和83.3%.初发和复发卵巢癌与初发和复发乳腺癌相比, LPA水平差异有统计学意义(P＜0.01).结论 sPLA2活性和LPA水平可能对卵巢癌的诊断、治疗监测和预后评价有一定的价值.     

失血性休克大鼠小肠上皮细胞线粒体ATPase8亚基表达的变化

目的探讨正常与休克大鼠小肠上皮细胞线粒体DNA（mitochondria DNA,mtDNA）ATPase8亚基及其表达的变化,为休克的防治提供理论基础。方法用透射电镜观察大鼠小肠上皮细胞线粒体形态学变化,用基因重组、测序,通过gene Bank与mtDNA已知序列进行比较,研究大鼠小肠上皮细胞mtDNA ATPase8基因的改变。用RT-PCR观察大鼠小肠上皮细胞线粒体ATPase8 mRNA的表达。结果休克组大鼠小肠上皮细胞线粒体数密度和面密度与对照组相比有显著差异（P〈0.05或P〈0.01）。正常组小肠上皮细胞mtDNA ATPase8亚基9个DNA测序有2处突变（A7868G,空7767-7768G）。休克组有3处突变,即A7797空,T7772C、T7863C。失血性休克组大鼠上皮细胞线粒体ATPase8 mRNA表达比正常组显著性下降（P〈0.05）,为对照组的27.3%。结论休克大鼠小肠上皮细胞mtDNA ATPase8基因突变以及表达水平下降是导致ATPase8亚基改变的重要原因。     

微柱凝胶法交叉配血试验次侧凝集原因分析

微柱凝胶法交叉配血是近年来全国各大医院输血科普遍使用的一项免疫分析方法。不仅可以检出IgM类血型抗体,也可检出IgG类不完全抗体,大大降低了溶血性输血反应的发生。但该方法在配血过程中常出现次侧凝集现象,若不能快速作出正确合理的分析和处理,则会影响临床输血的及时性和安全性。本文对本院使用微柱凝胶法交叉配血出现次侧凝集的病例进行分析,发现可能与受血者本身的疾病有一定关系,报告如下。     

慢性阻塞性肺疾病急性加重患者血清CRP、TNF-α和PLA2水平变化及意义

慢性阻塞性肺疾病急性加重（acute exacerbation ofchronic obstructive pulmonary disease,AECOPD）是COPD患者死亡的重要因素,也是患者医疗费用居高不下的主要原因.AECOPD对患者的生活质量、肺功能、疾病进程和社会经济负担产生严重的负面影响.AECOPD主要特征是持续存在的气流受限,急性加重及合并症影响患者整体疾病的严重程度.     

慢性阻塞性肺疾病急性加重合并呼吸衰竭患者血清环氧化酶2和前列腺素E2及磷脂酶A2水平的变化及其临床意义

目的 观察慢性阻塞性肺疾病急性加重合并呼吸衰竭患者血清环氧化酶2、前列腺素E2和磷脂酶A2水平变化及意义.方法 选取河北省涿州市医院2011年12月至2012年12月100例慢性阻塞性肺疾病急性加重患者,完全随机分为无呼吸衰竭组（50例）和呼吸衰竭组（50例）,另选择20例健康查体者作为健康对照组.观察3组患者血清环氧化酶2、前列腺素E2和磷脂酶A2的变化.结果 呼吸衰竭组和无呼吸衰竭组血清环氧化酶2、前列腺素E2和磷脂酶A2浓度明显高于健康对照组[（158±45）、（132±12）μg/L比（57±12）μg/L,（317±213）、（207±30）ng/L比（103±18）ng/L,（28.2±1.5）、（20.2±1.4）μg/L比（7.0±2.4）μg/L],差异均有统计学意义（均P＜0.05）.呼吸衰竭组血清环氧化酶2、前列腺素E2和磷脂酶A2浓度与无呼吸衰竭组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.呼吸衰竭组血清环氧化酶2、前列腺素E2水平与磷脂酶A2水平呈正相关（r分别为0.406、0.356,P＜0.05）;血清环氧化酶2水平与前列腺素E2水平呈正相关（r为0.848,P＜0.01）.结论 慢性阻塞性肺疾病急性加重合并呼吸衰竭患者血清环氧化酶2、前列腺素E2和磷脂酶A2的浓度明显升高,血清环氧化酶2、前列腺素E2和磷脂酶A2三者之间相互关联并相互作用,共同导致呼吸衰竭的发生和发展.     

三七皂甙Rg1、Rb1对大鼠脑缺血、缺氧损害的保护及机理研究

目的: 本文研究缺血再灌流时大鼠脑损害及脑细胞凋亡规律以及与转录因子的关系,探讨三七皂甙Rg1、Rb1对脑缺血、缺氧损伤的保护作用及作用机理.方法:(1)动物模型复制及实验分组: Wistar大鼠随机分为5组:模型组、Rg1组、Rb1组、正常对照组和假手术组.模型组采用大脑中动脉闭塞/再灌流模型, 采用线栓法制成.大鼠麻醉后仰卧固定,取颈正中切口,分离左侧颈总动脉,颈内动脉、颈外动脉.结扎并剪断颈外动脉,剪口将尼龙线栓经颈内动脉插入颅到大脑前动脉起始处,阻断自颈内动脉和大脑前动脉流向大脑中动脉的血流. Rg1组、Rb1组分别于手术后立即腹腔注射Rg1、Rb1.(2)标本收集及检测指标:采集大脑标本及血清标本,Tunel原位杂交和免疫组化方法检测细胞凋亡、测定TNFα、sPLA2、cPL A2 、PGE2及c-fos、c-jun表达的变化以及Rg1、Rb1对其影响.结果: (1) 正常组及假手术组仅偶见Tunnel阳性细胞.缺血再灌24-48 h凋亡细胞数位于高峰,再灌60 h,可见凋亡细胞数量下降.(2) 正常及假手术组未见明显的c-fos、c-jun阳性细胞,缺血再灌0.5 h 在大脑皮层、海马可见阳性细胞,24 h达高峰,Rg1、Rb1明显抑制缺血再灌后c-fos、c -jun的蛋白表达.(3) 大鼠血清TNFα、sPLA2在缺血再灌12 h达高峰,PGE2呈双相变化,峰值分别在0.5 h和12 h,此后处于平台期.Rg1、Rb1明显抑制血清TNFα、s PLA2、PGE2水平.(4) Rg1、Rb1对sPLA2蛋白表达的影响:正常组及假手术组大脑切片可见有少量sPLA2蛋白表达,缺血再灌12 h sPLA2表达达高峰.Rg1、Rb1组sPLA2蛋白表达明显减少,Rg1、Rb1可抑制sPLA2的蛋白表达.讨论和结论: Rg1、Rb1对缺血再灌注引起的大脑皮层、海马细胞的凋亡和脑损害, 其机理在于:(1)抑制c-fos、c-jun的蛋白表达,阻断刺激信息的传递;(2)抑制PLA 2基因的表达;(3)抑制TNFα水平,阻止TNFα诱导脑神经细胞凋亡及阻止TNFα参与众多的细胞因子形成的网络系统;(4)抑制sPLA2活性及蛋白表达,sPLA2直接或通过脂类介质参与脑细胞凋亡与坏死过程,是神经元损伤的重要原因.