RNAi沉默人端粒酶逆转录酶对HeLa细胞生长及药物敏感性影响的研究

目的:探讨利用短发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)抑制人端粒酶逆转录酶(hTERT)的表达后对人宫颈癌HeLa细胞生长及药物敏感性的影响.方法:将构建的hTERT-shRNA真核表达载体用脂质体转染入HeLa细胞中,经G418筛选得到稳定转染的细胞株,并绘制细胞生长曲线.RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测hTERT、c-myc mRNA和蛋白表达.镜下观察干扰组细胞与对照组细胞对化疗药物的反应,并在紫杉醇给药后采用流式细胞术和细胞免疫化学的方法分别检测两组细胞的死亡率和细胞内微管组织状态.结果:干扰组细胞在6代以后hTERT的mRNA和蛋白表达水平均显著低于对照组,P<0.05,n=3,而c-myc的表达以及细胞的生长速度与对照组差异无统计学意义,P>0.05, n=3.干扰组细胞对化疗药物紫杉醇的反应明显不同于对照组,紫杉醇给药后干扰组细胞的死亡率(9.7%)高于对照组细胞(6.4%),但给药前后两组细胞内微管的分布差异无统计学意义,P>0.05, n=3.结论:单独下调HeLa细胞中hTERT的表达不能降低肿瘤细胞的生长速度,也不能显著改变c-myc的表达,却可以增加细胞对紫杉醇的敏感性,而hTERT是否参与微管的调节有待进一步探讨.     

薏苡仁酯对人鼻咽癌细胞体外增殖的影响

薏苡仁配合放射治疗晚期鼻咽癌(NPC)已取得较好的近期和远期效果[1].但单独使用薏苡仁能否抗NPC还值得深入研究.本文在既往研究的基础上,探讨薏苡仁的有效成分薏苡仁酯(CXL)对人NPC细胞增殖的影响及其可能的作用机理.     

SDSPAGE结合125I示踪法与ELISA法测定血中rh-bFGF的比较

目的：比较和评价SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS－PAGE）结合^125I示踪法与ELISA法测定血浆中重组人碱性成纤维细胞生长因子（recombinant human basic fibroblast growth factor,rh-bFGF)。方法：10只大鼠iv^125I-rh-bFGF1600ng/kg,用SDS－PAGE结合放射性计数测定血浆rh-bFGF含量。9只大鼠iv,rh-bFGF 1600ng/kg,用ELISA法测定血浆rh-bFGF含量。结果：两种方法的灵敏度、回收率和重现性好。ELISA法测定血浆rh-bFGF含量较SDS－PAGE结合^125I示踪法低。结论：SDS－PAGE结合^125I示踪法与ELISA均可满足药动学研究的要求。     

氯氨T氧化法制备高纯度125I-施万细胞源神经营养因子

【目的】探讨施万细胞源神经营养因子(SDNF)的放射性碘标记方法,以进一步用于放射免疫分析和放射性示踪研究。【方法】采用氯氨T氧化法对SDNF进行放射性碘标记,并对标记物质量进行鉴定。【结果】标记SDNF的放化纯度>98％,标记物在-20℃保存,22d内比较稳定,标记后对其生物活性没有影响。【结论】氯氨T氧化法可获得高纯度125I-SDNF,方法简便、可靠,标记物性质稳定。     

食管癌转移淋巴结放免显像定位的临床试验

目的：探讨放射免疫显像（radioimmunoimaging,RⅡ）在食管癌转移淋巴结定位的临床应用。方法：1.^131I标记抗人食管鳞瘤单抗G9,形成标记化合物,在胸段食管鳞癌的术前病例,于纤维食管镜下,用纤镜专用注射针,在食管原发灶周围,粘膜下注射^131I-G9后行RⅡ后,对清扫淋巴结行放射性测定。结果：1.注药48h时RⅡ在食管旁纵隔、贲门旁、胃小弯旁出现散在的细点状射性浓集,拟为转移淋巴结所在。2.显像出现散在放射性浓集区域所清扫的淋巴结中,包含有转移淋巴结;无浓集区域,未发现转移淋巴结。3.全部有转移淋巴结在放射性比活度（cpm/g）均比无转移者高,且均数高出两倍多。结论：用^131I-G9在食管鳞癌行放射免疫显像,对转移淋巴结有定位作用。     

前列腺癌单克隆抗体与平阳霉素偶联物导向化疗的体外作用

目的 探讨导向化疗对前列腺癌细胞系LNCaP的体外作用.方法 以葡聚糖为中介体制备抗前列腺癌单克隆抗体7E11C5.3与平阳霉素(PYM)的偶联物,用间接ELISA法测定其免疫活性,2,3,5-氯化三苯基四氮唑法测定其抑菌活性.四唑盐法测定其体外细胞毒作用.结果 偶联物中7E11C5.3和PYM的摩尔比为1:54,偶联后单抗的免疫活性降低了10%～20%,偶联物中PYM的抑菌活性为游离PYM的25%,偶联物和游离PYM对体外培养的LNCaP细胞50%抑制浓度分别为(9.41±1.98)μg/ml和(29.92μ7.88)μg/ml.结论 7E11C5.3-PYM偶联物的体外抗前列腺癌作用强于游离PYM.     

食管癌转移淋巴结放免显像定位的研究

目的：为放射免疫显像在诊断食管癌淋巴结转移中的应用,提供基础研究支持。方法：（１）免疫组化（ＬＳＡＢ法）测定不同组织冷冻切片和抗人食管鳞癌单抗Ｇ９的反应;（２）＾１２５Ｉ标记Ｇ９,形成标记化合物,在荷食管癌裸鼠腹腔注射＾１２５Ｉ－Ｇ９后的连续３天内,测定各主要组织、器官的放射性。结果：（１）ＩＳＡＢ显示,食管癌原发灶和转移淋巴结呈阳性反应,正常食管和无转移淋巴结阴性。（２）＾１２５Ｉ－Ｇ９在裸鼠体     

参苓白术散合鳖甲汤治疗肝纤维化的效果研究

目的:探讨用参苓白术散合鳖甲汤治疗肝纤维化的效果.方法:选取广西隆林各族自治县中医医院收治的60例肝纤维化患者作为研究对象.随机将其分为对照组和观察组,每组各有患者30例.对两组患者均进行常规治疗,在此基础上加用参苓白术散合鳖甲汤对观察组患者进行治疗,然后比较两组患者的肝功能指标及肝纤维化指标.结果:治疗后,观察组患者...     

188Re标记单克隆抗体BAC5及对鼻咽癌细胞的抑制实验研究

目的探讨放射性核素188Re标记抗鼻咽癌(NPC)单抗BAC5的方法及188Re-BAC5对鼻咽癌进行免疫导向治疗的可行性. 方法 188Re- BAC5的制备采用直接标记法,采用MTT法观察188Re-BAC5对体外单层培养的鼻咽癌细胞(CNE-2)的抑制作用,对照组为188Re-BSA、188ReO4-. 结果 188Re-BAC5的标记率在80% 以上,MTT法结果表明188Re-BAC5组的抑瘤率比对照组明显提高(p＜0.05). 结论提示188Re-BAC5有可能在对人鼻咽癌的放免导向治疗中起到良好的作用.     

分子医学实验室仪器设备管理的实践与探索

仪器设备管理是实验室工作的重要内容。分子医学实验室自组建以来，建立健全了仪器设备管理制度．在开放与培训、仪器共享与信息化管理方面进行了探索与实践，提高了仪器设备的使用效益，使实验管理与实验教学工作走上了良性循环、可持续发展的道路。