促红细胞生成素对维持性血透患者免疫功能的影响

目的　观察维持性血透患者应用重组人促红细胞生成素 (EPO)治疗 3个月后 ,与治疗前及与对照组比较免疫功能的变化。方法　利用流式细胞仪检测 16例维持性血透患者EPO治疗前及治疗 3个月后CD3,CD4 ,CD8,CD11a,CD11b,CD19,CD56及中性粒细胞呼吸爆发功能。 10例无使用EPO的维持性血透患者同步抽血作为对照组。用方差分析比较治疗 3个月后与治疗前免疫功能的变化 ,并比较治疗 3个月后组与对照组间免疫功能的差异。结果　EPO治疗 3个月后 ,与治疗前及对照组对比 ,CD3 及CD4 阳性T细胞无明显变化 (P >0 0 5 ) ,CD8阳性T细胞显著升高 (P <0 .0 1) ,CD4 /CD8比值降低 (P <0 0 1) ;CD19阳性细胞无显著升高 (P >0 0 5 ) ;CD56阳性细胞明显增加 (P <0 .0 1) ;CD11a及CD11b阳性细胞显著降低 (P <0 0 1) ;中性粒细胞呼吸爆发功能增强 (P <0 0 1)。结论　EPO治疗 3个月后维持性血透患者机体体液免疫功能无明显变化 ,而细胞免疫功能增强     

维持性血透患者应用重组人生长激素的意义

目的　评价维持性血透患者应用重组人生长激素 (rhGH)后营养状态改善的疗效。方法　随机选择 10例血透患者给予rhGH 4IU/m2 ,隔日 1次 ,另 10例未用药的常规血透患者做为对照组。两组血透患者饮食中蛋白质摄入量无明显差别 ,分别检测血中的生长激素 (GH)、血浆胰岛素样生长因子 (IGF -1)及转铁蛋白水平。结果　治疗 3个月后 ,rhGH治疗组的体重有明显增加 (P <0 0 5 ) ,IGF -1水平明显升高 (P <0 0 1) ,血清转铁蛋白水平明显升高 (P <0 0 1)。同时 ,患者血清尿素氮 (BUN)水平有明显下降 (P <0 0 5 )。结论　维持性血透患者短期应用rhGH后能有效改善血透患者的营养状态 ,并可改善患者的氮质血症     

不同形式补铁对使用促红细胞生成素治疗肾性贫血疗效的影响

目的　评价使用促红细胞生成素 (EPO)治疗肾性贫血患者给予不同形式补铁后贫血改善的情况。方法　将 3 9例血透患者分为 3组 :第 1组给予静脉补铁 ,第 2组给予口服补铁 ,第 3组未给予补铁 ,观察 4个月 ,观察血红蛋白浓度、EPO剂量及血清铁蛋白浓度的变化。结果　第 1组患者 (接受静脉补铁 )血红蛋白明显上升 ,高于其他两组 (P<0 .0 5 ,P <0 0 0 1) ,而在第 2组 (口服补铁 )和第 3组 (未补铁 )之间差异无显著性 (P =0 .2 )。第 1组患者 (接受静脉补铁 )的血清铁蛋白水平维持稳定 ,相反 ,另二组患者血清铁蛋白水平下降显著 (P <0 .0 0 1)。EPO的剂量在第 1组比较少 ,第 2组次之 ,第 3组最多。结论　即使在无铁缺乏的患者 ,对比口服补铁和未补铁 ,给予静脉补铁将更好地维持铁的储备 ,提高血红蛋白对EPO的反应 ,同时也可降低EPO的剂量。     

血浆置换联合连续性血液净化技术治疗伴有急性肝衰竭多器官功能障碍综合征的临床观察

目的　研究血浆置换 (PE)联合连续性血液净化 (CBP)治疗伴有急性肝衰竭 (ALF)多器官功能障碍综合征 (MODS)的疗效。方法　 16例伴有急性肝衰竭的MODS患者除经内科常规治疗外 ,行PE联合连续性静脉 -静脉血液滤过 (CVVH)治疗 ,在治疗前、PE后、CVVH结束时 ,分别抽血测肝肾功能、血氨、TNF -α及IL- 6的水平 ,并进行ICU监护。结果　在治疗过程中 ,血流动力学稳定 ,血浆置换后血氨、ALT、TBIL、TBA、TNF -α、IL - 6明显下降 (P <0 0 5 ) ,而BUN、Cr下降不明显 ,CVVH治疗后血氨、BUN、Cr、TNF -α、IL - 6呈进行性下降 ,与治疗前相比差异显著 (P <0 0 5 ) ,而TBIL、TBA变化不明显 ,SIRS积分从 2 7分± 0 5分降到1 3分± 0 3分 (P <0 0 5 )。APACHEⅡ评分从 19 6± 5 3下降到 13 2± 2 6 (P <0 0 1) ,存活率为 4 3 75 %(7/16 )。结论　PE联合CVVH治疗能有效清除伴有急性肝衰竭MODS患者炎性介质TNF -α、IL - 6水平 ,改善肝肾功能 ,有效改善MODS的预后     

检测血清胱抑素C诊断急性肾衰竭的研究

目的:探讨血清胱抑素C(cystatin C)在诊断急性肾衰竭(acute renal failure,ARF)中的临床价值。方法:收集215例ICU病人的血标本,用酶法测定血清肌酐(serum creatinine,Scr),用颗粒增强透射免疫比浊法测定血清cystatinC,用Cockroft-Gault公式计算肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR),ARF诊断按ADQI标准。比较ARF病人与非ARF病人上述各指标。结果:41例ARF病人(观察组)血清cystatinC水平较174例非ARF病人(对照组)明显升高(P<0·01);ARF病人血清cys-tatinC与Scr呈正相关(r1=0·747,P<0·001)、与GFR呈负相关(r2=-0·808,P<0·001);以Scr升高达到或超过150%作为ARF的诊断标准时,ROC曲线分析显示血清cystatinC对ARF的诊断准确度高(曲线下面积为0·983)。结论:ARF时血清cystatinC明显升高,cystatinC可作为ICU危重病人并发ARF的诊断指标之一。     

转化生长因子β1及Smad信号转导通路在肾小球硬化中的作用

目的探讨转化生长因子β1(TGF—β1)及其信号转导分子Smad2、Smad3、细胞外基质(ECM)在肾小球硬化过程中的表达及其意义。方法以20例正常肾组织为对照组,对38例各种不同组织学类型的肾活检标本,用免疫组织化学染色方法观察TGF—β1、Smad2、Smad3、纤连蛋白(FN)在肾小球中的染色强度,并对检测结果作图像分析处理。以体外培养的人系膜细胞为对象,观察TGF-β1对系膜细胞表达Smad2、Smad3、FN的影响。Smad2、Smad3、FN的基因表达采用RT—PCR检测;Smad2、Smad3、FN的蛋白表达采用Western印迹检测。结果所有增生、硬化病理类型肾小球肾炎中病变肾小球TGF—β1、Smad2、Smad3、FN蛋白表达均显著高于对照组(P<0.05),且TGF—β1、Smad2、Smad3在肾小球中的表达与FN在肾小球中的蓄积呈显著正相关(P<0.05)。外源性TGF—β1刺激人肾系膜细胞后,系膜细胞Smad3mRNA和蛋白表达显著增高(P<0.05);Smad2mRNA和蛋白表达无明显改变(P>0.05);FNmRNA和蛋白表达显著增高(P<0.05)。结论TGF—β1及其信号转导分子Smad蛋白可能参与了ECM在病变肾小球中的过量蓄积,从而在肾小球硬化过程中起重要作用。     

1,25(OH)2D3抑制嘌呤霉素氨基核苷酸肾病大鼠足细胞凋亡

目的 观察1，25（OH）2D3对嘌呤霉素氨基核苷酸（PAN）肾病大鼠足细胞凋亡的影响。 方法 72只雄性SD大鼠随机分为健康对照组（NC）、PAN组和1，25（OH）2D3治疗组 [1，25（OH）2D3 0.2 μg·kg-1·d-1灌胃]。一次性尾静脉注射PAN 100 mg/kg体质量建立足细胞损伤的PAN肾病动物模型。于3、7、14、21 d分批处死动物，分别检测不同时间点尿蛋白量（24 h）和肾功能。光镜和透射电镜观察肾组织学改变。TUNEL法检测足细胞凋亡。RT-PCR、免疫荧光、免疫组化分别检测nephrin、TGF-β1 mRNA和蛋白的表达。Western印迹检测磷酸化（p）-Smad2/3的表达。 结果 （1）PAN组各时间点BUN、Scr、尿蛋白量（24 h）[7 d时，（20.26±4.87） mg比（1.01±0.41） mg，P < 0.01]均高于同期的NC组，而肾小球足细胞显著减少[14 d时，(10.9±4.2) 个/肾小球切面比(31.9±6.2)个/肾小球切面，P ＜ 0.01]，且足突增宽融合。1，25（OH）2D3治疗组各时间点尿蛋白量（24 h）[7 d时（9.95±3.82） mg]和BUN、Scr显著低于PAN组（P < 0.05），且肾脏病理改变减轻。（2）PAN组7 d时nephrin mRNA和蛋白的表达显著降低，nephrin由正常的沿毛细血管襻线状分布向颗粒状、团快状改变，足细胞凋亡数显著增加[14 d时，（37.4±7.9）个/肾小球切面]。与PAN组相比，1，25（OH）2D3治疗组各时间段nephrin mRNA和蛋白的表达显著增加，且保持着正常的沿毛细血管襻线状分布，足细胞凋亡数显著减少[14 d时，(21.9±6.2) 个/肾小球切面，P < 0.01]。（3）PAN组TGF-β1 mRNA和蛋白的表达以及p-Smad2/3蛋白的表达均高于NC组（P < 0.01），1，25（OH）2D3治疗组TGF-β1 mRNA和蛋白的表达以及p-Smad2/3蛋白的表达低于PAN组（P < 0.01）。 结论 1，25（OH）2D3能有效地抑制PAN诱导的足细胞凋亡，减少尿蛋白，其对足细胞损伤的保护作用可能与抑制TGF-β1信号通路有关。     

p38 MAPK信号途径参与大鼠系膜细胞MMP2表达

目的探讨系膜细胞中调节MMP2表达的信号通路。方法鼠系膜细胞培养,分别加入酪氨酸激酶抑制剂（Herbimycin A）,p38MAPK抑制剂（SB203580）,MEK抑制剂（U0126）,ERK抑制剂（PD098059）,P13K抑制剂（Y294002）,用酶谱法分析MMP2酶活性、用RT-PCR及Westem方法从基因及蛋白水平,观察阻断剂对MMP2表达的影响。结果酪氨酸激酶抑制剂、MEK抑制剂、ERK抑制剂及P13K抑制剂对MMP2酶活性、mRNA及蛋白水平无影响,在72hp38MAPK抑制剂SB203580抑制MMP2活性25％。在48h当SB203580浓度分别为10、20、30及40μmol／L时,系膜细胞中MMP2的抑制率分别为7．2％、13．5％、21．3％及28％。结论大鼠系膜细胞中p38MAPK信号传导途径参与了MMP2的表达,并且p38MAPK抑制剂SB203580对MMP2的抑制有剂量依赖性。     

转化生长因子-β1反义RNA腺病毒载体的构建

目的构建含转化生长因子β1(TGF-β1)反义RNA的重组腺病毒重组体。方法将TGF-β1的cDNA5＇端630bp片段反向插入穿梭载体pAdTraek-CMV,构建为TGF-β1反义RNA的重组体(pAdTrack-antiTGFβ1),将重组体pAdTrack-antiTGFβ1与包装质粒pAdEasy-1共转染BJ5183细菌。用选择培养基筛选同源重组的阳性克隆,同源重组的腺病毒载体转染293细胞,在荧光显微镜下观察细胞中的绿色荧光蛋白(GFP)及PCR扩增目的基因等方法鉴定重组的腺病毒。结果构建了含rGF-β1反义RNA的重组腺病毒,其滴度为2.4×10