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目的观察载体介导的RNA干扰技术能否有效抑制人乳腺癌细胞株MCF-7的hTERT的表达及其对细胞周期及凋亡的影响。方法构建2个针对hTERT基因表达短发夹状siRNA的真核表达载体(pshRNA-hTERT)并转染人乳腺癌细胞株MCF-7,通过RT-PCR检测该基因mRNA,Western blot蛋白质检测,端粒酶活性检测,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡等方法检测RNAi效果,从中筛选出基因沉默效果好的靶位点。结果转染乳腺癌细胞后,pshRNA-hTERT1,2质粒均能抑制hTERT基因表达,mRNA表达分别下调了54.6%,55.2%;蛋白表达分别下调46.6%,47.8%。端粒酶活性均明显下降。对乳腺癌细胞周期中S期细胞明显减少,G1/G0期细胞显著增加。结论 RNAi在体外明显抑制乳腺癌细胞中hTERT基因的表达和瘤细胞增殖。 相似文献
103.
医学是以人为本的科学,"人文关怀"为一哲学理念,它的提出标志着医务工作者的思想认识上升到一种理性高度.人性化护理是一种创造性的、个性化的、整体的、有效的护理模式.护理人文关怀是护士将获得的知识内化后,自觉地给予患者的情感付出[1].其目的是使患者在生理、心理、社会、精神上处于满足而舒适的状态,减少或降低不适的程度.人性化护理更注重给予服务对象人性化的关怀和照顾[2]. 相似文献
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目的 观察载体介导的RNA干扰技术能否有效抑制人乳腺癌细胞株MCF-7的hTERT的表达及其对细胞周期及凋亡的影响.方法 构建2个针对hTERT基因表达短发夹状siRNA的真核表达载体(pshRNA-hTERT)并转染人乳腺癌细胞株MCF-7,通过RT-PCR检测该基因mRNA,Western blot蛋白质检测,端粒酶活性检测,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡等方法检测RNAi效果,从中筛选出基因沉默效果好的靶位点.结果 转染乳腺癌细胞后,pshRNA - hTERT1,2质粒均能抑制hTERT基因表达,mRNA表达分别下调了54.6%,55.2% 蛋白表达分别下调46.6%,47.8%.端粒酶活性均明显下降.对乳腺癌细胞周期中S期细胞明显减少,G1/G0期细胞显著增加.结论 RNAi在体外明显抑制乳腺癌细胞中hTERT基因的表达和瘤细胞增殖. 相似文献
105.
目的 探讨接受全身麻醉手术患者应用手术室保温护理的临床效果.方法 我院2022年10月至2023年3月期间进行全身麻醉手术的患者9549例,随机分为对照组和观察组.对照组患者数量为4774例,观察组患者数量为4775例.对照组实施一般性护理,观察组实施手术室保温护理.对比两组患者围术期体温,术后并发症及应激性指标.结果 在术中10min、30min及术后1h观察组患者的体温均较对照组高(P<0.05).在术后低体温、恶心呕吐、呼吸抑制上,观察组患者出现上述不良症状的概率均低于对照组(P<0.05).在两组患者的应激性指标上观察组患者均较对照组出现明显的下降(P<0.05).结论 全身麻醉手术患者应用手术室保温护理,能有效保持患者整个围术期的体温,预防患者出现低体温、恶心呕吐、呼吸抑制,降低患者的应激性指标. 相似文献
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108.
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目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)对人未分化甲状腺癌FRO细胞增殖及凋亡的影响及其可能机制。方法取对数生长期的FRO细胞,分别加入终浓度为0μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL的NCTD,分别干预12 h、24 h、48 h后,检测细胞增殖情况,计算增殖抑制率。取对数生长期的FRO细胞,分为0μg/mL组、10μg/mL组、20μg/mL组、40μg/mL组,加入相应浓度的NCTD,干预24 h后检测细胞凋亡情况、B淋巴细胞肿瘤-2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)凋亡相关因子mRNA表达情况、线粒体膜电位;干预2周后克隆形成实验检测细胞克隆率。结果随着NCTD浓度增大、干预时间延长,FRO细胞增殖抑制率增加(P<0.05)。10μg/mL组、20μg/mL组、 40μg/mL组均出现细胞凋亡,且浓度越高凋亡现象越明显。0μg/mL组、10μg/mL组、20μg/mL组、 40μg/mL组细胞克隆形成率、细胞线粒体膜电位、Bcl-2 mRNA表达水平依次降低,Bax mRNA表达水平依次升高(均P<0.05)。结... 相似文献
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目的 设计并合成人TERT特异性的锤头状核酶(hammerhead ribozyme)基因并构建其真核表达载体.含有核酶靶基因hTERTcDNA保守序列的T载体pMD18-T-hTERT的构建.方法 运用计算机软件人工设计并合成核酶基因(RZ),将核酶基因克隆到真核表达载体pcDNA 3.1(+)中,重组子由BamH I和EcoR I酶切,琼脂糖凝胶电泳鉴定及DNA测序.RT-PCR法扩增目的 基因cDNA保守序列,与pMD-18进行T-A连接,重组子经菌液PCR及测序鉴定.结果 RZ人工合成后与pcDNA 3.1(+)连接,酶切电泳及DNA测序证实合成的核酶基因序列正确并已被准确克隆入pcDNA 3.1(+)的BamH I和EcoR I位点之间,命名为pcDNA 3.1-RZ.220bp的hTERT基因cDNA保守序列准确克隆于pMD18-T,命名为pMD18-T-hTERT.结论成功合成hTERT特异性的锤头状核酶基因并构建了该基因的真核表达载体,以及核酶靶基因的pMD18-T-hTERT载体. 相似文献